목 적: 본 연구는 methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR C677T와 A1298C) 유전자 돌연변이형이 자연유산아 발생의 원인 유전자로 작용하는지에 대해 알아보고자 시도하였다. 연구방법: 95명의 자연유산아 조직과 대조군으로 100명의 정상 소아의 혈액 그리고 449명의 정상 성인의 혈액을 채취하여 DNA를 분리하여 사용하였다. 유전자형은 분리된 DNA를 이용하여 중합효소 연쇄반응과 제한효소 절편다형 분석방법으로 결정하였다. 결 과: 자연유산아 그룹은 소아대조군에서 보다 MTHFR 677CC 형 (p=0.014)은 높게, 677CT형 (p=0.063)은 낮게 나타났다. 성인대조군과의 비교에서도 MTHFR 677CT 형의 빈도는 현저히 낮게 나타났다 (p=0.032). 그리고 MTHFR 677CC/1298AC 조합형 유전자의 경우 소아대조군 (p=0.034)과의 비교에서는 현저히 높은 빈도를 나타냈으나, 성인대조군 (p=0.063)과의 비교에서는 높은 경향성은 있었으나 통계학적으로 유의한 차이는 없었다. 결 론: MTHFR 677CC와 MTHFR 677CC/1298AC 유전자형은 자연유산아 발생의 위험인자일 가능성이 높으며, 지속적인 연구가 요구된다.
Objective: This study was performed to evaluate whether vitrification method could be used for the cryopreservation of human blastocysts derived from IVF program. Methods: Surplus embryos were obtained from consented IVF patients. Controlled ovarian hyperstimulation was done with midluteal GnRH agonist, gonadotropin and hCG. After oocyte retrieval and insemination, fresh embryo transfer was done at $4{\sim}8$ cell stage. The surplus embryos after ET were cultured in blastocyst medium up to 6 days after oocyte retrieval. Obtained blastocysts were cryopreserved with our vitrification method. Blastocysts were exposed to 1.5 Methylene glycol (EG) in phosphate buffered saline (PBS) for 2.5 minutes, followed by 5.5 M EG plus 1 M sucrose for 20 seconds. Then 1 to 3 blastocysts were mounted on electron microscope (EM) grid and the grid was plunged into liquid nitrogen for storage. For thawing, blastocyst-containing EM grids were sequentially transferred in 1.0 M, 0.5 M, 0.25 M, 0.125 M and 0 M sucrose solution at the intervals of2.5 minutes. And blastocysts were cultured for about 6 hours and only re-expanded blastocysts were transferred to uterus of the patients on 4 to 5 days after ovulation in natural cycle or on 18 to 19 day of artificial cycle. Results: From Oct. 1998 to Jul. 1999, 34 patients were agreed to participate in this study. The mean age and duration of infertility of the patients were 31.6 years and 4.1 years, respectively. Among 34 cycles. replacements could be done in 20 cycles (58.8%). A total 93 blastocysts were thawed and 48 (51.6%) of them survived. Thirty-eight blastocysts, mean 1.9 embryos per patient, were transferred, resulting in 5 clinical pregnancies which consisted of 1 triplet, 2 sets of twins and 2 singleton pregnancies. The pregnancy rate per transfer was 25% and implantation rate was 23.6%. Five patients delivered 7 healthy babies including 2 sets of twins at term. Conclusion: Successful pregnancies and deliveries were established after transfer of vitrified human blastocysts. Vitrification using ethylene glycol as cryoprotectant and electron microscope grid is a rapid and simple method that can be effectively applied for the cryopreservation of human blastocysts.
Purpose: A few studies have assessed the factors affecting the prognoses for major trauma patients and those improving the circumstances when dealing with the trauma system. In that light, we analyzed factors, such as pre-hospital factors, the time to admission, the length of stay in the emergency department (ED) and emergency operation, influencing the outcomes for trauma patients. Methods: The patients who visited our emergency department from April 1, 2009, to February 29, 2011, due to major trauma were enrolled in the study. The inclusion criterion was a revised trauma score (RTS) < 7 or injury severity score (ISS) ${\geq}$ 16. We used reviews of medical records, to analyze each step of emergency medical care with respect to patients' sex, age, visit time and visit date. Continuous variables were described as a median with an interquartile range, and we compared the variables between the survival and the mortality groups by using the Mann-Whitney U test. Fisher's exact test was used for nominal variables. Using the variables that showed statistical significance in univariate comparisons, we performed a logistic regression analysis, and we tested the model's adequacy by the using the Hosmer-Lemeshow method. Results: A total of 261 patients with major trauma satisfied either the RTS score criterion or the ISS score criterion. Excluding 12 patients with missing data, 249 patients were included in this study. The overall mortality rate was 16.9%. Time to ED arrival, time to admission, time of ED stay, RTS, ISS, and visit date being a holiday showed statistically significant differences between the survival and the mortality groups in the univariate analysis. RTS, ISS, length of ED stay, and visit date being a holiday showed statistical significance in the multivariate analysis. Conclusion: The mortality rate did not show a significant relationship with the time to ED arrival, use of 119, on time to admission. Rather, it elicited a quite significant correlation with the trauma scoring system (RTS and ISS), the time of ED stay, and the visit date being a holiday.
