• 제목/요약/키워드: Coprinus cinereus peroxidase

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유기용매에서의 CiP [coprinus cinereus peroxidase]의 안정성 (In the presence of organic solvent stability of CiP [coprinus cinereus peroxidase])

  • 김한상;조대행;김용환
    • KSBB Journal
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    • 제23권4호
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    • pp.340-344
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    • 2008
  • CiP를 이용한 유기합성은 주로 유기용매와 완충용액을 섞어서 반응을 한다. 하지만 단순히 유기용매 상에서 효소의 활성도를 측정한 것이 아니라, 과산화수소가 있을 경우에 효소의 활성도를 측정한 결과는 예상과는 다르게 순수한 완충용액에서 보다 유기용매를 포함하고 있는 것이 더 높게 나타났다. 또한 유기용매의 비율을 증가가 될수록 효소의 활성도가 더 높게 나타났으며, 특히 2-propanol이 33%가 포함이 된 경우에는 순수한 완충용액보다 효소의 활성도가 크게 증가가 되는 것을 관찰을 할 수가 있었다. 이러한 효소의 활성도가 유기용매가 포함이 된 조건에서 높게 나는 이유는 유기용매가 CiP에 의해 생성된 반응성이 높은 라디칼을 포집을 하여서, CiP의 활성 부위인 heme의 파괴를 막는 것에 크게 기여하는 것으로 판단이 되었다.

Optimization of the Functional Expression of Coprinus cinereus Peroxidase in Pichia pastoris by Varying the Host and Promoter

  • Kim, Su-Jin;Lee, Jeong-Ah;Kim, Yong-Hwan;Song, Bong-Keun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권9호
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    • pp.966-971
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    • 2009
  • Peroxidase from Coprinus cinereus (CiP) has attracted attention for its high specific activity and broad substrate spectrum compared with other peroxidases. In this study, the functional expression of this peroxidase was successfully achieved in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. The expression level of CiP was increased by varying the microbial hosts and the expression promoters. Since a signal sequence, such as the alpha mating factor of Saccharomyces cerevisiae, was placed preceding the cDNA of the CiP coding gene, expressed recombinant CiP (rCiP) was secreted into the culture broth. The Mut Pichia pastoris host showed a 3-fold higher peroxidase activity, as well as 2-fold higher growth rate, compared with the $Mut^s $ Pichia pastoris host. Furthermore, the AOX1 promoter facilitated a 5-fold higher expression of rCiP than did the GAP promoter.