Raphanus sativus (Cruciferaceae), commonly known as radish is widely available throughout the world. From antiquity it has been used in folk medicine as a natural drug against many toxicants. The present study was designed to evaluate the hepatoprotective activity of radish (Raphanus sativus) enzyme extract (REE) in vitro and in vivo test. The $IC_{50}$ values of REE in human liver derived HepG2 cells was over 5,000 ${\mu}g/ml$ in tested maximum concentration. The effect of REE to protect tacrine-induced cytotoxicity in HepG2 cells was evaluated by MTT assay. REE showed their hepatoprotective activities on tacrine-induced cytotoxicity and the $EC_{50}$ value was 1,250 ${\mu}g/ml$. Silymarin, an antihepatotoxic agent used as a positive control exhibited 59.7% hepatoprotective activity at 100 ${\mu}g/ml$. Moreover, we tested the effect of REE on carbon tetrachloride ($CCl_4$)-induced liver toxicity in rats. REE at dose of 50 and 100 mg/kg and silymarin at dose of 50 mg/kg were orally administered to $CCl_4$-treated rats. The results showed that REE and silymarin significantly reduced the elevated levels of serum enzyme markers induced by $CCl_4$. The biochemical data were supported by evaluation with liver histopathology. These findings suggest that REE, can significantly diminish hepatic damage by toxic agent such as tacrine or $CCl_4$.
Shin, Han-Jae;Cho, Hyun Gi;Park, Chang Kyun;Park, Ki Hong;Lim, Heung Bin
Toxicological Research
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제33권4호
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pp.305-313
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2017
Accumulating epidemiological evidence indicates that exposure to fine air pollution particles (APPs) is associated with a variety of adverse health effects. However, the exact physiochemical properties and biological toxicities of fine APPs are still not well characterized. We collected four types of fine particle (FP) (diesel exhaust particles [DEPs], natural organic combustion [NOC] ash, synthetic organic combustion [SOC] ash, and yellow sand dust [YSD]) and investigated their physicochemical properties and in vitro biological toxicity. DEPs were almost entirely composed of ultrafine particles (UFPs), while the NOC, SOC, and YSD particles were a mixture of UFPs and FPs. The main elements in the DEPs, NOC ash, SOC ash, and YSD were black carbon, silicon, black carbon, and silicon, respectively. DEPs exhibited dose-dependent mutagenicity even at a low dose in Salmonella typhimurium TA 98 and 100 strains in an Ames test for genotoxicity. However, NOC, SOC, and YSD particles did not show any mutagenicity at high doses. The neutral red uptake assay to test cell viability revealed that DEPs showed dose-dependent potent cytotoxicity even at a low concentration. The toxicity of DEPs was relatively higher than that of NOC, SOC, and YSD particles. Therefore, these results indicate that among the four FPs, DEPs showed the highest in vitro biological toxicity. Additional comprehensive research studies such as chemical analysis and in vivo acute and chronic inhalation toxicity tests are necessary to determine and clarify the effects of this air contaminant on human health.
표고버섯 분말을 첨가한 천연조미료의 추출물 및 분획물에 대한 항산화 활성은 에틸아세테이트 분획물에서 $RC_{50}$값 $155{\mu}g$으로서 다른 시료보다 강한 항산화 활성을 나타내었다. 표고버섯 분말을 첨가한 천연조미료 추출물 및 그 분획물들의 항돌연변이 효과의 검토는 Salmonella Typhimurium의 변이주인 TA98과 TA100을 이용한 Ames test로 확인하였다. 그 결과 직접변이원인 MNNG에 대해 시료농도 $200{\mu}g/plate$에서 핵산과 에틸아세테이트 분획물은 TA100에서 $79{\sim}84%$의 강한 항돌연변이원성을 보였고 다른 시료에서도 65% 이상의 저해효과를 보였다. 4NQO에 대해서는 TA98과 TA100에서 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 저해효과를 나타내었다. 암세포 성장 억제효과를 검토한 결과 표고버섯 분말을 첨가한 천연조미료 에탄을 추출물 1 mg/mL 첨가 시 HeLa, Hep3B, MCF-7, AGS 및 A549에서 각각 83.3%, 61%, 81.3%, 58.9% 및 36.7%의 억제효과를 보였다. 표고버섯 분말을 첨가한 천연조미료 분획물에 대한 억제효과는 시료 농도 1 mg/mL 첨가 시 에틸 아세테이트 분획물의 경우 폐암세포인 A549 세포에 대하여 55.7%의 억제효과를 보인 것을 제외하고는 $71{\sim}85%$ 정도의 높은 억제효과를 보였으나 물 분획물의 경우 다른 추출물과 비교 시 암세포에 대해 상대적으로 낮은 억제효과를 나타내었다. 이러한 암세포에 대한 높은 억제효과에 비해 인간 신장 정상세포 293에 대한 시료를 첨가 시 40% 이하의 생육 억제율을 나타냄으로써 정상세포에 대해서는 낮은 독성효과를 가짐을 알 수 있었다.
