Variations in physical toughness between muscles and animals are a function of growth rate and extend of collagen type I and III. The current study was designed to investigate the ability of growth rate, collagen concentration, collagen synthesizing and degrading genes on two different fibroblast cells derived from Hanwoo m. longissimus dorsi (LD) and semimembranosus (SM) muscles. Fibroblast cell survival time was determined for understanding about the characteristics of proliferation rate between the two fibroblasts. We examined the collagen concentration and protein expression of collagen type I and III between the two fibroblasts. The mRNA expression of collagen synthesis and collagen degrading genes to elucidate the molecular mechanisms on toughness and tenderness through collagen production between the two fibroblast cells. From our results the growth rate, collagen content and protein expression of collagen type I and III were significantly higher in SM than LD muscle fibroblast. The mRNA expressions of collagen synthesized genes were increased whereas the collagen degrading genes were decreased in SM than LD muscle. Results from confocal microscopical investigation showed increased fluorescence of collagen type I and III appearing stronger in SM than LD muscle fibroblast. These results implied that the locomotion muscle had higher fibroblast growth rate, leads to produce more collagen, and cause tougher than positional muscle. This in vitro study mirrored that background toughness of various muscles in live animal is likely associated with fibroblast growth pattern, collagen synthesis and its gene expression.
Objective : We present the difference of histopathologic changes of the internal elastic lamina (IEL) and collagen III in the superficial temporal artery (STA) between aneurysmal patients and non-aneurysmal patients. Also, the pathologic data with clinical features by comparative methods to validate the risk factor of the intracranial aneurysm are presented. Methods : Samples of the STA were harvested form 38 patients including aneurysmal and non-aneurysmal patients undergoing craniotomy. Paraffin-embedded sections were examined, using hematoxylin and eosin, van Giebson and mouse anti-collagen III staining techniques. Histopathological observations were ana lysed and correlated with clinical features such as presence of aneurysm, hypertension, age, and sex. Results : Twenty-seven patients had the intracranial aneurysm. Of these 24 patients were 50 years old or older. Nineteen patients had a history of hypertension. Twenty patients were female. Histopathological study demostrated the derangement of IEL and the deficiency of type III collagen were prominent in aneurysmal patients (p < 0.05). Fifty years old or older patients did not show correlation with the deficiency of type III collagen, but with the derangement of IEL (p < 0.05). The female sex was not correlated with the derangement of IEL but with the deficiency of type III collagen (p < 0.05). However, Hypertension was not correlated with these pathologic data. Conclusion : Patients with intracranial aneurysms have severe histopathologic changes of the arterial wall showing the derangement of IEL and the deficiency of type III collagen. In the clinico-pathologic study, the advanced age and female sex were considered as risk factors of the intracranial aneurysm.
Park, Hyochun;Park, Hannara;Chung, Ho Yun;Teresa, MO;Waner, Milton
Archives of Plastic Surgery
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제42권5호
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pp.544-551
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2015
Background Changes in the composition of the extracellular matrix (ECM) occur between the proliferating and involuted phases of infantile hemangiomas (IH), and are associated with angiogenic growth. We examined the composition of the ECM in proliferating and involuted IHs and assessed correlations between the composition of the ECM and whether the IH was in the proliferating or the involuted phase. Methods We evaluated IH samples from a cohort of patients who had five proliferating IHs and five involuted IHs. The following ECM molecules were analyzed using enzyme-linked immunosorbent assays and immunohistochemistry: laminin, fibronectin, collagen type I, collagen type II, and collagen type III. Results The involuted IHs had higher levels of deposition of collagen type III than the proliferating IHs. The median values (interquartile ranges) were 1.135 (0.946-1.486) and 1.008 (0.780- 1.166) (P=0.019), respectively. The level of laminin was higher in involuted IHs than in proliferating IHs, with median values (interquartile ranges) of 3.191 (2.945-3.191) and 2.479 (1.699- 3.284) (P=0.047), respectively. Abundant collagen type III staining was found in involuted IHs. Laminin ${\alpha}4$ chain staining was clearly present within the basement membrane adjacent to the blood vessels, and was significantly more intense in involuted IHs than in proliferative IHs. Conclusions Involuted hemangiomas showed extensive deposition of collagen III and laminin, suggesting that differences in the composition of the ECM reflect stages of the development of IHs. This pattern may be due to the rapid senescence of IHs.
