The brown planthopper (BPH) is a major insect pest in rice, and damages these plants by sucking phloem-sap and transmitting viral diseases. Many BPH resistance genes have been identified in indica varieties and wild rice accessions, but none has yet been cloned. In the present study we report fine mapping of the region containing the Bph1 locus, which enabled us to perform marker-aided selection (MAS). We used 273 F8 recombinant inbred lines (RILs) derived from a cross between Cheongcheongbyeo, an indica type variety harboring Bph1 from Mudgo, and Hwayeongbyeo, a BPH susceptible japonica variety. By random amplification of polymorphic DNA (RAPD) analysis using 656 random 10-mer primers, three RAPD markers (OPH09, OPA10 and OPA15) linked to Bph1 were identified and converted to SCAR (sequence characterized amplified region) markers. These markers were found to be contained in two BAC clones derived from chromosome 12: OPH09 on OSJNBa0011B18, and both OPA10 and OPA15 on OSJNBa0040E10. By sequence analysis of ten additional BAC clones evenly distributed between OSJNBa0011B18 and OSJNBa0040E10, we developed 15 STS markers. Of these, pBPH4 and pBPH14 flanked Bph1 at distances of 0.2 cM and 0.8 cM, respectively. The STS markers pBPH9, pBPH19, pBPH20, and pBPH21 co-segregated with Bph1. These markers were shown to be very useful for marker-assisted selection (MAS) in breeding populations of 32 F6 RILs from a cross between Andabyeo and IR71190, and 32 F5 RILs from a cross between Andabyeo and Suwon452.
The pBT-L transgenic mice carrying human TPO gene in conjunction with bovine $\beta$-casein promoter express human TPO in milk during lactation. In this study, stability of germ line transmission and expression of pBT-L transgene integrated into host chromosome were monitored up to generation F10 of transgenic pBT-L/15 line. When male mouse of generation F8 was crossbred with normal females, approximately half of offsprings (51.3$\pm$18.98%) were identified as transgenic mice. Generation F9 and F 10 mice also showed similar transmission rates (43.8$\pm$18.98% and 71.4$\pm$26.98%, respectively), implying that pBT-L transgene can be transmitted stably up to long term generation in the transgenic mice. Expression levels of human TPO from milk of generation F9 and F10 mice were 1.1$\pm$0.33 mg/ml and 1.1 $\pm$0.45 mg/ml, respectively, which are similar to expression level of generation F2 mice. In conclusion, our results suggest that transgenic animals once established will continuously pass their transgenes to the progeny through the breeding program with the same productivity of human protein in their milk.
Root tips of wheat, soybean, cotton and barley were treated with cold temperature (12 or 24 hrs in $0^{\circ}C$ or 2$^{\circ}C$), 8-Hyd.exyquinolin (2 or 10 hrs in 0.03 or 0.1%) and colcllicine (2 or 10 hrs in 0.2 or 1, 0%), and the frequency of metaphase were observed. The results were summarized as follow; 1. Chilling the seminal roots before or after sooting from the seed significantly increased tile number of mitotic cells and the rate of metaphase cells to mitotic cells. The optimal duration of chilling seemed to be differ depending on the kinds of plant and 24 hours to be too long except wheat so far examined here. 9. 8-Hydroxyquinolin treatment, about 2 hours in 0.03%, increased the rate of metaphase cells. The higher concentration and the longer treatment of this chemical caused the lower frequency of mitotic cells generally. 3. Colchicine treatment, 2 to 10 hrs in 0.2 to 1.0%, increased the frequency of mitotic cells and the rate of metaphase cells. Colchicine treatment was same or superior than any other treatments on the increase of metaphase cells. 4. All the treatments examined here caused chromosome contraction with most serious in colchicine following by 8-Hydroxyquinolin and chilling. 5. The feasibility of general application of chilling under the check of proper temperature and proper duration depending on the kinds of crops were discussed.
