Antigenicity of Recombinant Granulocyte macrophage colony stimulating factor(LBD-005), a newly developed drug for hematopoietic growth, was investigated in mice and guinea pigs. 1. Mice showed production of antibodies against LBD-005 (100mg/kg) with alumin]m hydroxide gel(alum) as an adjuvant, judged by the heterologous anaphylaxis(PCA) test using rats. On the other hand, antibodies against ovalbumin(OVA) inoculated with alum were definitely detected. 2. In the studies with guinea pigs, both the inoculation of LBD-005 only and of LBD-005 with complete Freund's adjuvant(CFA) as an adjuvant did not produce positive reactions in homologous passive cutaneous anaphylaxis (PCA).
본 연구는 랫드에서 Freund's complete adjuvant를 랫드의 후지에 투여하여 인의적으로 유발된 관절염을 진단하기 위한 방법으로 $^{99m}Technetium-MDP (^{99m}Tc_MDP$)을 이용한 골 스캔의 임상적 의의를 찾고자 하였다. 성숙 Sprague-Dawley 암컷 랫드를 대조군과 실험군으로 분리하고, 골의 스캔은 0.05mCi의 $^{99m}Tc_MDP$를 정맥 주사하여 3시간 후에 전신 영상을 얻었다. 골의 스캔과 방사선학적 평가를 비교한 겨과 관절염 유발 7일 후부터 관절염의 병변이 관찰되었지만, 방사선학적 소견에서는 14일 후부터 병변이 관찰되었다. 골의 스캔에서 관절염 유발 7일 후에 유의적으로 골의 이상적 섭취 증각가 관찰되었고(p<0.05), 21일 후에는 전지와 후지의 모든 부위에서 골의 이상적 섭취 증가가 관찰되었지만, 방사선학적 소견에서는 후지에서만 병변 부위가 관찰되었다. 이상의 결과에서 $^{99m}Tc_MDP$을 이용한 골의 스캔은 류마티스 관절염을 임상적으로 진단하는데 방사선학적 진단보다 효과적인 방법임을 알 수가 있었고, 골의 스캔은 류마티스 관절염을 초기에 진단하는데 유효한 진단방법임을 확인하였다.
목적 : 만성 염증성 질환에 대한 전침효과를 알아보기 위해 complete Freund's adjuvant(CFA) 유발 관절염 모델의 거퇴 관절 내 염증관련 단백질 및 복합당질의 변화를 살펴보았다. 방법 : Sprague-Dawley계 흰쥐의 족부에 CFA를 주사한 다음 3일 간격으로 2Hz, 15Hz 및 120Hz 전침자극을 주며 부종 형성여부를 plethysmometer로 측정하여 판정하였으며 30일째 거퇴관절을 취하여 4% paraformaldehyde에 고정하고 EDTA용액에서 탈회시켜 파라핀연속 절편을 얻어 $NF-{\kappa}B$를 비롯한 5종의 염증관련 단백질의 발현 및 복합당질 변화를 살펴보았다. 결과 : 관절연골 내 면역반응 중 연골기질은 반응이 없거나 약하고 연골세포는 $NF-{\kappa}Bp65$, $I-{\kappa}B{\alpha}$, iNOS 반응이 강하며 특히 유리연골층에서 더 현저하였으나 염증 및 전침자극에 따른 변화는 없었다. 관절낭에서 면역반응을 살펴보면 염증유발시 활액세포의 면역반응세포는 $I-{\kappa}B{\alpha}$가 감소한 반면 iNOS, $IL-1{\beta}$는 증가하며 특히 iNOS 증가가 현저하였으며 전침자극에 의해 iNOS 가 감소하였다. 활액막조직에서 모든 면역반응이 증가하며 특히 $NF-{\kappa}Bp65$, $I-{\kappa}B{\alpha}$, iNOS 반응이 현저한데 전침자극에 의해 $IL-1{\beta}$를 제외한 모든 반응이 감소하였다. 복합당질 염색성은 CFA를 주사한 염증유발 흰쥐군이 정상군에 비해 감소하였다. 관절연골 중 구역간질의 중성복합당질 및 연골세포피막의 산성복합당질이 현저히 감소하였다 Lectin반응도 DBA을 제외한 모든 발현이 염증유발시 감소하였다. 그러나 전침처리에 의해 정상군과 유사한 염색성과 lectin반응을 유지하였다. 특히 구역간질의 중성복합당질과 연골세포의 sWGA와 RCA-1 반응이 현저하였다. 결론 : 만성 염증성 동물모델의 거퇴 관절 내 염증관련 단백질은 관절연골보다 관절낭에서, 복합당질의 변화는 관절연골에서 큰 변화를 보였으며 전침의 자극에 의해 이들 변화가 억제되는 것을 알 수 있다. 이상의 결과로 보아 전침처치는 염증관련 단백질 발현 및 복합당질의 변화 억제를 통해 만성 관절염 질환에 효과적임을 알 수 있다.