피부 노화는 피부 표면에 나타나는 현상으로 피부 표면의 미세구조와 연관이 있다. 피부 미세구조의 변화는 주름형성, 피부 톤 저하 등 다양한 피부 노화 현상을 유발하는 요인이 된다. 본 연구는 주름 기능성 성분인 세드롤(Cedrol)과 콜라겐 유래 펩타이드 성분을 이용하여 시험관 수준(in vitro)에서 타입III 콜라겐 합성 시너지 효과를 평가하였다. 여성 피시험자를 대상으로 4주 동안 상기 원료가 함유된 크림제품을 사용한 후 피부 미세구조, 스타 형상(star configurations), 보습, 탄력, 피부 밝기, 윤기, 피부 톤, 투명도를 평가하였다. 시험관 수준의 세드롤과 펩타이드를 동시에 처리하면 우수한 수준의 타입III 콜라겐 합성 시너지효과를 나타내었다. 그리고 크림제형을 이용한 인체적용 시험에서는 사용 4주 후부터 피부 미세구조, 스타형상, 윤기, 피부 톤, 보습, 탄력을 개선시켰으나, 피부 밝기 개선 효능은 나타나지 않았다. 본 연구를 통하여 기존 주름 기능성 성분인 세드롤과 콜라겐 유래 펩타이드는 세포 수준에서 타입III 콜라겐 합성 시너지 효과가 있음을 확인하였고 이를 화장품에 적용하여 시험한 결과 피부 노화 개선에 도움을 주는 성분임을 확인하였다.
Purpose: Noninflammatory synovial fibrosis has been noted for main causal factor of carpal tunnel syndrome (CTS). Recently, there are some reports that heparin have not only anti-coagulative effect but also anti-inflammatory and anti-fibrotic potential and have an effect on interstitial pulmonary fiborosis. Authors examined whether heparin affects pathogenesis of CTS. Methods: First, heparin was administered to fibroblast that was cultured from patient's transverse carpal ligament. Secondly, we evaluated the expression from genes of type I, III collagen, TGF ${\beta}$ isoforms and MMP. Fibroblasts were isolated and cultured from transverse carpal ligaments of 5 patients with CTS. Heparin (0, 1, 10,$100{\mu}g/ml$) was administered to cultured fibroblast and reverse transcription PCR for mRNA expression of type I, III collagen, TGF-${\beta}$ isoforms and MMP was done. Results: Heparin suppressed gene expression of type I, III collagen and TGF-${\beta}1$, ${\beta}3$ but promoted gene expression of TGF-${\beta}2$ and MMP-2. Conclusion: Heparin directly suppress gene expression of type I, III collagen. But, It is undetermined that heparin can present it's effect mediated by TGF ${\beta}$ isoforms or MMP.
This study was carried out to identify the skin anti-aging effect of cycloheterophyllin on dermal fibroblasts. To elucidate anti-aging effects of cycloheterophyllin on dermal fibroblasts, I measured cell viability, mRNA expressions, and Collagen, type I/matrix metallopeptidase 1(MMP1)-ELISA assay. In this study, I investigated the effects of cycloheterophyllin on Collagen, type I, alpha 1(COL1A1)/Collagen, type III, alpha 1(COL3A1)/MMP1/Superoxide dismutases/Catalase(CAT) mRNA expressions and Collagen, type I/MMP1 protein production. Quantitative Real-time RT-PCR showed that cycloheterophyllin increased mRNA level of COL1A1/COL3A1/CAT genes and collagen, type I protein by ELISA assay compared to UVA-treated dermal fibroblasts. Furthermore MMP1 mRNA and protein expressions were decreased by cycloheterophyllin treatment. These observations revealed that cycloheterophyllin increased anti-aging effects in dermal fibroblasts. Therefore, I identified the anti-aging effects of cycloheterophyllin, and these results showed that the cycloheterophyllin can be a considerable potent ingredient for skin anti-aging. Based on this, I anticipated further researches about cycloheterophyllin for mechanism to develop not only cosmetics but for healthcare food or medicine.
