• 제목/요약/키워드: DEAE-cellulose chromatography

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Amino산-Xylose 갈변반응물질의 항산화성 3. 용매추출, Column Chromatography와 Gel여과에 의한 항산화성 갈변물질의 분리 (Antioxidant Activity of Amino Acid-Xylose Browning Reaction Products 3. Isolation of Antioxygenic Substances from Browning Reaction Products by Solvent Extraction, Column Chromatography and Gel Filteration)

  • 유병진;이강호;이종호
    • 한국수산과학회지
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    • 제20권4호
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    • pp.273-281
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    • 1987
  • In this work the antioxidant effects of browning reaction products prepared by xylose-tryrtophan reaction system were discussed. The antioxygenic brown pigments were separated by solvent extraction, and column chromatography and isolated by gel filteration. The functional groups of the brown pigments which had antioxidant activity were examined. The brown pigments extracted with methanol showed antioxidant effect and were fractionated in 5portions on DEAE-cellulose column. The elutes with methanol: acetic acid(10:30 v/v sol n(A), methanol: chloroform(95:5 v/v) sol n(C), and chloroform: acetic acid(10:30 v/v) sol n(E) only showed antioxidant activity and their compositions were 22.43, 21.51 and $34.43\%$ respectively. When each fraction on DEAE-cellulose column was reseparated on Sephadex LH-20 column, 2 fractions were obtained from portion A and C respectively. Molecular weights of A, C and E fraction of brown pigments were from 2,600 to 3,700. By elucidation of IR spectra, the pigment fractions which showed a strong antioxidant activity were tearing the indole group. It is suggested that the antioxidant function of the brown pigment is due to hydroxy and amino group. A higher activity of the brown pigment fraction E might be attributed to carboxylic acid or carboxylic ester compounds.

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콩 유용성분 탐색에 관한 연구: 콩 Ferritin의 정제 및 특성 (Investigation of useful components in soybean seeds: Purification and characterization of soybean ferritin)

  • 서경원;오석홍
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제41권7호
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    • pp.522-526
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    • 1998
  • 콩 유용성분 탐색의 일환으로 그리고 향후 콩 ferritin 항체 및 유전자 확보를 목표로 발아된 콩으로부터 ferritin을 분리 정제하여 그 몇가지 특성을 조사하였다. 72시간 발아된 콩으로부터 ammonium sulfate 침전(0.55 saturation), DEAE-cellulose, Sephacryl S-300, Bio-Scale Q2 column chromatographies를 통하여 ferritin을 분리하였다. 정제된 콩 ferritin은 SDS-PAGE 분석에서 21 kDa의 크기를 나타냈으며, Sephacry S-300을 통한 겔거르기 chromatography와 non-denaturing 폴리아크릴아마이드 전기영동 분석에서 $510{\sim}560\;kDa$의 크기로 측정 되었다. 또한, immunodiffusion test에서 anti-soybean ferritin antiserum과 상호 반응하였다. 원자흡광광도계와 표준 철 용액을 이용한 정제된 콩 ferritin 중의 철 함유량은 833 mol Fe/mol protein 이었으며, 이는 호박씨로부터 분리한 ferritin보다 31배 더 많은 양의 철 함유량 이었다. 정제된 콩 ferritin중의 철은 horse spleen ferritin 중의 철과 유사하게 iron staining 되었다.

