This study was undertaken to develop an efficient propagation technique for mature Betula davurica. Using aseptic materials taken from in vitro culture, the effects of media and plant growth regulators on shoot proliferation and rooting were investigated. DKW medium turned out to be the best in shoot proliferation among the media tested. Whereas axillary buds were better culture material than apical buds in proliferation of shoots, apical buds were slightly better than axillary buds on shoot elongation. Neither 1 /2 MS nor WPM medium seemed to be suitable for shoot multiplication or elongation. When the explants were cultured on 1/2 MS medium, shoot elongation was retarded by forming big callus at the base. In the case of WPM, shoots could be formed normally, but they exhibited slow growing. NAA was so effective on in vitro rooting that more than 80% rooting could be achieved on half-strength DKW medium supplemented with 1.0 mg/L NAA after 4 weeks in cultures. Ex vitro rooting using elongated shoot was also applicable to rooting and acclimatization. Rooted plantlets were successfully acclimatized in an artificial soil mixture and grew normally. The results demonstrate that efficient mass propagation of mature B. davurica can be done through tissue culture.
The effect of auxins and cytokinins on the formation of adventitious shoots, adventitious roots, trichomes, and calli in MS basal medium was investigated in leaf segments from ecotype Columbia of Arabidopsis thaliana. Adventitious shoots, adventitious roots, trichome, and calli were formed from leaf segments by a wide range of hormone concentrations and combinations. Adventitious shoots were formed respectively in treatment with 0.1mg/L IAA and 10 mg/L BA. Adventitious roots were formed in treatments with low concentration of IAA and NAA. Trichomes and calli were formed by increasing the concentration of IAA and NAA. The optimal combination was 0.5mg/L NAA and 0.1mg/L BA for trichome formation, 10mg/L NAA and 10mg/L BA for calli formation. When NAA was treated alone in culture media, adventitious roots were formed in 0.1mg/L, trichomes were formed in 2.0mg/L, and calli were formed in 10mg/L. Inductive time for formation of adventitious roots, trichomes and calli were determined at 6,7 and 18 days respectively by periodical transfer of leaf segments from NAA containing medium to NAA free medium.
Hormonal requirements inducing different regeneration pathways with particular emphasis on somatic embryo-genesis in Alhagi graecorum were studied. While combination of 0.5 $\mu{M}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), 2.5 $\mu{M}$ 6-benzylaminopurine (BAP) and 5 $\mu{M}$ 1-naphthaleneacetic acid (NAA) in MS medium induced callus formation and callus maintenance from internodal explants, each alone or in combination with other induced distinct regeneration pathway. Adventitious bud formation was induced on MS medium supplemented with 2.5 $\mu{M}$ BAP. It was improved when 2.5 $\mu{M}$ BAP was used in combination with 5 $\mu{M}$ NAA. MS medium containing 0.5 $\mu{M}$ 2,4-D or 5 $\mu{M}$ NAA induced the formation of abnormal direct somatic embryos. While increase of 2,4-D concentration (1.125-9) resulted in the formation of viable embryogenic mass, increase of NAA did not change its effect. NAA should be used in combination with 2,4-D even at low concentration (0.5 $\mu{M}$) to form embryogenic mass. In A. gaecorum, the role of 2,4-D as trigger of somatic embryogenesis and BAP as trigger of adventitious bud formation was deduced, but for maximum yield certain auxin-cytokinin ratio should be applied. Embryogenic masses characterized by high water content, low peroxidase activity, and low number of peroxidase and glutamate oxaloacetate transaminase bands in comparison with calli obtained under conditions stimulating adventitious bud formation. The resulted differential gene expression, which could be detected by native-PAGE patterns, could be used as marker for organogenic pathway in A. graecorum.
Kim ,Kwang-Soo;Sung, Nak-Sool;Kim, Myung-Won;Pyo, Byung-Sik;Hwang, Baik
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.24
no.6
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pp.357-360
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1997
Multiple shoot formation was obtained from excised axillary buds of Achyranthes japonica NAKAI cultured on MS media containing various growth regulators such as auxin and cytokinin. The highest average number of shoots was obtained in 1 mg/L NAA and 2 mg/L BA after 6 weeks (25.8 adventitious shoots per node). Although the regeneration rate was less than the former condition, optimal combination for the production of more shoots with a suitable size was 0.5 mg/L NAA and 1 mg/L BA (19.7 adventitious shoots per node). Roots were induced from regenerated shoots after 3 weeks culture, transferred to 1/2 MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA. Micropropagated plants were successfully transferred to soil.
A specific deleted version of ARABIDOPSIS RESPONSE REGULATOR1 (ARR1) lacking the signal receiver domain (1.152 amino acids)-coding sequence, referred to as $ARR1{\Delta}DDK$, was amplified using Arabidopsis thaliana cDNA prepared from adult leaves and transferred into the genome of Nicotiana tabacum cv. Samsun under the transcriptional control of a ${\beta}$-estradiol-inducible expression system. The ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ affected the morphology of transgenic seedlings and their segments in vitro. In the presence of an inducer, ${\beta}$-estradiol, ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ induced only the formation of soft, pseudo-bulbous tissue in the root tip region of intact seedlings, which appeared similar to callus generated on a hypocotyl segment in the presence of 2,4-D and 6-benzyladenine (BA), both at $1\;{\mu}M$. Those callus tissues on the root tip region could not generate shoots unless $1\;{\mu}M$ BA was supplied. In segment culture, ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ induced calluslike tissue around the cut-end of cotyledon and hypocotyl segments with occasional shoot formation, suggesting that the expression of $ARR1{\Delta}DDK$ could substitute for the effects of cytokinin on these segments. Additionally, treatment with only ${\beta}$-estradiol induced NtWUS, a WUS ortholog in tobacco, which was detected during the process of callus tissue formation in the root tip region and also in cotyledon or hypocotyl segments. These findings suggest that the NtWUS might be associated in the transdifferentiation process caused by the functional regulation of $ARR1{\Delta}DDK$ in transgenic tobacco seedlings.