세정제에 널리 상용화되어 있는 알킬에톡시설페이트 계의 음이온 계면활성제는 피부 흡착의 특성 때문에 충분히 헹구어 내지 않으면 피부에 잔존되어 자극의 원인이 되어 염증 반응을 일으키게 된다. 따라서 기존의 음이온 계면활성제를 대체 또는 보완하기 위해 기존의 계면활성제들을 단백질 변성 실험, 세포 독성 그리고 IL-1$\alpha$ 측정을 통해 선별하였다. 본 연구는 저자극성의 음이온 또는 비이온, 양쪽성 이온의 14종의 계면활성제와 민감성 피부를 위해 제조된 13종의 기존 세정제 제품에 대한 세포독성을 실시하여, 가장 독성이 낮은 계면활성제로 sodium laureth sulfate (음이온), sodium cocoyl isethionate (음이온), sodium lauroamphoacetate (양성이온), cocamidopropyl betaine (양성이온), alkyl polyglycoside (비이온)가 선택되었고 2종의 기존 세정제 제품을 비교 제형으로 선택하였다. 5종의 계면활성제를 20종의 formulation으로 제조하여 단백질 변성( <3M SLS ($13.2\%$)), 세포독성 실험 및 폐첩포 실험을 통하여 다시 5종을 선별하였다. 이들 제형을 진피 배양으로 세포독성 및 IL-1$\alpha$ 방춘량을 조사하여 가장 자극이 낮은 계면활성제 제형을 선택하였으며, 첨가된 계면활성제의 자극을 완화하기 위하여 항염과 보습 효과가 우수한 마치현 추출물($3\%,\;5\%$)과 fructan ($3\%,\;5\%$)을 농도별로 첨가한 제형을 제조하여 가장 안전성이 뛰어난 농도를 선택하였다. 최종적으로 선택된 제형 5번을 3차원 세포 배양을 통한 인공피부를 이용하여 가장 자극이 낮게 나타난 기존의 제품들과 세포 독성 및 IL-1$\alpha$ 방출량을 비교 조사하여 저자극성의 액체 세정제를 개발하였다.
본 연구는 적작약 꽃 추출물의 활성산소 억제와 항염증 및 MMP-1 발현 억제능 효과에 관해 알아보고 기능성 화장품 소재로써의 가능성을 확인하고자 하였다. 본 실험 방법으로는 세포 내 ROS 측정을 통한 활성산소 억제효과와 세포 독성 평가 및 항염증 측정, HDF 세포에서의 MMP-1의 발현 억제능 효과를 측정하고자 하였다. 실험 결과, RAW 264.7 세포와 HDF 세포 내에서 ROS로 억제효과를 확인하였고, 세포 독성평가는 적작약 꽃 추출물 5, $10{\mu}g/mL$ 처리 농도에서 90% 이상의 세포 생존율, 그 외 처리 농도에서는 80% 이상의 세포 생존율을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 세포에서의 NO 생성 억제와 HDF 세포에서 MMP-1의 발현 억제능이 유의하게 억제되는 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하면, 적작약 꽃 추출물의 세포 내 ROS 생성억제와 NO 생성 억제로 항산화와 항염증 효과, 피부세포에 대한 낮은 독성, MMP-1의 발현 억제를 통한 노화 효과가 확인됨에 따라 기능성 화장품 소재로써의 활용 가능성을 확인할 수 있었다.
