인삼엽 및 인삼피를 식물조직부양효소 (macerating enzyme)로 분리시킴으로써 인삼의 유효성분인 saponin을 효율적으로 추출하고자 인삼부패균중 조직부양력이 강력한 1종의 G-211 균주를 선정하여 조제한 조효소로써 실험하였다. 조직부양작용의 최적 pH 는 인삼엽, 인삼피 공히 pH 5.0이었으며 가용성물질추출율 및 saponin추출율은 인삼엽이 pH4.5, 인삼피가 pH5.5에서 가장 효과가 컸다. 조직부양효소와 조 cellulase을 qudydd처리하므로써 인삼엽, 인삼피 각각 3.45%, 3.90%의 saponin을 추출할 수 있었는데 이 추출율은 전체 saponin 함량의 39.8%, 39.3%에 해당되는 수율이었다. 또한 추출된 saponin을 HPLC를 이용해서 각 ginsenoside별 pattern도 조사하였다.
Objectives: This study aimed to examine the changes in ingredients according to its cultivation method by examining the content of saponin and non-saponin components of ginseng. Methods: Ginseng saponin component analysis was compared and reviewed using the high-performance liquid chromatography method, and acidic polysaccharide component was measured using the carbazole sulfuric acid method. Results: The comparative analysis of ginseng saponin content of 4 and 6 years old fresh ginseng showed the following results. According to the cultivation method, upland field cultivation fresh ginseng showed higher average content of crude saponin than paddy field cultivation fresh ginseng. Whereas, paddy field cultivation fresh ginseng showed higher average content of total saponin than upland field cultivation fresh ginseng. Ginsenoside Rb1 showed higher content of paddy field cultivation fresh ginseng than upland field cultivation fresh ginseng in 6 years old ginseng. However, it showed higher content of upland field cultivation fresh ginseng than paddy field cultivation fresh ginseng in 4 years old ginseng. Additionally, ginsenoside Rg1 showed higher content of paddy field cultivation fresh ginseng than upland field cultivation fresh ginseng in 6 years old ginseng, whereas upland field cultivation fresh ginseng showed higher content of paddy field cultivation fresh ginseng in 4 years old ginseng. The effect on the content of ginseng saponins and acidic polysaccharides according to paddy field and upland field cultivation methods is considered to be small. Conclusions: The paddy field cultivation method, which is more efficient in production cost due to depletion of farmland and long-distance cultivation, is considered to be an economical cultivation method.
인삼(人蔘)의 유효성분(有效成分)으로 알려진 saponin을 Thin layer chromatography로 전개(展開)하여 Digital Densitometer를 사용(使用)하여 한국인삼(韓國人蔘)의 산지별(産地別), 부위별(部位別), 재배연도별(栽培年度別) saponin함량(含量) 및 그 saponin fraction의 조성비(組成比)를 정량(定量)하고, 홍삼(紅蔘) 및 인삼(人蔘)엑기스 제조중(製造中) 일어나는 saponin함량(含量)의 변화(變化)를 연구(硏究)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 산지별(産地別) saponin 함량(含量)에는 별로 차이(差異)가 없었으며, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin군(群)과 panaxatriol을 aglycone으로 하는 sapon군(群)의 조성비(組成比)는 ($1.7{\sim}2.6$) : 1정도였다. 2. 부위별(部位別)로 볼 때, saponin함량(含量)은 미삼(尾蔘)이 12.7%로서 3.3%인 백삼(白蔘)의 4배에 가까운 높은 값을보였다. 그리고 saponin fraction별(別)로 볼 때, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction도 미삼(尾蔘)이 백삼(白蔘)보다 많으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction은 반대(反對)로 미삼(尾蓼)이 백삼(白蔘)보다 적었다. TLC의 2차원전개결과(次元展開結果), ginsenoside-Rd는 백삼(白蔘)에만 나타나고, 미삼(尾蔘)에서는 나타나지 않는 반면(反面), Rf와 $Rg_1$은 미삼(尾蔘)에서는 분리(分離)되었으나, 백삼(白蔘)에서는 $Rg_1$만이 존재하고, Rf는 분리(分離)되지 않았다 3. 재배연도별(栽培年度別) 근부(根部)의 saponin함량(含量)은 재배기간(栽培其間)에 따라 일정(一定)한 경향(傾向)을 찾아볼 수 없으나, 인삼근당평균(人蔘根當平均) saponin함량(含量)은 2년근(年根)이 90.3mg, 3년근(年根)이 254.2mg. 4년근(年根)이 404.2mg, 5년근(年根)이 996.9mg, 6년근(年根)이 1377.1mg으로 재배기간(栽培其間)이 길어질수록 현저(顯著)하게 높았다. 그리고 인삼지상부(人蔘地上部)의 saponin함량(含量)도 재배기간(栽培其間)에 길어질수록 높아지는 경향(傾向)을 볼 수 있었다. 그러나, saponin fraction별(別)볼 때는 $5{\sim}6$년(年)의 수확기(收穫期)에 가까워질수록 panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 함량(含量)이 높았다. 4. 홍삼제조중(紅蔘製造中)의 saponin fraction별(別) panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)도 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 낮아졌으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)는 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 오히려 높았다. 홍삼(紅蔘)의 Thin layer chromatogram에는 건삼(乾蔘)의 그것에 나타나지 않았던 수개(數個)의 미확인(未確認) spot를 더 볼 수 있었다. 5. Ethanol과 물로 미삼(尾蔘)을 추출(抽出)하여, 29.9%의 인삼(人蔘)엑기스를 얻었는데, 이 엑기스에는 미삼(尾蔘)으로부터 추출수율(抽出收率)이 94.2%에 상당(相當)하는 saponin이 이행(移行) 함유(含有)되어 있었다.