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청국장에서 분리한 Bacillus licheniformis HK-12의 혈전용해활성과 프로테옴 분석 (Fibrinolytic Activity and Proteomic Analysis of Bacillus licheniformis HK-12 Isolated from Chungkuk-Jang)

  • 손병희;권상철;오계헌
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제9권3호
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    • pp.800-806
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    • 2008
  • 자연발효된 청국장으로부터 혈전용해활성을 가지는 세균 Bacillus licheniformis HK-12를 농화분리하여, 배양기간 동안 생산된 혈전용해활성을 가지는 단백질에 대해 프로테옴 분석을 실시하였다. B. licheniformis HK-12를 액체 영양배지에 접종하여 얻어진 배양상등액을 피브린 평판법(fibrin plate method)을 사용하여 효소활성을 측정하였다. 그 결과, HK-12의 혈전용해 활성은 대조구인 plasmin보다 약 2.3배정도 높은 활성을 나타내었다. 효소는 배양상등액을 ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex chromatography 등을 수행하여 분리정제하였으며, 정제된 혈전용해효소의 분자량은 SDS-PAGE를 통해 약 23 kDa로 측정되었다. 배양시간에 따른 HK-6의 세포외 단백질의 변화를 2-D PAGE 분석을 통하여 분석하였다. 그 결과 36시간배양 후에 가장 현저하게 유도된 spot #1을 분리하였으며, MALDI-TOF MS를 이용하여 단백질 동정을 실시한 결과, 유도된 단백질의 아미노산 서열은 $^1EKKIEKYREEEORLK^{15}$으로서, serine protein kinase (PrkA) (AAU22526)로 확인되었다.

Alcaligenes eutrophus A52의 무세포 추출액에 의한 D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam으로부터 L-Lysine으로의 전환 (Conversion of D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam into L-Lysine Using Cell-free Extracts of Alcaligenes eutrophus A52)

  • 박희동;최선택;이인구
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.375-380
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    • 1987
  • Alcaligenes eutrophus A52의 무세포 추출액으로부터 유안염석 및 DEAE-cellulose 이온교환 크로마토그래피로서 D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam(DAC) racemase 와 L-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam(LAC) hydrolase를 분획하였다. A. eutrophus A52에 의한 DAC로부터 L-lysine으로의 전환은 DAC가 racemase에 의해 LAC로 전환된 후 hydrolase에 의해 L-lysine으로 가수분해됨을 확인하였다. DEAE-cellulose 이온교환 크로마토그래피에 의해 분리된 racemase의 분획은 최적온도가 55$^{\circ}C$, 최적 pH는 8.0이었으며 hydrolase의 분획은 최적온도가 $65^{\circ}C$ 최적 pH가 9.0이었다. 이 두 효소를 모두 함유하는 무세포 추출 액에 의한 DAC로부터 L-lysine으로의 전환은 6$0^{\circ}C$와 pH8.5에서 최대를 나타내었고 2% 이상의 DAC와 L-lysine에 의해 상당한 저해를 받았으나 0.5% DAC를 3.1mg의 단백질에 상당하는 무세포 추출액으로서 전환시킨 결과 55$^{\circ}C$에서 10시간 동안에 약 98%가 L-lysine으로 전환되었다.

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핵산분해효소에 관한 연구 (제2보) Streptornyces속 균주가 생산하는 Phos-phodiesterase의 정제 및 성질

  • 이정치;양한철
    • 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국미생물생명공학회 1979년도 춘계학술대회
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    • pp.115.1-115
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    • 1979
  • Streptomyces속 균주가 생산하는 Phospholieste-rase를 몇가지 방법에 의하여 정제하여 그 성질을 조사 검토했다. 1) Sephadex G-50 및 DEAE-Cellulose Column Chromatography에 의하여 300배 정제하였으며 그 수율은 3.8%이었다. 2) b-PNPP을 기질로 해서 정제한 본 효소의 성질을 검토한 결과 본효소의 활성발현에 $Ca^{++}$ 이온이 필요했으며 $Ca^{++}$ 이온은 이 효소의 열안정성에도 도움을 주었다. 또 이효소의 최적작용 pH는 8.0부근이었으며 최적작용온도는 $50^{\circ}C$ 부근이었고 b-PNPP 을 기질로 한 Km 치 는 1.11mg/mι 이었다.

