Perveen, Shazia;Yang, Ji Seon;Ha, Tae Joung;Yoon, Shin Hee
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제18권4호
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pp.297-305
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2014
Flavonoids have an ability to suppress various ion channels. We determined whether one of flavonoids, cyanidin-3-glucoside, affects adenosine 5'-triphosphate (ATP)-induced calcium signaling using digital imaging methods for intracellular free $Ca^{2+}$ concentration ([$Ca^{2+}$]i), reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial membrane potential in PC12 cells. Treatment with ATP ($100{\mu}M$) for 90 sec induced [$Ca^{2+}$]i increases in PC12 cells. Pretreatment with cyanidin-3-glucoside ($1{\mu}g/ml$ to $100{\mu}g/ml$) for 30 min inhibited the ATP-induced [$Ca^{2+}$]i increases in a concentration-dependent manner ($IC_{50}=15.3{\mu}g/ml$). Pretreatment with cyanidin-3-glucoside ($15{\mu}g/ml$) for 30 min significantly inhibited the ATP-induced [$Ca^{2+}$]i responses following removal of extracellular $Ca^{2+}$ or depletion of intracellular [$Ca^{2+}$]i stores. Cyanidin-3-glucoside also significantly inhibited the relatively specific P2X2 receptor agonist 2-MeSATP-induced [$Ca^{2+}$]i responses. Cyanidin-3-glucoside significantly inhibited the thapsigargin or ATP-induced store-operated calcium entry. Cyanidin-3-glucoside significantly inhibited the ATP-induced [$Ca^{2+}$]i responses in the presence of nimodipine and ${\omega}$-conotoxin. Cyanidin-3-glucoside also significantly inhibited KCl (50 mM)-induced [$Ca^{2+}$]i increases. Cyanidin-3-glucoside significantly inhibited ATP-induced mitochondrial depolarization. The intracellular $Ca^{2+}$ chelator BAPTA-AM or the mitochondrial $Ca^{2+}$ uniporter inhibitor RU360 blocked the ATP-induced mitochondrial depolarization in the presence of cyanidin-3-glucoside. Cyanidin-3-glucoside blocked ATP-induced formation of ROS. BAPTA-AM further decreased the formation of ROS in the presence of cyanidin-3-glucoside. All these results suggest that cyanidin-3-glucoside inhibits ATP-induced calcium signaling in PC12 cells by inhibiting multiple pathways which are the influx of extracellular $Ca^{2+}$ through the nimodipine and ${\omega}$-conotoxin-sensitive and -insensitive pathways and the release of $Ca^{2+}$ from intracellular stores. In addition, cyanidin-3-glucoside inhibits ATP-induced formation of ROS by inhibiting $Ca^{2+}$-induced mitochondrial depolarization.
최근 안토시아닌 색소의 생리활성에 대한 관심이 고조됨에 따라 천연색소 자원으로서 유망시되는 뽕나무 오디의 이용성을 높이고 생리활성물질로서 C3G(cyanidin-3-glucoside) 색소를 다량 함유한 뽕나무의 품종육성을 위하여 유전자원으로 보존되고 있는 뽕 계통에 대하여 오디를 수확한 후 색소를 추출, 분리 및 정량 분석을 실시하였다. 1. 오디 함유 anthocyanin 색소의 추출은 1% HCl-MeOH 용액을 사용하였으며, 분석 기기로는 Shimadzu LC, Nova-pack $C_{18}$ Column(300${\times}$3.9 mm)을 사용하였다. 2. 오디와 포도에 존재하는 안토시아닌 색소의 조성 패턴을 비교한 결과, 오디는 C3G(cyanidin-3-glucoside) 단일 물질로 존재하는 반면, 포도는 여러 가지 안토시아닌 색소가 혼합되어 존재하는 것으로 나타났다. 3. 오디와 포도의 계통별 C3G(cyanidin-3-glucoside) 함량을 분석한 결과, 포도에 비해 오디의 C3G함량이 상대적으로 매우 높았다. 4. 이상의 결과 뽕나무 열매인 오디는 안토시아닌 색소의 존재형태, 이용부위 및 함량에 있어 천연색소 자원으로서 유망시되며, 색소자원으로 이용시 타작물보다 유리한 경제수종으로 판단된다.