본 연구에서는 HS27 피부 섬유아세포에 비타민 C, silicon, 철분, proline 및 lysine을 혈청 및 피부 내 농도 범위로 처리한 후 세포의 증식을 비롯하여 콜라겐 I과 III의 mRNA 및 단백질의 발현을 비교하였다. 비타민 C는 처리 기간 및 농도와 무관하게 세포 증식 및 mRNA 발현에 영향을 미치지 않았으며 콜라겐 type I 및 III의 단백질 발현은 각각 5-50 ${\mu}M$, 10-50 ${\mu}M$ 농도에서 5일 처리 시 683.9%, 182% 이상으로 발현을 증가시켰다. Silicon의 3일 및 5일 농도별 처리는 세포증식과 콜라겐 mRNA 및 단백질 발현을 다소 감소시키거나 영향을 미치지 않았다. 철분의 3일 및 5일 처리는 혈청 내 농도(11-35 ${\mu}M$)에서 콜라겐 mRNA 발현에 영향을 미치지 않았으며 세포 증식 및 콜라겐 단백질 발현을 증가시켰다. 또한 철분의 5-30 ${\mu}M$의 농도 처리는 5일 처리보다 3일 처리 시 발현수준이 훨씬 컸다. 콜라겐의 구성 아미노산인 proline 및 lysine은 섬유아세포의 증식을 증가시켰다. 따라서 단기간의 콜라겐의 합성 증가는 철분의 섭취가 적합하나 장기간의 섭취에는 비타민 C의 섭취와 더불어 철분의 섭취가 필요한 것으로 여겨진다.
This study was undertaken to investigate possibility of the allogenic type I collagen inducing osteoinduction or osteoconduction at critical sized bone defect in the rabbit. Twenty Newzealand white rabbit, weighted from 2.8 kg to 3.5 kg, were used in this study. The skull was exposed and two bony defects were created with diameter of 10 mm. Group I(n=10), the bony defects was grafted from the other side bone. Group II(n=10), the bony defects was grafted by the allogenic type I collagen with bone morphogenic protein(BMP). Group III(n=10), the bony defects was grafted by the allogenic type I collagen only. Group IV(n=10), the bony defects was lefted with no grafts. The grafted bones and allogenic type I collagen were investigated with radiologic densitometry, histologic analysis and immunohistochemistry after 12 weeks. No major difference was observed in the gross finding between Group I, II, III, but dura mater was exposed in bony defect,the Group IV. The radiologic study demonstrated more bony opacity in the Group I, but the other groups did not demonstrate a significant difference. In the histologic study, grafted bone edge was completely consolidated with original bone in group I and new bone ingrew into the grafted allogenic type I collagen(group II, III),but there is no bone regeneration from the original bony edge in the group IV. The percent of the new bone formation by cross-sectional area was considered statistically significant at a p value of less than 0.05(p<0.05). In the immunohistochemistry study about BMP antibodies, the group IV demonstrated osteogenic activity in front of advancing original bone edge, in which the osteoblast stained strongly for BMP antibodies, but other group does not demonstrated any osteoblastic expression. There was no immunologic rejection. In conclusion, this results do not demonstrate that the allogenic type I collagen is useful for bone substitute, but the characters of the collagen, such as pliability, easy-handling, sponge-like structure, are useful in interpositional bone graft substitutes. The further evaluation of long term results about the resorption, immunologic tissue reaction, response of applied tissue growth factor to the allogenic collagen is needed.