Crude saponin fractions were isolated using non-ionic resin chromatography from Ginseng Radix Alba (PG) and Gynostemmae Herba+ (GP). These saponin fractions were orally administered to strep- tozotocin (STZ)-induced diabetic rats for 2 weeks and to high-fat diet-induced obese rats for 4 weeks. Treatment with either PG saponin or GP saponin at a dose of 1 mg/kg significantly decreased the plasma glucose level to that of glibenclamide treated or normal groups. The increased plasma triglyceride (TG) level in diabetic rats was decreased by 50% with PG or GP saponin treatment. Combined administration of PG and GP saponins with different ratios (total dose of 1 mg/kg) also had the similar effects on the blood glucose and TG levels with that of PG or GP alone. Treatments with GP (1 mg/kg) or GP (0.5 mg/kg) and PG (0.5 mg/kg) together significantly suppressed the rise in TG levels induced by high-fat diet whereas slightly suppressed the rise in the total cholesterol level. The body weight gain was also decreased both in the two saponin treated groups. These results demonstrate that either alone or mixture of PG and GP have similar degree of effects on hyperglycemia and hyperlipidemia.
본 연구는 고온 고압의 autoclaving 조건에서 2시간 내외로 증삼한 인삼과 그 용출액으로 2단계 열풍건조법으로 제조한 홍삼을 분말로 하여 그 열수추출물에 대한 이화학적 특성을 조사하였다. 즉 시료로 사용한 홍삼의 제조는 고온 고압으로 증삼한 용출액을 건조시 증삼 표면에 바르고 건조하여 외형이 흑삼 모양으로 변하였다. 홍삼 분말로부터 열수추출물의 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총당, 산성다당체, 조사포닌 등의 함량을 분석하고, 색차계와 전자코를 이용하여 향미 성분을 측정하였다. Autoclave를 이용한 홍삼 열수추출물(ARG)의 총 폴리페놀 함량은 9.06 mg GAE/g, 총 플라보노이드 3.38 mg NE/g, 총당 35.22 g/100 g, 산성다당체 10.90 g/100 g, 조사포닌 10.22 g/100 g으로 나타났다. 본 홍삼제조법에 의해 얻어진 홍삼을 이용한 열수추출물은 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 조사포닌 등의 최종 함량이 다른 홍삼 제조법에 비해 높게 나타났으며, 고온 고압으로 단시간에 얻은 증삼액인 용출액은 진세노사이드 조성이 다양하였다. Rb1을 포함한 인삼의 주요 진세노사이드 총 함량은 ARG에서 가장 낮은 10.69 mg/g으로 나타났으며 가공 조건이 홍삼 특유의 진세노사이드로의 전환에 영향을 주었다. Autoclave로 얻어진 홍삼 및 용출액은 홍삼성분의 저분자량으로의 변환을 통해 색의 강화 등 향미성분이 개선되어 식품 뿐만 아니라 비식품의 소재 및 제품을 위한 수요가 기대된다.