Anthocyanins contained in Rhododendron schlippenbachii (royal azalea) are expressed in a variety of colors and affect flower colors. R. schlippenbachii flowers of seven colors (white, red group: pink, deep pink, red, purple group: light purple, purple, deep purple) were collected from the garden around KT&G building in the college of agriculture and life science. Seven types of anthocyanins [cyanidin 3-O-diglucoside, cyanidin 3-O-arabinoside-5-O-glucoside, cyanidin 3-O-galactoside, peonidin 3-O-arabinoside-5-O-glucoside, cyanidin 3-O-glucoside, cyanidin 3-O-(6"-O-malonyl) arabinoside, cyanidin 3-O-(6"-O-coumaroyl) glucoside] turned out to be from the cyanidin and peonidin series in R. schlippenbachii flowers. Also, seven types of flavonols [azaleatin 3-O-glucoside, azaleatin 3-O-arabinoside, azaleatin 3-O-rhamnoside, quercetin 3-O-galacatoside, quercetin 3-O-glucoside, quercetin 3-O-arabinoside, quercetin 3-O-rhamnoside] were identified in R. schlippenbachii flowers. Total anthocyanin amounts decreased in R. schlippenbachii flowers in the following order: 'deep pink' (8.07) > 'red' (6.37) > 'pink' (5.35) > 'deep purple' (0.78) > 'purple' (0.43) > 'light purple' ($0.22mg{\cdot}g^{-1}$ dry weight, DW) > 'white' (not detected). Total flavonol amounts decreased in the following order: 'pink' (97.78) > 'deep pink' (63.79) > 'deep purple' (61.98) > 'white' (57.58) > 'light purple' (47.06) > 'purple' (46.76) > 'red' ($7.60mg{\cdot}g^{-1}$ dry weight, DW). This study provided the quantitative and qualitative information for the variation of anthocyanin and flavonol compounds in R. schlippenbachii flowers. Furthermore, this information can contribute to the identification of anthocyanin and flavonol compounds in other Rhododendron flowers.
본 실험은 포도주스의 가공 공정중 열처리 조건이 anthocyanin색소 각각에 미치는 영향을 검토함으로서 anthocyanin 색소의 파괴가 최소화 되는 열처리 조건을 결정하는 기초자료를얻고자 실시하였다 Anthocyanin 색소 동정을 위한 분석결과 딸기의 주요 적색소는 pelargonidin-3-glucoside이며, 미국산 포도의 과피 및 주스의 주요 적색소는 delphinidin-3-glucoside와 cyanidin-3-glucoside이며, 유색미의 주요 적색소는 cyanidin-3-glucoside로 나타났다. 총 anthocyanin 함량 변화는 30초간 열처리한 처리구가 비열처리구에 비하여 100$^{\circ}C$까지 변화가 없었으며, 1분간 열처리한 처리구는 비열처리구에 비하여90$^{\circ}C$ 까지는 변화가 없었으며, l00$^{\circ}C$, 110$^{\circ}C$에서 각각 3.5$\%$, 9.3$\%$의 감소를 나타냈다. 열처리에 따른 anthocyanin 색소의 변화를 실험한 결과 1분간 열처리 하였을 경우 delphinidin-3-glucoside와 cyanidin-3-glucoside의 경우 90$^{\circ}C$까지 변화가 없었으며, 100$^{\circ}C$부터 급격히 감소하였다. Petunidin-3-glucoside와 malvidin-3-glucoside의 경우 100$^{\circ}C$까지 변화가 없었으며, 110$^{\circ}C$에서 3.5$\%$, 2.7$\%$로 비교적 열에 안정한 것으로 나타났다. 2분간 열처리시 delphinidin-3-glucoside와 cyanidin-3-glucoside의 경우 90$^{\circ}C$까지 3.2$\%$, 5.3$\%$와 1.9$\%$, 4.3$\%$로 감소하였으나, 100$^{\circ}C$부터 12.4$\%$, 13.2$\%$와 9.1$\%$, 11.8$\%$로 급격히 감소하였다. Petunidin-3-glucoside와 malvidin-3-glucoside의 경우 110$^{\circ}C$ 까지 4.8$\%$, 5.2$\%$의 감소를 나타내며 다른 anthocyanin 색소에 비하여 비교적 열에 안정한 것으로 나타났다. 따라서 포도주스 제조시 열처리 조건을 90$^{\circ}C$에서 1분간 살균하는 것이 anthocyanin 파괴를 최소화하여 고품질 포도 주스를 생산하는데 최적의 가공조건인 것으로 사료된다.