The influences of ethylene inhibitors ($AgNO_3$ and silver thiosulfate) and cytokinins (BAP and TDZ) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of B. napus cv. Youngsan were investigated. The presence of $50{\mu}M$ Silver thiosulfate (STS) in shoot regeneration medium formed shoots at 60-68% after 3-4 weeks of culture, which was enhanced by 2-fold compared to that of Silver nitrate ($AgNO_3$). Moreover, cotyledon explants were more regenerative than hypocotyls; shoots from cotyledon explants began to occur 4-5 days earlier than that of hypocotyl explants. TDZ at a concentration of $8-10{\mu}M$ was effective for shoot regeneration, compared with BAP. Consequently, the optimal shoot regeneration response was observed in medium supplemented with $50{\mu}M\;STS+8{\mu}M\;TDZ$. In transmission electron microscopy (TEM) analysis, higher density of silver nanoparticles was shown to be accumulated widely inside the cell wall and plasmodesmata of regenerating leaf cultured in medium supplemented with $AgNO_3$. By contrast, in the cell cultured in medium with STS, fine-grained deposits were partly observed in the surroundings of the cell wall.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.9
no.3
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pp.124-128
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1989
This experiment was conducted to determine factors affecting callus induction of Vernal alfalfa. Growth regulators, basal medium, medium pH, explant age, and agar concentration for callus induction were investigated. The results obtained were as follows: For the callus induction, 2-5 mg/l 2,4-D alone was found to be most effective on callus induction. Cytokinins did not have positive effect on the callus induction, and even the more cytokinin added induced the less callus. Callus yield was much higher in B5 or SH medium than in any other media. The calli induced in PC and MS media were more friable than those induced in other media. The medium pH of 5.8 gave the best response of callus induction. At higher than pH 7.0, callus induction was inhibited severely. The effective seedling age for callus induction was around 9 days. In agar concentration, 0.5 % (W/V) was suitable for callus induction and it was severely depressed at above 1 %. Callus induction was not influenced by day length or illumination. Calli cultured under 1618 hour lightldark cycle became more compact and green than those cultured under the dark.
Lee, Joung Won;Kim, Chung Woo;Oh, Ha Kyung;Lee, Kyeong Hee;Lee, Seong Kyun;Kim, Sang Hee;Hong, Eui Yon
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.25
no.3
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pp.160-164
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2017
Background: This study were performed to determine the effect of root pruning of Zizyphus jujuba var. inermis (Bunge) Rehder. Root cutting inhibit vegetative growth and promote reproductive growth as temporarily reducing growth, net assimilation, water potential of leaf and cytokinin level. Methods and Results: The root pruning was treated of the root cutting widths 50, and 80 ㎝ and the root cutting depths 10, and 20 cm. The amount of root pruning and the number of suckers were the highest in the root-pruning treatment at a width of 50 cm and a depth of 20 cm. The blooming time was from June 18 to 20, and no difference was observed in the blooming time among the root-pruning treatments. The number of flowers was rather higher in the root-pruning treatment at a width of 50 cm and a depth of 20 cm and at a width of 80 cm and a depth of 20 cm. The percentage of fruit setting was higher in the plants whose roots were pruned at a depth of 20 cm than in the untreated plants. The fruit size, fruit weight, and sugar content showed no difference among the root-pruning treatments. Conclusions: The results showed that percentage of fruit setting increased with root pruning, while no difference was observed in the growth and fruit quality of plants.
Axillary bud explants from 3-year-old seedlings of Forsythia saxatilis N., rare and endangered species in Korea, were cultured on Murashige and Skoog's medium. The effect of various cytokinins(BAP, kinetin, and zeatin) at the different concentration(0.2, 0.5 and 1.0mg/L) was tested. Although an apparent shoot proliferation was not observed, zeatin showed slight promotional effect on normal shoot and leaf development. Both shoots and adventive roots could be induced simultaneously when the explants were cultured on the medium with kinetin, but adventive rooting was gradually reduced according as BAP and zeatin concentrations increased. Axillary shoot growth was promoted by the etiolation treatment. Shoot proliferation has been maintained more than three years with consecutive subculture. Rooted plantlets were successfully acclimatized in the artificial soil mixture and showed normal growth after transplantation into field.
In vitro culture system was established to induce multiple shoots of Albizzia julibrissin Duraz. by investigating the effects of cytokinins. Cotyledon, hypocotyl and root explants were cultured on MS media supplemented with either three different plant growth regulators or their combinations. The most effective cytokinin sources were zeatin 2.0 + TDZ 0.5 mg/L in cotyledon, zeatin 1.0 mg/L in hypocotyl, and BA 0.2 + TDZ 0.01 mg/L in root explant for producing shoots ($5.67\;{\pm}\;1.20$, $19.50\;{\pm}\;3.50$, and $20.50\;{\pm}\;2.47$, respectively). Also, zeatin treatment was tended to induce more shoots rather than the combinations of other cytokinins. In addition, the root induced in 1/2 MS medium without any plant growth regulators was longer and thicker than treatments of IBA, NAA, IAA and 2.4-D as auxins. Overall, the highest average percent of in vitro shoot formation was 73% from three different types of explants with treatment of zeatin (1.0mg/L).
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