Objectives : Embolization of intracranial aneurysms by using Guglielmi detachable coils(GDC) is proving to be a safe method of protecting aneurysms from rupture. Occasionally, patients with unruptured intracranial aneurysms present with symptoms related to the aneurysm's mass effect on either the brain parenchyma or cranial nerves. In the present study, the authors conducted a retrospective review to evaluate the response to GDC embolization in a series of 6 patients presenting with cranial nerve dysfunction due to mass effect. Patients and Methods : Aneurysms were classified by size, shape, and amount of intraluminal thrombus. Patients were classified by duration of symptoms prior to GDC treatment(range<1 month to>4 years). Clinical assessment was performed within days of the GDC procedure and at later follow-up appointments(range 5-16 months, mean 9 months). Results : In the immediate post-GDC embolization period, one of the five patients had transient worsening of third nerve palsy, which later improved to better than baseline status. Two patients who presented with third nerve deficit from a internal carotid artery-posterior communicating artery junction aneurysm had complete recovery. One patient who presented with hemiparesis and dysarthria from a giant mid-basilar aneurysm showed improvement of these symptoms. One patient who presented with sixth cranial nerve deficit from a cavernous aneurysm showed no change at the 8-months follow-up examination. Conclusion : The endovascular treatment of intracranial aneurysms by using GDC is suggested as an alternative therapeutic method for improving or alleviating neurological deficits produced by mass effect.
Objective: We inversigated Small Heterodimer Partner (SHP) gene mutation in Korean Polycystic Ovarian Syndrome (PCOS) patients. SHP protein regulates the activity of nuclear receptors which regulate the cellular development and differentiation. Recently, the mutation of SHP gene was found in the obesity and diabetes patients in Japanese group, and suggested that its mutation may involved in pathogenic mechanism of PCOS. Methods: This study was performed in 20 PCOS patients and 20 normal women. The DNAs were extracted from the peripheral bloods, and amplified at each exon (1 and 2) of SHP gene by PCR method. Subsequently, each PCR product was digested with the restriction enzyme indicated below for studying restriction fragment length polymorphism (RFLP). After enzyme digestion, the results of RFLP were compared PCOS patients with control women to find any sequence variation. Results: We examined 9 regions of exon 1 with Msp I, Pvu II, Dde I and 3 regions of exon 2 with Pst I, Dde I. There is no heterozygous or homozygous mutation in patients and control women at these restriction sites. Conclusion: The genetic analysis at our restriction sites in the SHP gene did not show any genetic variation in Korean PCOS patients. Our PCR-RFLP analysis was not covered the entire SHP gene (68 bp/1,006 bp), we need to further analysis of the entire SHP gene.
Objectives: Controversial arguments exists on both the case for and against on the accumulation of mitochondrial DNA (mtDNA) deletion in association to tissue and age. The debate continues as to whether this mutation is a major contributor to the phenotypic expression of aging and common degenerative diseases or simply a clinical insignificant epiphenomenon. The objective of this study was to determine whether the accumulation of mtDNA deletion is correlated with age-related and tissue-specific variation. Materials and Methods: One hundred and fifty-seven tissues from blood, ovary, uterine muscle, and abdominal muscle were obtained from patients ranging in age from 31$\sim$60 years. After reviewing the clinical reports, patients with mitochondrial disorder were excluded from this study. The tissues were obtained at gynecological surgeries with the consent of the patient. Total DNA isolated from blood, ovary, uterine muscle, and abdominal muscle was amplified by two rounds of PCR using two pairs of primers corresponding to positions 8225-8247 (sense), 13551-13574 (antisense) for the area around deleted mtDNA and 8421-8440 (sense), 13520-13501 (antisense) for nested PCR product. A statistical analysis was performed by $x^2$-test. Results: About 0% of blood, 94.8% of ovary, 71.4% of uterine muscle, and 86.1% abdominal muscle harbored mtDNA deletion. When we examined the proportion of deleted mtDNA according to age deletion rate was 90% of ovary, 63.6% of uterine muscle, 77.7% of abdominal muscle in thirties and 100% of all tissue in fifties. Conclusion: The findings of this study suggest that the mtDNA deletion is varied in tissue-specific pattern and increases with aging.