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Arthrobacter sp. L-3이 생성하는 Glucose Isomerase의 정제 (Purification of Glucose Isomerase from Arthrobacter sp. L-3)

  • 방병호;남궁석
    • 한국식품영양학회지
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    • 제4권2호
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    • pp.155-160
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    • 1991
  • Authrobacter sp. L-3이 생성하는 glucose isomerase를 DEAE-cellulose column chromatography법으로 2단계 NaCl농도 구배로 용출함으로서 순수분리하였다. 이것이 SDS-acrylamide gel electrophoresis상에서 단일띠를 보임으로서 매우 잘 분리되었음을 알 수 있었다. Glucose isomerase의 Km값과 Vmax값이 각각 0.175M, 0.29로 얻어졌다. 한편, SDS-acrylamide gel electrophoresis와 Sephadex-G10050에 의한 gel filtration으로부터 분자량이 각각 42,000과 180,000으로 얻어져, 이 효소는 분자량이 42,500인 4개의 subunit로 구성되었음을 알 수 있었다.

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애엽의 혈액 응고 억제 성분에 관한 연구 (Studies on the Anti-coagulant Component of Artemisiae Herba)

  • 한용남;양현옥;한병훈
    • 약학회지
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    • 제28권2호
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    • pp.69-77
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    • 1984
  • Anti-coagulant activities of 25 species of medicinal plants which have been related to "blood" in ethnobotany, were evaluated by plasma recalcification time test. Among these, Artemisiae Herba showed the strongest activity. Its anti-clotting component was purified by using DEAE-cellulose, Sephadex G-75, and Sephadex LH-20 column chromatography. Its active compound has an average molecular weight of approximately $10^{4}$ and it was turned to be an acidic polysaccharide composed of galacturonic acid and rhamnose (7 : 2) by chemical analysis and spectral data.

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호알칼리성 Streptomyces sp.B-2에 의한 Glucose Isomerase의 정제 (Purification of Glucose Isomerase from ALkalophilic Streptomyces sp. B-2)

  • 이은숙;이준우
    • 동아시아식생활학회지
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    • 제10권5호
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    • pp.439-444
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    • 2000
  • 호알칼리성 방선균 Streptomyes sp. B-2를 Glucose Isomerse 생성을 위해 토양에서 분리했다. Glucose Isomerase(G.I)는 high fructose glucose syrup과 fructose의 생산을 위해서 식품 공업에서 아주 중요시되고 있는 효소이다. 호알칼리성 방선균 Streptomyces sp. B-2가 생성하는 glucose isomerase(G.I.)를 정제하였다. G.I.는 (NH$_4$)$_2$So$_4$분획, DEAE-cellulose, Sephadex G-200 chromatography하여 순수 분리 하였다. 순수분리된 G.I.는 electrophoresis에 의해 확인을 했다. SDS-acrylamide gel electrophoresis에 의해 정제된 효소는 single band를 보여주었다.

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미국자리공(Phytolacca americana L.) 뿌리의 항균 펩타이드 정제 및 특성연구 (Purification and Charaterization of Antimicrobial Peptide from Roots of Pokeweed)

  • 김정주;장혜영;김재호
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제46권4호
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    • pp.385-390
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    • 2003
  • 미국자리공(Phytolacca americana L.) 뿌리에서 항균 펩타이드를 분리하여 PAMP-r로 명명 하였다. 분리는 DEAE-cellulose, sephadex G-75, Mono S, Resource RPC등을 거쳐 이루어 졌으며 최종산물은 15% SDS-PAGE 에서 약 4,900 Da의 분자량을 보였다. PAMP-r는 광범위한 항균활성을 나타냈으며 온도와 pH변화에도 높은 안정성을 보였다. 항균활성은 $80^{\circ}C$에서 30분동안 유지될 뿐만 아니라 pH도 3.0의 산성에서부터 pH 8.0의 알카리에 이르기까지 광범위한 범위 안에서 안정하게 나타났다.