Caesalpinia sappan L. (Leguminosae) is an oriental medicinal herb distributed in China and Taiwan, and its heartwood has been traditionally used as an analgesic, a therapy for thrombosis or tumor. This study was to investigate the proliferation and inhibition effects of Caesalpinia sappan extracts against human epithelial cell and cancer cell lines. The methanol extract of dried C. sappan heartwood was evaporated (KS-6), and then sequentially extracted by hexane (KS-01), chloroform (KS-02), ethyl acetate (KS-03), n-butanol (KS-04), and water (KS-05). After 48 hr of exposure, these fractions at a concentration of $50{\mu}g/ml$ significantly increased, and reduced cell proliferation in both human normal epithelial and cancer cell lines. The ethyl acetate fraction (KS-03) among organic solvent fractions was 120.2% of the most proliferation activity ($50{\mu}g/ml$) against HaCaT human epithelial cell. However, fractions from chloroform, butanolic and methanolic extract had 7.2, 28.7 and 20.8% of antiproliferative effect on HaCaT cell, respectively. In cell proliferation effects of C. sappan extract on HeLa, SiHa and C33A human cervical cancer cells, chloroform fraction (KS-2) was the most antiproliferative activity, its antiproliferative rate (dosage, $50{\mu}g/ml$) relative to control was 25.8, 12.2 and 17.4% for SiHa, HeLa and C33A, respectively. The results indicated that the six extract fractions could induce cell cycle stimulate or arrest in some way. Finally, further investigation is needed to assess the molecular mechanisms mediated anticancer activities of this plant.
Allii sativi Bulbus(garlic) have been shown to possess medicinal value, in particular, antimicrobial activity. In this study, we compared the efficacy on some pathogenic bacteria and fungus among several different extracts(water, hexane, ethyl acetate, methanol, chloroform) of Allii sativi Bulbus. Animal pathogenic bacteria and fungus(S. gallinarium: KCTC 2441, S. flexneri: KCTC 2361, E. cloacae: KCTC 2006, K. pneumonia: KCTC 2208, C. albicans: KCTC 1940) were used to test by measurement of minimum inhibitory concentrations(MIC) and disc diffusion. Allii sativi Bulbus were cut and mixed with water at 37℃ about 24 h and filtered, and several different solvents(hexane, chloroform, ethyl acetate, methanol) were respectively added to separate the fraction of each solvent. The antimicrobial(bacteriocidal) and antifungal effect were apparently shown from water extract, hexane and ethyl acetate extract against using strains(Staphylococcus gallinarium, Shigella flexneri, Enterobacter doacae, Klebsiella pneumonia, Candida albicans). Especially, the water extract showed the superior efficacy. And the clear zone size of water extract (11~27 mm) was greater than that of gentamycin, hexane extract and ethyl acetate extract against S. gallinarium. S. flexneri, K. pneumonia and C. albicans. Minimum inhibitory concentrations(MIC) of water extract appeared to around 2.0~7.5 ㎎/㎖ against S. gallinarium, S. flexneri, E. cloacae and K. pneumonia. The greater activity was shown by water extract because the MIC of water extract for C. albicans observed in very low concentration(<1.0 ㎎/㎖) compared to hexane(5.0 ㎎/㎖) and ethyl acetate(10.0 ㎎/㎖). Therefore, these results exhibited that water extract of Allii sativi Bulbus have stronger antimicrobial activity than hexane and ethyl acetate extract, and may be useful as topical medicine of superficial infections causing C. albicans as well as antifungal agents.
Effects of the ultrasonic treatment on plant represents antifeeding activity and chitin synthesis inhibition activity against diamondback moth (Plutella xylostella L.) by a leaf-dipping method at a concentration of 5,000ppm. Methanol extracts of leaves of the ultrasonic treatment on plant was sequentially partitioned with n-hexane, chloroform, ethlyacetate, butanol and water fractions, and bioassayed. Antifeeding activities were observed in n-hexane, chloroform and ethlyacetate fractions. N-hexane fraction has 94.6% of strongest antifeeding activity against P. xylostella. From the n-hexane sequentially partitioned showed H6 and H8 fractions of antifeeding activities against P. xylostella. And chitin synthesis inhibition activity against P. xylostella was obtained the methaol, n-hexane and water fractions.