목적 : 이 연구는 흰쥐 염증성 통증 모델에서 족궐음간경의 형혈 전침의 진통효과를 조사하고 이 전침의 진통효과에 내인성 오피오이드가 관계되어 있는지 조사하고자 하였다. 방법 : 무릎 관절염은 $125{\mu}l$ complete Freund's adjuvant를 흰쥐의 한쪽 무릎관절강에 주입하여 유도하였다. 통증 정도를 검사하기 위해 관절염을 유도한 쪽 뒷다리의 weight bearing forces(WBFs)를 측정하였다. 전침은 건측 행간, 합곡, 또는 뒷다리의 비경혈에 가스 마취하에서 2 Hz, 2 mA 자극조건으로 처치하였다. 결과 : 관절염을 유도한 이후에, 점차적으로 무릎에 통증이 증가하기 때문에 관절염을 유발한 쪽 뒷발로 딛는 압력이 감소하였다. 건측 행간에 전침 자극을 한 군에서 전침 자극 후 최소 2시간까지 유의하게 WBF가 증가하였으며, 이 효과는 구강으로 투여한 indomethacin 5 mg/kg의 효과에 해당하였으며, 이 전침의 효과는 합곡이나 비경혈에서는 나타나지 않았다. 아울러 이 진통효과는 오피오이드 길항제인naltrexone(10 mg/kg, i.p.)을 전처치했을 때 차단되었다. 결론 : 이상의 결과는 족궐음간경의 형혈인 행간 자침이 흰쥐 관절염 모델에서 염증성 통증을 억제하는 효과가 있음을 보여주며, 이 효과는 내인성 오피오이드 시스템이 매개하는 것으로 보인다.
본 연구에서는 흰쥐 발바닥에 complete Freund's adjuvant(CFA)를 투여한 후 염증부위에서 관찰되는 비만세포의 분포양상 및 미세구조를 zinc selenium autometal-lography$(AMG^{ZnSe})$로 염색한 후 광학 및 전자현미경으로 관찰하였다. 광학현미경으로 관찰된 CFA투여에 의한 염증성 반응은 피하층에 국한되어 있었으며, zinc함유 비만세포는 주로 피하조직의 혈관 주변에 분포하고 있었다. AMG 염색에 의한 흑갈색을 띠는 과립이 세포질을 채우고 있었으며, 많은 비만세포의 경우 세포막이 파괴되어 과립이 주위조직으로 퍼져 관찰되었다. 전자현미경으로 관찰된 zinc함유 비만세포는 불규칙한 외형을 띠었으며, 표면에는 작은 돌기들이 관찰되었다. AMG염색에 따른 은입자(silver grains)가 세포질내 과립에 국한되었으며, 높은 전자 밀도의 동질성 기질로 구성되어 있었으며, 경계막으로 싸여 있었다. 세포질내 세포소기관 중에서 특히 골지 복합체가 잘 발달되어 있었으며, 형질내세망과 사립체는 비교적 적게 가지고 있었다. 이들 세포의 핵은 비교적 작고 둥글고, 세포의 중심부에 위치하였으며, 이질염색질로 이루어져 있었다.
To study the antigenicity of BR92021(Vi polysaccharide typhoid vaccine), active systemic ana-phylaxis and passive cutaneous anaphylaxis were tested in guinea pigs. The groups were as follows: group I(low dose, 30 $\mu\textrm{l}$/kg), group II(high dose, 300 $\mu\textrm{l}$/kg), group III(300 $\mu\textrm{l}$/kg plus complete Freund's adjuvant), group IV(positive control, ovalbumin plus complete Freund's adjuvant) and group V(saline-treated control). Male Hartley guinea pigs at 7 weeks of age were sensitized subcutaneously with the test article or saline three times per week for three weeks(j.e., total 9 times). For groups III and IV, animals were sensitized subcutaneously with either the test article or ovalbumin plus complete Freund's adjuvant once per three week for 6 weeks(i.e., total 3 times). Twelve days after the last sensitization, the blood was collected from the sensitized animals for the passive cutaneous anaphylaxis test. In addition, the sensitized animals were subjected to the active systemic anaphylaxis test on fourteen days after the last sensitization by an intravenous challenge with either the test article or ovalbumin. In group I, mild(1/5) or moderate(4/5) symptoms of anaphylactic shock were observed. In group II, no sign(1/5), moderate(3/5) and severe(1/5) symptoms were observed. In group III, four animals of revealed moderate signs and one of 5 showed no signs of anaphylactic shock. In group IV, all 5 animals showed severe signs of shock. In group V, one of 5 revealed moderate and four of 5 showed no signs. The necropsy findings related to the active systemic anaphylaxis were observed in most animals of groups I to V In the passive cutaneous anaphylaxis test, the antiserum was diluted 10- to 5120- fold and was injected intradermally on the clipped back of recipient animals, followed by an intravenous challenge with either the test article or ovalbumin. No animals in groups I, II, III and V showed the positive reaction, whereas all animals in group IV, the positive control, showed the positive reaction at the dilution range of x1280 to x5120. Our results indicate that the test article, BR92021, may have weak antigenic potential in male guinea pigs.
The methanolic extract of Lysimachiae christinae Herba, which has been used for diuretic, calculi remover and jaundice remedy in oriental countries, was found to possess analgesic and antiinflammatory effect in Freund's complete adjuvant treated rat. From ethyl acetate fraction of the herb a phenyl propanoid isoferulic acid was isolated as an active principle.
'Ssangwha-Tang,' which have known as a tonic and restorative preparation in Korean traditional medicines, was shown to have signification antiinflammatory activity in the edema-induced carrageenin inflammation of rats, and also indicated remarkable preventive effect to chronic arthritis model in rat induced by Freund's complete adjuvant method.
Daidzein and its methyl derivatives were synthesized and their anti-inflammatory activities were examined. Daidzein suppressed the carrageenin-induced edema, but its methyl derivatives showed decrease or abolition of the anti-inflammatory effect. Daidzein did not significantly suppress the complete Freund's adjuvant-induced arthritis, and the mixed phlogistics (histamine+serotonin)-induced edema. Daidzein inhibited the leukocyte emigration and protein exudation when it was administered into the CMC pouch at low doses (5,25mg/pouch). Daidzein significantly suppressed the cotton-pellet granuloma formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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