The purpose of this study was to determine the effect of contralateral hip adduction (CHA) on thickness of lumbar stabilizers during hip abduction in side-lying. Twenty healthy subjects without back pain were recruited for this study. The thickness of transverse abdominis (TrA), internal oblique (IO) and quadratus lumborum (QL) were measured by ultrasonography. Pelvic lateral tilting motion was measured using a three-dimensional motion analysis system. Measurements were performed at rest position (RP), $35^{\circ}$preferred hip abduction (PHA) and $35^{\circ}$abduction with $10^{\circ}$contralateral hip adduction (CHA) in side-lying at the end of expiration. During the measurements, subjects were asked to maintain steady trunk alignment without hand support. Thickness of TrA and IO was significantly greater in CHA than in PHA and RP conditions. There was no significant difference in thickness of TrA and IO between PHA and RP conditions. Medio-lateral (M-L) thickness of QL was not significant between PHA and CHA conditions. Anterio-posterior (A-P) thickness of QL in PHA and CHA significantly decreased compared to RP condition. Angle of pelvic lateral tilting was significantly decreased in CHA compared to PHA condition. In conclusion, CHA can be recommended for increasing trunk stability without compensatory pelvic motion during hip abduction exercise in side-lying.
Micromanipulation procedures have been used to improve fertilization rates in patients with male factor or with unexplained infertility. Partial zona disseetion(PZD), a method using mechanical force to open the zona pellucida increase the chances of fertilization. The purpose of this study is to increase rates of fertilization and pregnacy in the ART program by using PZD. The influence of PZD on the fertilization rate was investigated in 57 couples with semen defects, antisperm antibodies(ASA), or unknown factors. PZD directly performed in 35 couples with a history of fertilization failure in previous cycle (Group 1), and PZD applied in 22 couples with the failure of initial fertilization in the same cycle (Group 2). The fertilization rates of the male facor, ASA positive factor and unknown factor in Group 1 were 37.6%, 20.0% and 59.2%, respectively. The rates of fertilization of male factor, ASA positive factor and unknown factor in Group 2 were 34.8%, 20.0% and 26.5%, respectively. The incidences of polyspermy in Group 1 and Group 2 were 5.9% and 9.0%, respectively. Among 35 patients of Group 1, one patient was pregnant and successfully delivered, whereas 1 of 22 patients of Group 2 became pregnant, but aborted at 7 weeks.
The trophectoderm is one of the earliest cell types to differentiate in the forming placenta. It is an important for the initial implantation and placentation during pregnancy. Trophoblast stem cells (TBSCs) develop from the blastocyst and are maintained by signals emanating from the inner cell mass. However, several limitations including rarity and difficulty in isolation of trophoblast stem cells derived from blastocyst still exist. To establish a model for trophoblast differentiation, we isolated TBSCs from human term placenta ($\geq$38 weeks) and characterized. Cell cycle was analyzed by measuring DNA content by FACS analysis and phenotype of TBSCs was characterized by RT-PCR and FACS analysis. TBSCs have expressed various markers such as self-renewal markers (Nanog, Sox2), three germ layer markers (hNF68, alpha-cardiac actin, hAFP), trophoblast specific markers (CDX-2, CK7, HLA-G), and TERT gene. In FACS analysis, TBSCs isolated from term placenta showed that the majority of cells expressed CD13, CD44, CD90, CD95, CD105, HLA-ABC, cytokeratin 7, and HLA-G. Testing for CD31, CD34, CD45, CD71, vimentin and HLA-DR were negative. TBSCs were shown to decrease the growth rate when cultured in conditioned medium without FGF4/heparin as well as the morphology was changed to a characteristic giant cell with a large cytoplasm and nucleus. In invasion assay, TBSCs isolated from term placenta showed invasion activities in in vivo using nude mice and in vitro Matrigel system. Taken together, these results support that an isolation potential of TBSCs from term placenta as well as a good source for understanding of the infertility mechanism.
Objectives Disrupted integrities of the fornix and stria terminalis have been suggested in schizophrenia. However, very few studies have focused on the fornix and stria terminalis comparing first-episode schizophrenia (FESZ), chronic schizophrenia (CS), and healthy controls (HCs) with the application of diffusion-tensor imaging (DTI) technique. The objective of this study is to compare the connectivity of the fornix and stria terminalis among FESZ, CS, and HCs. Methods We included the 44 FESZ patients, 39 CS patients and 20 HCs in this study. Voxel-wise statistical analysis of the fractional anisotropy (FA) data was performed using Tract-Based Spatial Statistics to analyze the connectivity of fornix and stria terminalis. In addition, the Scale for the Assessment of Positive Symptoms (SAPS) and the Scale for the Assessment of Negative Symptoms (SANS) were used to evaluate clinical symptom severities. Results There were no significant differences between the FESZ, CS, and HCs in age, sex, education years. The SAPS and SANS scores of the schizophrenia groups showed no significant differences. FA values of the right fornix cres/stria terminalis in the CS group were significantly lower than those in FESZ and HCs. There were no significant differences of FA values of the right fornix cres/stria terminalis between the FESZ and the HCs. Pearson correlation analyses revealed that significant correlation between FA values of the right fornix cres/stria terminalies of the the FESZ group and positive, negative symptom scales, and FA values of the right fornix cres/stria terminalis of the CS group and negative symptom scales. Conclusions This study shows that FA values of the fornix and stria terminalis in the CS were lower than in the FESZ and the HCs. These results suggest that the fornix and stria terminalis can play a role in pathophysiology of schizophrenia. Thus current study can broaden our understanding of the pathophysiology of schizophrenia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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