A series of methanol extracts from leaf and root parts in spring- and winter-barley plants were assayed to determine their allelopathy and antioxidant activity. The methanol extracts applied on filter paper in a Petri-dish significantly inhibited root growth of Chinese milkvetch (Astragalus sinicus L.) seedlings. Leaf extracts at 25 and 50 g $L^{-1}$ inhibited root growth of Chinese milkvetch seedlings more than root extracts. No difference in phytotoxic effects of spring- and winter-barley seedlings extracts on root growth of Chinese milkvetch was observed. Methanol extracts dose-dependently increased DPPH free radical scavenging activity in vitro. DPPH free radical scavenging activity was higher in the methanol extracts from winter-barley seedlings than in those from spring-barley seedlings, and from leaf extracts than from root extracts. The antioxidant potential of the individual fraction from the methanol extracts of spring-barley seedlings was in order of n-butanol>ethyl acetate>water>chloroform>n-hexane fraction. By means of HPLC analysis, spring-barley (200.62 mg $100g^{-1}$) had more amount of total phenol acid than winter-barley (114.08 mg $100g^{-1}$). Especially, ferulic acid was detected in spring-barley extract (183.46 mg $100g^{-1}$) as the greatest amount. These results suggest that early seedlings of barley plants had potent allelopathy and antioxidant activity, and their activities were differently exhibited depending on plant parts and growing condition.
헛개나무 추출물을 이용하여 항산화, 아질산염소거 및 알콜분해 효과 등을 조사한 결과는 다음과 같다. 헛개나무 잎과 과병의 용매별 추출수율을 측정한 결과 잎은 물층, 과병에서는 메탄올층에서 각각 높게 나타났으며, 에탄올 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물과 같은 용매를 이용하여 계통분획한 후 추출수율은 잎과 과병 모두 물분획층에서 높게 나타났다. 메탄올 에탄올, 헥산, 클로로포름 및 물 추출물을 이용하여 항산화 효과 및 아질산염소거 효과를 측정한 결과 에탄올 추출물에서 높은 활성을 나타내었으며, 에탄올 추출물을 계통분획하여 항산화 및 아질산염소거 효과를 측정한 결과 에틸아세테이트 분획층에서 활성이 높게 나타났다. 헛개나무의 부위별 알콜분해효과는 잎과 과병에서 높게 나타났고, 잎과 과병의 알콜분해효과는 시간이 경과함에 따라 증가하였다.
감잎의 메탄을 추출물과 이를 극성이 다른 용매로 더욱 불리한 용매별 획분들의 돌연변이 유발 억제효과를 spore rec assay를 이용하여 검토하고 사람의 결장암 세포인 HT-29와 사람의 위암 세포인 AZ-521의 증식에 대한 저해효과를 실험하였다. 감잎의 메탄을 추출물은 spore rec assay에서 N-methyl- N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) 의 돌연변이성을 61% 정도 억제하였으며, 감잎의 메탄을 추출물에서 효과가 있었던 활성물질을 정제하기 위하여 다시 극성이 다른 용매들로 각각 추출하여 얻은 획분 중에서는 헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트 획분이 강한 돌연변이 유발억제효과를 나타내었다. 그리고 감잎의 메탄을 추출물은 암세포의 증식을 억제시키는 항발암 효과가 관찰되었는데 사람의 결장암 세포인 UT-29와 사람의 위암 세포인 AZ-521에 감잎의 메탄을 추출물을 50$\mu\textrm{g}$/ml와 100$\mu\textrm{g}$/ml 첨가시 이들 암세포의 증식이 각각 90%와 99%가지 크게 억제되었다. 감잎의 메탄을 추출물을 다시 극성이 다른 용매들로 분리한 획분들 중에서는 사람의 결장암 세포인 HT-29와 사람의 위암세포인 AZ-521에 감잎의 클로로포름 획분을 각각 50$\mu\textrm{g}$/ml와 100$\mu\textrm{g}$/ml 첨가시 이들 암세포의 증식 억제율이 100%에 달하였고 감잎의 에틸아세테이트 획분도 사람의 결장암 세포(HT-29)와 사람의 위암세포(AZ-521)에 대해 클로로포름 획분 다음으로 강한 항발암 효과가 관찰되었으며, 헥산 획분도 이들 두 획분(클로로포름 및 에틸아세테이트)보다는 낮았으나 암세포 증식을 억제하는 효과가 관찰되어 항돌연변이 실험에서와 일치하는 결과를 얻었다.