In order to search for anti-influenza virus type A agents from Korean medicinal herbs, we selected 100 medicinal herbs, based on a review of the Korean traditional medicine books. Four of 100 Korean medicinal herbs, MM-40, MM-55, MM-63, MM-110, exhibited very strong anti-influenza virus activity. The fractions of four medicinal herbs, which had very strong anti-influenza virus activity, were tested for antiviral activity by means of Haemagglutination inhibition test(HTT), 40% MeOH fraction of MM-40, $H_2O$ fraction of MM-55, 20% fraction of MM-63 3nd $H_2O$ fraction of MM-110 had strong anti-influenza virus activity at the range of $78{\mu}g/ml$ to $156{\mu}g/ml$, 1.56mg/ml to 100mg/ml, 6.25mg/ml to 50mg/ml and $48.7{\mu}g/ml$ to $780{\mu}g/ml$, respectively. These results of HIT indicated that fractions of Korean medicinal herbs might inhibit either attachment of virus to cell surface receptor or penetration of virus into cell during the initial stage of infection. In the cytotoxicity of fractions against red blood cells, 40% MeOH fraction of MM-40, 20% fraction of MM-63 and $H_2O$ fraction of MM-110 showed cytotoxicity at the range of $78{\mu}g/ml$ to 10mg/ml, 50mg/ml to 100mg/ml and $195{\mu}g/ml$ to 100mg/ml, respectively, whereas $H_2O$ fraction of MM-55 did not show cytotoxicity. In order to establish influenza virus adapted animal model, influenza virus type A were passaged 3 and 4 times successively in Balb/c mouse. As a result, we had 4 HA unit titers on the 5 days of 3rd passages and 7 days of 4th passages after infection, respectively.
B. amyloliquefaciens IUB158-03균주에서 정제된 항진균물질은 극성인 용매에 잘 용해되고, pH 6.0~10.0와 $-70{\sim}121^{\circ}C$에서와 같이 넓은 범위의 온도 및 pH에서 안정성을 보였다. 항진균물질의 FAB-MS, UV 흡수 스펙트럼, 아미노산 조성 등을 분석한 결과 분자량은 1,042 이었고, TLC를 이용하여 분석한 결과 ninhydrin solution에서 보라색으로 발색되었다. UV 스펙트럼은 220 nm, 277 nm에서 ${\lambda}max$를 보였으며, $Asn_3$, $Gln_2$, $Ser_1$$Gly_1$, $Tyr_1$의 아미노산 조성을 갖는 것으로 나타났다. 그리고 $^1H$-NMR spectrum, $^1H$-COSY, HMQC 을 분석한 결과 iturin A계에 속하는 물질로 확인되었다. NIH3T3 섬유아세포에 대해 항진균물질이 세포독성을 나타내지 않는 것은 물론 마우스에 항진균물질을 경구투여하여 장기 내의 변화와 백혈구 수, 생체내의 생리적인 기능면에서 정상 마우스와 차이를 보이지 않았으므로 생체독성이 없는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구를 통하여 B. amyloliquefaciens IUB158-03에서 분리된 항진균물질이 앞으로 고추탄저병의 생물적 방제제로 이용될 수 있는 잠재성을 갖고 있는 것으로 사료된다.
Statement of problem: Ti-alloy has been used widely since it was produced in the United States in 1947 because it has high biocompatibility and anticorrosive characteristics. Purpose: The pure titanium, however, was used limitedly due to insufficient mechanical charateristics and difficult manufacturing process. Our previous study was focused on the development of a new titanium alloy. In the previous study we found that the Ti-Ta-Nb alloy had better mechanical characteristics and similar anticorrosive characteristics to Ti-6Al-4V Material and methods: In this study, the cytotoxicity of the Ti-Ta-Nb alloy was evaluated by MTT assay using MSCs(Mesenchaimal stem cells) and L929 cells(fibroblast cell line). The biocompatibility of the Ti-Ta-Nb alloy was performed by inserting the alloy into the femur of the rabbits and observing the radiological and histological changes surrounding the alloy implant. Results: 1. In the cytotoxicity test using MSCs, the 60% survival rate was observed in pure titanium, 84% in Ti-6Al-4V alloy and 95% in Ti-10Ta-10Nb alloy. 2. In the animal study, the serial follow-up of the radiographs showed no separation or migration revealing gradual bone ingrowth surrounding the implants. Similar radiographic results were obtained among three implant groups pure titanium, Ti-6Al-4V alloy and Ti-10Ta-10Nb alloy. 3. In the histologic examination of the bone block containing the implants. the bone ingrowth was prominent around the implants with the lapse of time. There was no signs of any tissue rejection, degeneration, or inflammation. Active bone ingrowth was observed around the implants. In the comparison of the three groups, the rate of bone ingrowth was better in the Ti-10Ta-10Nb alloy group than those in pure titanium group or Ti-6Al-4V alloy group. In conclusion, Ti-10Ta-10Nb alloy revealed better biocompatibility in survival rate of the cells and bone ingrowth around the implants. Therefore we believe a newly developed Ti-10Ta-10Nb alloy can replace currently used Ti-6Al-4V alloy to increase biocompatibility and to decrease side effects. Conclusion: In conclusion, Ti-10Ta-10Nb alloy revealed better biocompatibility in survival rate of the cells and bone ingrowth around the implants. Therefore we believe a newly developed Ti-10Ta-10Nb alloy can replace currently used Ti-6Al-4V alloy to increase biocompatibility and to decrease side effects.