태아와 성체의 상처치유과정에서 다른 점으로는 태아 상처가 염증반응과 반흔조직의 생성이 없이 신속히 치유됨을 들 수 있다. 태자상처의 비반흔성 치유와 세포외기질의 역할을 연관지어 해석하려는 노력이 진행중에 있으나, 각 실험 동물종간의 차이 및 세포외기질 구성요소의 다양성등 많은 변수가 아직 미결의 과제로 남아 있다. 본 연구의 목적은 토끼 태자의 상처 치유과정에서 반흔조직의 형성과 관련이 있는 세포외기질의 주요성분인 교원질 I, III, IV, V형, fibronectin, laminin의 시기적 출현 및 분포양상을 조사하기 위한 것이다. 뉴질랜드산 횐 토끼를 임신 3기의 중반인 24일째에 자궁절개술을 시행하고 태자에 인위적으로 구순열상을 만든 후, 봉합한 군(봉합군)과 봉합하지 않은 군(비봉합군), 정상대조군(sham operation group)으로 나누고 이들을 각각 수술후 1, 2, 3, 5, 7일째에 희생시켜 상처치유에 대한 육안관찰 소견과 H & E 염색 소견 및 교원질 I, III, IV, V형, fibronectin, laminin의 면역조직화학적 염색 소견을 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 봉합군과 비봉합군에서 전기간동안 염증반응은 없었다. 2. 비봉합군의 재상피화가 봉합군에 비해 다소 느렸다. 3. 교원질 I, III, V형은 봉합군과 비봉합군에서 2일군까지는 발견되지 않았고 3일군이후 존재하였으나 염색정도가 인접정상조직이나 정상대조군에 비하여 증가하지 않았다. 4. 상피 기저막에서 교원질 IV형의 염색소견은 봉합군과 비봉합군에서 3일군이 다소 증가하였으나 그후 감소하여 인접정상조직이나 정상대조군과 차이가 없었고, laminin의 염색 소견은 봉합군과 비봉합군에서 5일군이후 발견되었고 염색정도의 증감없이 7일군까지 유지되었고 인접정상조직이나 정상대조군과 차이가 없었다. 5. 혈관내피세포 기저막에서 laminin과 교원질 IV형의 염색소견은 인접정상조직이나 정상대조군에 비해서 증가하지 않았다. 6. Fibronectin은 봉합군과 비봉합군에서 fibrin clot과 창상 기저부 및 창상연을 따라 3일군까지 염색소견이 증가하였다가 그후 감소하여 인접정상조직이나 정상대조군과 차이가 없었다.
We investigated the pathogenesis of liver tissue damage during the lipid peroxidation and fibrogenesis with the observation of correlations between the parameters of collagen synthesis (and deposition) and lipid peroxidation in liver fibrosis (cirrhosis) rats. Rats were randomly divided into two groups, normal and $CCl_4$-thiopental sod. intoxicated group. And the one group was treated intragastrically with the mixture of $CCl_4$-thiopental sod. 3 times per week for 3 weeks. The liver tissue and sera were used for the measurement of hydroxyproline (HYP), malonedialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD). Biochemical parameters such as aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), total-bilirubin and blood urea nitrogen (BUN) were measured. Additionally, the expression of collagen ${\alpha}1$(III) and $\beta$-actin mRNA was observed by RTPCR. The histological change in liver tissue was also observed by Masson's trichrome and H&E staining. Correlation analysis was carried by Spearman's rho method. All biochemical parameters except total-bilirubin were significantly higher in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group than that of the normal group (p < 0.01). In the $CCl_4$-thiopental sod. treated group, Hyp as a parameter of collagen synthesis (deposition) and MDA as a metabolite of lipid peroxidation, were significantly elevated by 1.98 and 2.11 times higher than that of the normal group (p < 0.001) respectively. The activity of SOD in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group is decreased significantly by 44.8% (p < 0.001). And collagen ${\alpha}1$(III) mRNA was more expressed in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group than that of the normal group. However, the expression of $\beta$-actin mRNA is showed similar in both of groups. A good correlation was observed between the content of hyp and MDA concentration (r = 0.70, n = 40) in the two groups. And the correlation between the levels of hyp and SOD (r = -0.71, n = 25) is also reliable. However, no correlation were observed between MDA concentration and SOD (r = -0.40, n = 25) in the two groups. Elevated levels of MDA in $CCl_4$-thiopental sod. treated rats indicated enhancement of lipid peroxidation, which is accompanied by a decrease in SOD activity. Moreover, we could confirm that the parameters of collagen synthesis (and deposition) is in good correlation with the metabolite of lipid peroxidation (MDA) and the lipid peroxidation antagonizing enzyme (SOD). Hence, we propose that (1) lipid peroxidation and collagen synthesis (and deposition) could be enhanced by intragastrically application of $CCl_4$-thiopental sod. during a short terms. And (2) the intoxication of $CCl_4$-thiopental sod. could be used for monitoring of lipid peroxidation and collagen synthesis (and deposition) for test of antioxidant and antifibrotic agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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