지구자나무 methanol 추출물의 hexane, chloroform, ethylacetate, butanol 및 $H_2O$ 분획물이 $CCl_4$로 급성 간 독성이 유발된 흰쥐의 효소 활성과 항산화 활성 효과를 검토한 결과, 대조군과 비교하여 $CCl_4$ 단독 투여군에서 ALT, AST, ALP, ${\gamma}$-GTP 및 LDH의 활성과 bilirubin, cholesterol 및 TG의 함량이 유의적으로 증가(p<0.05)하였으나, ALT및 AST 활성도는 $CCl_4$ 단독 투여군과 비교하여 chloroform 분획물을 투여한 군에서, ALP 활성도는 hexane 분획물을 투여한 군에서, bilirubin 함량은 butanol과 $H_2O$ 분획물을 각각 투여한 군에서, cholesterol 함량은 chloroform 과 $H_2O$ 분획물을 각각 투여한 군에서, TG 함량은 chloroform 분획물을 투여한 군에서 유의적인 감소(p<0.05)를 나타내었다. 또한 간조직 중 의 과산화 지질함량과 SOD, catalase및 GSH-PB(활성은 대조군과 비교하여 $CCl_4$ 단독 투여군에서 유의적인 증가(p<0.05)를 나타내었으나, 과산화 지질 함량은 $CCl_4$ 단독 투여군과 비교하여 hexane, chloroform, butanol 및 $H_2O$ 분획물을 각각 투여한 군에서, catalase 활성은 chloroform, ethylacetate, butanol 및 $H_2O$를 각각 투여한 군에서, GSH-Px 활성은 chloroform, butanol 및 $H_2O$ 분획물을 각각 투여한 군에서 유의적인 감소(p<0.05)를 나타내었다. 한편, Blutathione함량과 GST 활성은 대조군에 비해 $CCl_4$ 단독 투여군에서 유의적인 감소 (p<0.05)를 나타내었으나, glutathione 함량은 chloroform과 ethylacetate를 각각 투여한 군에서, GST 활성은 hexane과 chloroform을 각각 투여한 군에서 $CCl_4$단독 투여군과 비교하여 유의적인 증가(p<0.05)를 나타내었다. 따라서 본 실험 결과 지구자나무 분획물이 $CCl_4$로 유발된 흰쥐의 간 손상에 미치는 영향을 검토한 결과, chlornform 분획물이 간세포의 괴사와 변성에 지표가 되는 ALT와 AST 활성도의 저하효과와 간 손상에 따른 과산화 지질 함량과 SOD, Catalase, GSH-Px등의 활성 감소, glutathione함량 및 GST활성의 증가를 나타내어 생채내의 free radical에 의한 간보호 작용이 있는 생리활성 물질을 함유하고 있음이 추정되며, 아울러 이 분획물을 더욱 분리하여 물질의 구조와 반응 기전 제시와 함께 간 손상의 예방 및 치료에 도움이 될 수 있는 물질을 개발할 가치가 있다고 사료된다
벼 가공공정의 부산물인 왕겨를 당뇨병 환자의 혈당상승을 억제하는 식품소재로 응용할 가능성을 검토하기 위하여, 왕겨 ethanol 추출물의 쥐 소장 점막의 ${\alpha}-glucosidase$에 대한 저해효과와, 저해성분의 정제에 관하여 연구하였다. 왕겨 ethanol 추출물은 0.8 mg/mL의 농도에서 6 mM p-nitrophenyl ${\alpha}-D-glucopyranoside$를 기질로 한 쥐소장 점막 1.4 mU/mL ${\alpha}-glucosidase$에 의한 효소반응을 30% 저해하였다. Ethanol 추출물을 n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, 물로 분획하였을 때 ethyl acetate 분획물의 ${\alpha}-glucosidase$에 대한 저해활성은 ethanol 추출물의 경우와 같은 조건에서 65%로서, 다른 네 분획물보다 높았다. Ethanol 추출물이 ${\alpha}-glucosidase$ 반응을 50% 저해하는 농도$(IC_{50})$는 162 mg/mL 인데 비하여, ethyl acetate 분획물의 $(IC_{50})$은 0.14 mg/mL 이었다. Ethyl acetate 분획물을 silica gel column chromatography에 의하여 분획하였을 때 chloroform : methanol=90 : 10 분획물의 ${\alpha}-glucosidase$에 대한 저해율은 90%이었으며, 이는 ethyl acetate 분획물의 저해율 65%에 비하여 증가한 것이다. Chloroform : methanol=90 : 10 분획물을 Sephadex LH-20 column chromatography에 의하여 분획하였을 때 중간 정도의 시간에서 용출된 분획물의 저해율은 ethanol 추출물과 같은 조건에서 88%이었다.