As a basic research for breeding new varieties, reciprocal -intergeneric crosses between Citrus junos and P.trifoliata were made. F$_1$ hybrid production using in vitro ovule culture, gametogenesis, and fertilization phenomena were investigated. Frequency of fruit set resulting from crossing of Citrus junos and Poncirus Trifoliata was 16.6% while that of Poncirus Trifoliata and Citrus junos was 11.7%. Callus formation occurred well when ovules at the 6th week after pollination were cultured on MT (Murashige and Tucker) medium supplemented with zeatin 0.5 mg/L and NAA 1.0 or 3.0 mg/L. Immature ovules developed into mature embryos of the MT medium supplemented with 2,4-D 0.1 or 3.0 mg/L. Immature ovules developed into mature embryos of the MT medium supplemented with 2,4 D 0.1 or 0.5 mg/L. The invitro germination rates of 20-week-old ovules set C. junos $\times$ P. Trifoliata and P. Trifoliata $\times$ C. junos were 54.5% and 48.6%, respectively. The emergence ratios of trifoliate hybrids obtained by C. junos $\times$ P. Trifoliata and P. Trifoliata $\times$ C. junos were 56.7% and 100%, respectively. The chromosome number of C. junos and P. Trifoliata was n = 9 or 2n = 18, and the sizes of their pollen grain were 33.75 $\mu$ and 25.0 $\mu$. The length and width of embryo sac in C. junos and P. Trifoliata were 69.38~79.23 $\mu$ and 27.50~38.56 $\mu$, and those of egg cells were 17.50~41.50 $\mu$ and 6.25~8.12$\mu$. Fertilization of C. junos and P. trifoliata terminated 72 h after pollination.
The objective of this study was to investigate the in vitro / in vivo embryonic development after vitrification of mouse zygotes and the chrom osomal normality of delivered live young after embryo transfer. Mouse IVF zygotes were cryopreserved by vitrification using vitrification solution, EFS40 (40% ethylene glyc이, 30% Ficoll a and 0.3 M sucrose in phosphate buffer saline c containing 10% FBS ) . After mouse zygotes were exposed to EFS40 at 25"C for 30 sec., they were immediately plunged into LN$_2$. Vitrified thawed mouse zygotes were cultured upto bIastocysts in M16 for 4 days. The rates of in vitro development were 71.5% under this condition. Cultured blastocysts were transferred to recipients (3 day of pseudopregnant) on one or both uterus horns (6-8 embryos per a uterus horn). And all recipients were allowed to produce litters. The results obtained in these experiments were summarized as follows: The pregnancy rates and in vivo survival rates, live fetus rates, for vitrified zygotes (80.0, 39.6%) were not significantly difference in those of control zygotes (77.8%, 50.0%). Also, all of live-born young mice were chromosomally normal (n=40). This results suggested that proposed rapid vitrification procedures can be effectively use in 1-cell mouse zygotes cryopreservation.
Results obtained from the observation of 1,000 matured resting conidia of Pyricularia oryzae CAV. were as fellows. The percentage of a condium conitaining was 95.5, while that of a multinucleate conidium was 4.5. Formation of the three-celled mature conidium containing a nucleus in each cell, which was derived from the immatured conidium, could be recognized. Chromosomes could be observed in the conidium when the nuclear division took place. The number of chromosomes was n=3, 4, 5 or 6 but rile majority was 5. The nucleus was moved into the germ-tube from the conidium by following ways: (a) a resting nucleus divided into two nuclei in the conidium and one of them was moved into the germ-tube. The other nucleus remained in the conidium (43 per cent): (b) a nucleus was moved into the germ-tube from the conidium without nuclear division (57 Per cent). The appressorium without a nucleus was abundantly observed when stain was made. However, tile number of a mononucleate appressorium was 476 out of 500 appressoria which had nuclear sap. On the ground of this experiment, we could support the conidium of blast fungus contained mononucleus and also homokaryon seemed to b: appealed on the conidia even though those were multilocular. As the results, it could be concluded that use of inoculum derived from single spore isolate was reasonable for any experiments in the rice blast fungus.
