Sanghvi, Gaurav V.;Koyani, Rina D.;Rajput, Kishore S.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.5
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pp.470-476
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2011
A potent fungus for amylase production, Chrysosporium asperatum, was isolated from among 30 different cultures obtained from wood samples collected in the Junagadh forest, India. All of the isolated cultures were screened for their ability to produce amylase by submerged fermentation. Among the selected cultures, C. asperatum (Class Euascomycetes; Onygenales; Onygenaceae) gave maximum amylase production. In all of the different media tested, potato starch was found to be a good substrate for production of amylase enzyme at $30^{\circ}C$ and pH 5.0. Production of enzyme reached the maximum when a combination of starch and 2% xylose, and organic nitrogen (1% yeast extract) and ammonium sulfate were used as carbon and nitrogen sources, respectively. There was no significant effect of metal ions on enzyme activity. The enzyme was relatively stable at $30^{\circ}C$ for 20 min, and no inhibitory effect of $Ca^{+2}$ ions on amylase production was observed.
Cell-free culture broth of Phanerochaete chrysosporium has been adopted to biologically degrade 2,4,5-trichlorophenol. Two different medium compositions of nitrogen-sufficient and nitrogen-limited were compared for their distribution of isozymes, activity of lignin peroxidase, and production of oxalate. The two different culture broths were tested for their ability to degrade 2,4,5-trichlorophenol, and the biodegradation efficiency was estimated in terms of the disappearance of 2,4,5-trichlorophenol. The degradation efficiency for the nitrogen-limited culture broth was higher than that of the nitrogen-sufficient culture broth, since the nitrogen-limited culture broth induced lignin peroxidases (LiPs) and manganese peroxidases (MnPs), and contained sufficient oxalate for producing necessary radicals. Finally, the possible mechanism of 2,4,5-CP degradation using the nitrogen-limited culture broth was proposed.
Three immobilization techniques and free cell system were tested to determine the most effective technique for the treatment of pulp waste effluent. The tests were conducted using Phanerochaete chrysosporium as a biocatalyst in a process designed to treat pulp waste effluent. The results show that Ca-alginate gel was the best immobilization material. The chosen material improved the stability and increased the removal efficiency of the system. The experiment using the chosen material was mom- bored for 400 hours with no significant changes in the state of the fungus. Common problems with other immobilization materials and free cell system were oxygen transfer resistance caused by air channelling and clogging in the bioreactor.
The manganese peroxidase (mnp5) from white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium has been heterologously expressed in the methylotrophic yeast Pichia pastoris. The majority of the rMnP5 (recombinant MnP5) produced by P. pastoris exhibited an approximate molecular mass 45 kDa considerably larger than that of the predicting mnp5 due to two glycosylation sites of mnp5. After site direct mutation treatment, the effect of N-linked hyperglycosylation was examined by enzyme activity. Analysis by sodium dodesyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Coomassie Brilliant Blue (CBB) staining revealed a major protein band with a molecular mass of 37 kDa. Enzyme activity of M-rMnP5 (mutant recombinant MnP5) was similar to that of rMnP5, indicating that hyperglycosylation did not affect the active site. In this work, active mnp5 was successfully expressed in P. pastoris, suggesting that P. pastoris has potential capability of producing active heme-containing proteins.
cDNA of the glx1 gene encoding glyoxal oxidase (GLX) from Phanerochaete chrysosporium was isolated and expressed in Pichia pastoris. The recombinant GLX (rGLX) produces $H_2O_2$ over 7.0 nmol/min/mL using methyl glyoxal as a substrate. Use of rGLX as a generator of $H_2O_2$ improved the coupled reaction with recombinant manganese peroxidase resulting in decolorization of malachite green up to $150{\mu}M$ within 90 min.
The effect of the dissolved oxygen (DO) concentration on the production of manganese peroxidase by Phaenerochaete chrysosporium was studied in the immobilized reactor system. The oxygen levels significantly affected the production of manganese peroxidase (MnP) as well as that of $H_2O_2$. It is known that a high oxygen level is required to produce this enzyme. In this study, however, higher DO concentrations above a critical DO concentration inhibited MnP production. It is thought that a greater $H_2O_2$ production seen with higher DO concentrations caused adverse effects on the MnP production. On the other hand, with lower DO concentrations, $H_2O_2$ did not accumulate enough to stimulate MnP production.
The growth and bioconversion potential of selected strains growing on cassava waste substrate during solid state fermentation were assessed. Rhizopus stolonifer showed the highest and the fastest utilization of starch and cellulose in the cassava waste substrate. It showed 70% starch utilization and 81% cellulose utilization within eight days. The release of reducing sugars indicating the substrate saccharification or degradation potential of the organisms reached the highest value of 406.5 mg/g by R. stolonifer on cassava waste during the eighth day of fermentation. The protein content was gradually increased (89.4 mg/g) on the eighth day of fermentation in cassava waste by R. stolonifer. The cellulase and amylase activity is higher in R. stolonifer than A. niger and P. chrysosporium. The molecular mass of purified amylase and cellulase seemed to be 75 KDal, 85 KDal respectively.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.29
no.1
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pp.43-51
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1997
The various culture conditions of Trichoderma viride(ATCC 3454) and Phanerochaete chrysosporium(ATCC 26921) with glucose-pepton medium, Mandels medium, YMG medium for wood degradable enzyme were examined. Mycellium of the two species grew profusely on glucose-pepton medium. Maximum fungal growth was observed about 10days. But CMCase, Fpase, laccase activity in the culture medium with glucose-pepton was not detected. When grown in fermenter culture using Mandels medium, Trichoderma viride produced CMCase and Fpase. Its CMCase activity was 0.15 lU/ml and Fpase activity was 0.3 IU/ml within about 4-6days. Phanerochaete chrysosporium grown in a YMG medium gave the best enzyme activity when they were grown under stationary culture with an atmosphere of 100% oxygen. Levels of laccase activity of 3.0 mull were achieved in stationary culture under 100% oxygen. The enzyme condensation by ultrafiltration method caused a 2-fold(cellulase) and 6-fold(laccase) as compared to control activity.
Gherbawy Youssuf A.M.H.;Maghraby Thanaa A.;El-Sharony Hassan M.;Hussein Mohmaed A.
Mycobiology
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v.34
no.4
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pp.180-184
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2006
The mycobiota of 160 hair and nail samples collected from 4 different governorates in upper Egypt were estimated using soil plate method for isolating keratinophilic and dermatophytic fungi. Twenty-three fungi were recorded on both hair and nail samples collected from the four governorates. Highest fungal diversity (20) was collected from Red Sea samples followed by Qena (18) and Aswan (17) while lowest fungal diversity was recorded from Sohage samples. The common genera were Aphanoascus, Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces and Chrysosporium. The most prevalent species belonging to these genera were: A. fulvescens, Aphanoascus sp. A. flavus link, A. flavus var. columnaris, P. chrysogenium. P. lilacinus and C. sulfureum. True dermatophytes such as Nannizzia fulva appeared in $20{\sim}30%$ of the male samples.
The cDNA of endo-1,$4-{\beta}-xylanaseA$, isolated from Phaenerocheate chrysosporium was expressed in Pichia pastoris. Using either the intrinsic leader peptide of XynA or the ${\alpha}$-factor signal peptide of Saccharomyces cerevisiae, xylanaseA is efficiently secreted into the medium at maximum concentrations of 1,946 U/L and 2,496 U/L, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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