To find new inhibitory effects from oriental drugs, Albizziae root was extracted in methanol and the extracted was stepwisely fractionated by hexane, chloroform, ethylacetate, butanol and water. In cytotoxic effect of Albizziae root fractions against cancer cell lines including human hepatoma cells(HepG2) were investigated. Expecially the butanol fraction exhibited a inhibition effects on the growth of human hepatoma cells(HepG2). It inhibited of HepG2 cells with the value of IC50. The activities of qutathione after B(a)P treatment were markedly decreased than control, but those levels were increased by the treatment of Albizziae root methanol fraction. The activity of glutathione-S-transferase after B(a)P treatment were markedly decreased than control, but those levels were increased by the treatment of Albizziae root methanol traction. Induction of phase II enzymes is a major mechanism of chemoprevention. The induction levels of quinone reductase(QR) activity in cultured murine hepatoma(Hepa IcIc7)cell by methanol extract of Albizziae root were measured. Among the tested tractions, the extracts of butanol were found to induce QR activities over 2.8 fold than control. These results suggest that Albizziae root has chemopreventive Potential by inducing QR activities and GST levels and increasing GSH
국내산 곡류의 에탄올 및 메탄올 추출물로부터 콜레스테롤 생합성계에서 가장 중요한 율속효소로 알려져 있는 HMG-CoA reductase 저해활성을 검색하였다. HMG-CoA reductase activity 측정용 효소원은 cholestyramin을 급여하여 사육 한 후 밤 12시경에 간율 적출하여 얻어진 microsome을 freeze-thaw방법으로 조제하였고 효소활성은 spectrophotometric assay로 측정하였다. 그 결과 각 시료 추출물을 $100{\;}{\mu}g/assay$ 되게 첨가한 경우 HMG-CoA reductase 억제활성은 에탄올 추출물에서는 수수가 가장 높은 활성을 보였고 다음은 흑임자였으며 나머지는 활성이 미미하거나 전혀 없는 것으로 나타났다. 메탄올 추출물에서는 기장이 가장 높은 활성을 나타내었고 다음은 수수였으며 그 다음은 메밀, 흑미의 순으로 나타났다. 또한 추출물에서 높은 억제활성을 나타내었던 수수와 기장 메탄올 추출물을 각종 용매로 분획하여 활성을 검토한 결과 수수와 기장 모두 헥산 획분에서 가장 높은 활성을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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