Cyanidin-3-glucoside (C3G), an anthocyanin, is one of the most widespread dietary flavonoids. We investigated the effects of C3G in PMA/ionomycin (PI)-induced RBL-2H3 cells. C3G inhibited the production of IL-4 and IL-13 and also decreased the level of mRNA in a dose-dependent manner. Furthermore, western blot analysis implied that C3G down-regulated the protein level of c-Jun, NF-ATc1 and NF-${\kappa}B$ but not c-Fos. Taken together, we suggest that C3G may have suppressive effects on Th2 cytokines and will be studied further to develop as functional foods that help alleviate allergy symptoms.
Anthocyanins are water-soluble glycosides and acylglycosides of anthocyanidins, having different color variations due to its substitution patterns. Anthocyanins, present in various fruits, vegetables and crops as natural colorant, have been well characterized for its bioactive properties, anti-oxidant, anti-cancer, anti-proliferative and anti-inflammatory properties. During extraction and purification, the factors, such as pH, temperature, oxygen, light, enzymes, nucleophilic agents, sugar derivatives and co-pigments, have affected on anthocyanin stability. For this reason, the extraction method should be thoroughly checked for the qualitative/quantitative analysis of anthocyanin in particular plant material. To identify the optimum extraction method of cyanidin-3-glucoside, major anthocyanin of dark purple-colored grains, Oryza sativa cv. Heugjinjubyeo, Phaselous vulgaris, Phynchosia gngularis, Sesamum indium, Rhynchosia nulubilis and Lablab purpureus, reversed-phase HPLC analysis using solvent system of acetonitrile, methanol and water were accomplished.
한국산 유색미(수원 415호)로부터 안토시아닌 색소를 분석하였다. 1%HCl-methanol로 추출된 색소액을 자외선-가시광선 분광분석기로 측정한 결과 280 nm와 530 nm에서 최대흡광도를 보여 안토시아닌임을 확인 하였다. 분리된 색소를 산 분해하여 얻은 aglycon을 여러종류의 용매계로 전개시켜 $R_1$값을 비교하고, 흡광성질 및 $^1H-NMR$ 자료를 분석한 결과 aglycon은 cyanidin 및 malvidin으로 동정되었고, 결합당을 종이 크로마토그라피로 분석한 결과 monoglucose로 확인되었다. 따라서 한국산 유색미(수원 415호)의 안토시아닌 색소는 cyanidin-3-glucoside 및 malvidin-3-glucoside로 추정된다.
Anthocyanins pigments were isolated from the pigmented rice seeds (cultivar Killimhuk-mi) by a combination of Sephadex LH-20 and preparative high performance liquid chromatographies. Four anthocyanins were identified by their chromatographic, spectral and chemical properties. The major pigment was cyanidin 3-glucoside and cyanidin 3-oxalyl-glucoside was found in the rice for the first time.
최근 천연색소의 다양한 생리 활성이 보고됨에 따라 오디에 함유된 C3G 색소에 대해서도 관심이 높아지고 있다. 이에 오디로부터 C3G를 분리$.$정제하고 정제된 C3G와 표준물질의 분자량을 비교ㆍ동정하였다. 또한 유전자원으로 보존되고 있는 뽕 품종 및 계통에 대한 C3G 함량을 분석하여 고함유 계통을 선발하였다. 1. Amberlite IRC-50 ion exchange resin이 충진된 유리 column을 산성화시킨 후 이온교환수로 비흡착색소, 수용성 당류, 유기산 및 아미노산 등을 제거하였으며, column에 흡착된 색소를 용출 및 감압농축하여 분말상태로 정 제된 색소물질 C3G(cyanidin-3-glucoside)를 얻었다. 2. Waters 996 Photodiods Array Detector를 이용하여 정제된 C3G(cyanidin-3-glucoside)의 흡수 spectrum을 조사한 결과, 각각 516nm과 280nm에서 최대흡수 spectrum을 보임으로써 anthocyanin계 색소의 특이적 흡수 파장 영역인 500-550nm(Band I)과 280nm전후(Band II)와 일치하여 open column에 의해 분리된 색소가 anthocyanin 계열의 색소임을 확인하였다. 3. LC-Mass(Waters 2690 alliance Separation Module)를 사용하여 분자량을 확인한 결과, 449로서 C3G 표준물질의 분자량과 일치하였다. 4. 유전자원으로 보존되고 있는 뽕 품종 및 계통에 대한 C3G 함량을 분석한 결과, 공시한 35계통의 C3G 평균 함량은 0.9%였으며 계통간 함량의 차이가 있는 것으로 나타났다. 5. '수성뽕'. '강선' 및 '절곡조생(충북)'은 C3G함량은 물론 수량, 과중 및 당도에 대한 과실적 특성조사에서 양호한 성적을 나타내어 오디생산용 유망 계통으로 선발하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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