Erwinia pyrifoliae is a Gram-negative bacterium causing black shoot blight in apple and Asian pear trees. E. pyrifoliae strain EpK1/15 was isolated in 2014 from an apple twig from the Pocheon, Gyeonggi-do, South Korea. In this study, we report the draft genome sequence of E. pyrifoliae EpK1/15 using PacBio RS II platform. The draft genome is comprised of a circular chromosome with 4,027,225 bp and 53.4% G + C content and a plasmid with 48,456 bp and 50.3% G + C content. The draft genome includes 3,798 protein-coding genes, 22 rRNA genes, 77 tRNA genes, 13 non-coding RNA genes, and 231 pseudo genes.
Using pyrene as the enrichment nutrient, a bacterial strain 10PY1A, was isolated by enrichment culture from oil-contaminated sea sand of Arabian Gulf in Saudi Arabia, and this strain belongs to the species Idiomarina piscisalsi, based on 16S RNA gene sequence analysis. The genome of I. piscisalsi strain 10PY1A contains 2,346 protein-coding sequences and an average GC content of 47.4% in its chromosome (2.59 Mbp). Genes encoding proteins related to the degradation of pyrene were existed in the strain 10PY1A genome, indicating that this strain can be used to degrade polycyclic aromatic hydrocarbons in oil-contaminated marine flora and soil.
A quantitative trait loci (QTL) analysis of traits related to heading and yield was performed develop rice cultivars that are both early maturing and panicle weight type varieties. Our analysis included 120 strains of the Cheongcheong Nagdong doubled haploid (CNDH) variety. An observational growth experiment was conducted to identify genetic agronomic traits of CNDH. Heading date, ten plant weight, moisture, thousand grain weight, and yield had a normal distribution based on the frequency distribution table of the observational growth data. The QTL analysis found one heading-related and nine yield-related QTLs. The LOD of 2.85 was the largest in QTLs for heading date (QHD), 5.39 in QTLs for ten plant weight (QTPW), 3.92 in QTLs for moisture (QM), 4.80 in QTLs for thousand grain weight (QTGW), and 3.7 in QTLs for yield (QY). Genomic analysis detected 58 candidate genes on chromosome 2, 3, 7, 8, and 10. Among those, we found Rcd1 protein and OsERF3 gene in QM, MtN3 and zinc finger protein genes in QTGW, and OsNAC3 protein gene in QY. If further analysis reveals the presence of genes related to water content, thousand grain weight or yield in the CNDH stains, we can develop a selection of varieties that will be capable of coping with climate change and will contribute to global food problems.
Objective: The genetic effects of an individual on the phenotypes of its social partners, such as its pen mates, are known as social genetic effects. This study aims to identify the candidate genes for social (pen-mates') average daily gain (ADG) in pigs by using the genome-wide association approach. Methods: Social ADG (sADG) was the average ADG of unrelated pen-mates (strangers). We used the phenotype data (16,802 records) after correcting for batch (week), sex, pen, number of strangers (1 to 7 pigs) in the pen, full-sib rate (0% to 80%) within pen, and age at the end of the test. A total of 1,041 pigs from Landrace breeds were genotyped using the Illumina PorcineSNP60 v2 BeadChip panel, which comprised 61,565 single nucleotide polymorphism (SNP) markers. After quality control, 909 individuals and 39,837 markers remained for sADG in genome-wide association study. Results: We detected five new SNPs, all on chromosome 6, which have not been associated with social ADG or other growth traits to date. One SNP was inside the prostaglandin $F2{\alpha}$ receptor (PTGFR) gene, another SNP was located 22 kb upstream of gene interferon-induced protein 44 (IFI44), and the last three SNPs were between 161 kb and 191 kb upstream of the EGF latrophilin and seven transmembrane domain-containing protein 1 (ELTD1) gene. PTGFR, IFI44, and ELTD1 were never associated with social interaction and social genetic effects in any of the previous studies. Conclusion: The identification of several genomic regions, and candidate genes associated with social genetic effects reported here, could contribute to a better understanding of the genetic basis of interaction traits for ADG. In conclusion, we suggest that the PTGFR, IFI44, and ELTD1 may be used as a molecular marker for sADG, although their functional effect was not defined yet. Thus, it will be of interest to execute association studies in those genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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