Mistletoe (Viscum album) has been widely used as a functional food material for various therapeutic purposes from ancient time. In this study, we examined anti-diabetic and cytotoxic activities of heated-treated mistletoe and the effects of gamma-irradiation on its activities. Heat-treated mistletoe extract was prepared by heating during different time (3, 6, 9 and 12 h) and gamma-irradiated with different doses of 0, 10, 30, 50, 70 and 100 kGy. Heat-treated mistletoe extracts showed a concentration-dependent cytotoxicity on rat insulinoma RINm5F cells and the effect was gradually decreased as heating time increased up to 12 h. 12 h heat-treated extract was no cytotoxic. Gamma-irradiation enhanced the reduction of heat-treated mistletoe-induced cytotoxicity and the decreasing effect was an irradiating dose-dependent. In particular, all of 70 kGy irradiated and heat-treated mistletoe extracts did not showed the cytotoxicity and the effect was comparable to 12 h heat-treated mistletoe extract. Among those extracts, 3 h heat-treated mistletoe extract gradually increased the insulin secreting activity by gamma-irradiation and the effect was the best at 70 kGy, whereas 12 heat-treated extract was no effect. On the test of ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity, 3 h heat-treated mistletoe extract showed the concentration dependent effects and gamma-irradiation induced more activity at 70 kGy, compared to non-irradiated 3 h and 12 h heated mistletoe extracts. These results suggest that the combination of heat treatment and gamma-irradiation might be more effective than only heat-treatment for improving the anti-diabetic activity of mistletoe extract and reducing its cytotoxicity.
Gabriela Leite de Souza ;Camilla Christian Gomes Moura ;Anielle Christine Almeida Silva ;Juliane Zacour Marinho;Thaynara Rodrigues Silva ;Noelio Oliveira Dantas;Jessica Fernanda Sena Bonvicini ;Ana Paula Turrioni
Restorative Dentistry and Endodontics
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제45권4호
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pp.54.1-54.16
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2020
Objectives: This study aimed to synthesize nanocrystals (NCs) of zinc oxide (ZnO) and calcium ion (Ca2+)-doped ZnO with different percentages of calcium oxide (CaO), to evaluate cytotoxicity and to assess the effects of the most promising NCs on cytotoxicity depending on lipopolysaccharide (LPS) stimulation. Materials and Methods: Nanomaterials were synthesized (ZnO and ZnO:xCa, x = 0.7; 1.0; 5.0; 9.0) and characterized using X-ray diffractometry, scanning electron microscopy, and methylene blue degradation. SAOS-2 and RAW 264.7 were treated with NCs, and evaluated for viability using the MTT assay. NCs with lower cytotoxicity were maintained in contact with LPS-stimulated (+LPS) and nonstimulated (-LPS) human dental pulp cells (hDPCs). Cell viability, nitric oxide (NO), and reactive oxygen species (ROS) production were evaluated. Cells kept in culture medium or LPS served as negative and positive controls, respectively. One-way analysis of variance and the Dunnett test (α = 0.05) were used for statistical testing. Results: ZnO:0.7Ca and ZnO:1.0Ca at 10 ㎍/mL were not cytotoxic to SAOS-2 and RAW 264.7. +LPS and -LPS hDPCs treated with ZnO, ZnO:0.7Ca, and ZnO:1.0Ca presented similar NO production to negative control (p > 0.05) and lower production compared to positive control (p < 0.05). All NCs showed reduced ROS production compared with the positive control group both in +LPS and -LPS cells (p < 0.05). Conclusions: NCs were successfully synthesized. ZnO, ZnO:0.7Ca and ZnO:1.0Ca presented the highest percentages of cell viability, decreased ROS and NO production in +LPS cells, and maintenance of NO production at basal levels.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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