인삼의 재배과정중에 부산물로 산출되는 지상부위의 활용방안을 모색하기 위하여 엽과 경의 반성분, 용매별 엑기스 및 사포닌함량을 근의 함량과 대비 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 엽은 총당의 함량이 21.5%로 근보다 낮았으나 조직유질, 조지방질 및 회분은 각각 9.41%, 3.43% 및 6.83%로 높았다. 경은 조직유질이 39.2%로 현저하게 많았고 총당과 조단백질은 22.7% 및 8.54%로 근보다 낮았다. 2. 용매별 추출물의 수율은 추출용매의 극성이 클수록 높았으며 근과 경에 비하여 엽은 methanol 및 ehanol 추출물의 수율이 35.9% 및 27.3%로 현저하게 많았고, acetone 및 ethyl acetate추출물도 5.64% 및 3.52%로 높았으며 그 외의 비극성 용매의 추출물의 수율도 대체로 높았다. 3. 총 조saponin의 수율은 근과 경은 4.78% 및 2.22%였으나 엽은 19.58%로 현저하게 높았다. HPLC에 의한 분석결과 엽에는 ginsenoside-Rg1(3.32%), -Re(3.24%), -Rd(2.32 %), -Rc(0.65%), -Rb2(0.92%), -Rbl(0.29%), and -Rf(0.11%)가 함유되었고, 경에는 ginsenoside-Rgl(0.28%), -Re(0.3%), -Rd(0.05%), -Rf(0.11%)외에 미량의 -Rbl, -Rb2, -Rc가 검출되었다. 특히 엽은 총 saponin과 ginsenoside-Rg1, -Re 및 -Rd외에도 -Rc와 -Rb2의 함량이 높아서 이들 성분의 분리용 시료로 적합함을 알 수 있었다.
두릅나무 순의 saponin을 추출하여 그 구조를 밝혀 본 결과는 다음과 같다. 1. 자연산 날 것 식용적기의 crude saponin에서 aglycon으로 oleanolic acid와 hederagenin외에 1,3-methylenedioxy-3-dehydroxyoleanolic acid를 동정하였으며 당으로 ${\alpha},\;{\beta}-glucose$와 arabinose, rhamnose를 확인하였다. 2. 자연산 날 것 식용적기에 가장 많은 ‘b’ saponin(elatoside $Fh_2$)을 분리하여 동정한 결과 그 구조는 3-0-$[{\alpha}-L-arabinopyranosyl(1{\rightarrow}2)-{\beta}-D-glucopyranosyl]$-28-O-${\beta}-D-glucopyranosyl$ oleanolic acid라 추정된다.
4년생 인삼의 저장근에 함유된 일반 화학성분, 유리당 및 사포닌 성분을 수확 시기별로 조사하고 그 변화 양상을 검토하여 4년생 인삼의 최적 수확기 선정을 위한 기초자료 제공을 목적으로 한 본 실험의 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 4년생 인삼의 전 생육기간 중 조단백 함량은 지상부 출현기인 4월이 20.77%로 가장 높았고, 지상부 전개가 완료된 6월이 13.13%로 가장 낮았으며, 8월 이후에는 17% 수준으로 함량의 변화가 일어나지 않았다. 2. 조지방 및 조섬유 함량은 조단백과 반대의 양상으로 개화기인 5월에 최대치를 나타내었다. 3. 총당은 전 생육기간 중 60-71%의 함량범위로 존재하여 전체성분 중 가장 높은 함량을 나타내었고, 지상부 생육이 완료된 6월이 71% 수준으로 가장 높았으며, 개화기인 5월이 60% 수준으로 가장 낮았다. 4. 인삼 저장근의 유리당 함량은 지상부 출현기인 4월에 20.40%로 최대치를 보였으나, 개화기인 5월에는 11.89%로 전생육시기 중 최소의 함량을 나타내었다. 5. 유리당 중 가장 함량이 높은 sucrose의 변화(10.96-19.60%) 양상은 전 수확기간 중 총 유리당의 변화(11.89-20.40%) 경향과 유사한 양상을 나타내지만 fructose의 함량 변화와는 서로 상반된 양상을 나타내줬다. 한편 유리당 중 glucose와 maltose의 함량은 전 수확기간 중 통계적 차이가 인정되지 않았다. 6. 조사포닌과 총 ginsenosides함량은 개화기인 5월에 각각 7.60% 및 4.09%로 기타 수확시기에 비해 월등히 높았으며, 그 외의 시기에는 통계적으로 유의한 차이가 인정되지 않았다. 따라서 4년생 인삼에서 성분적 특성만을 고려할 경우 개화기인 5월이 가장 유리하였다 그러나 개체당 함량은 10월이 가장 높게 나타났다.
추출조건이 인삼엑기스의 일반성분 및 사포닌 함량에 미치는 영향을 조사하기 위하여 수삼과 백삼을 시료로 추출용매, 용매농도, 온도등의 조건을 달리하여 조사 비교한 결과 수삼의 경우 $70^{\circ}C$ 및 $100^{\circ}C$구가 다른구에 비하여 가용성물질의 용출량이 5배이상 컸으며 사포닌의 용출율은 $70^{\circ}C$-$H_2O$구가 가장 높았고, $100^{\circ}C$구는 거의 1/2이 감소되었다. 압착에 의한 방법으로 사포닌의 52%가 추출되었고 triol계가 diol계 사포닌보다 더 잘 추출되었다. 전당, 환원당, 조단백 및 총 아미노산의 용출율도 $H_2O$구가 ethanol구보다 높은 값을 나타내었고 회분은 압착구에서 높은 값을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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