Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2000.05a
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pp.96-97
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2000
최근 기능성 생리활성물질로서 각광을 받고있는 chitooligosaccharide의 제조방법은 염산, 황산 등을 이용한 화학적 분해법과 효소를 이용하는 생물학적 방법을 들 수 있다. 화학적 분해법은 비용을 적게들여 쉽게 저분자 올리고당을 만들 수 있으나, 올리고당의 수율이 낮고 저중합도의 올리고당이 많이 생성되며, 원료의 불안전성으로 인해 인체에 유해한 부반응 물질을 생성시키는 문제점이 보고되고 있다(Choi. et al.,1997). (중략)
The purified endochitosanase(Mw 41 kDa) from bacterium Bacillus cereus D-11 hydrolyzed chitooligomers $(GlcN)_{5-7}$ into chitobiose, chitotriose, and chitotetraose as the final products. The minimal size of the oligosaccharides for enzymatic hydrolysis was a pentamer. To further investigate the cleavage pattern of this enzyme, chitooligosaccharide alcohols were prepared as substrates and the end products of hydrolysis were analyzed by TLC and HPLC. The chitosanase split $(GlcN)_4GlcNOH$ into $(GlcN)_3+(GlcN)_1GlcNOH$, and $(GlcN)_5GIcNOH$ into $(GlcN)_4+(GlcN)_1GlcNOH$ and $(GlcN)_3+(GlcN)_2GlcNOH$. The heptamer $(GlcN)_6GlcNOH$ was split into $(GlcN)_5$ [thereafter hydrolyzed again into $(GlcN_3+(GlcN)2]+(GlcN)_1GlcNOH$, $(GlcN)_4+(GlcN)_2GlcNOH$, and $(GlcN)_3+(GlcN)_3GlcNOH$, whereas $(GlcN)_{1-3}GlcNOH$ was not hydrolyzed. The monomers GlcN and GIcNOH were never detected from the enzyme reaction. These results suggest that D-11 chitosanase recognizes three glucosamine residues in the minus position and simultaneously two residues in the plus position from the cleavage point.
Hayashi, Y.;Yamada, S.;Ohara, N.;Kim, S-K.;Ikeda, T.;Yanagiguchi, K.;Matsunaga, T.
Proceedings of the KACD Conference
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2003.11a
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pp.545-545
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2003
Chitosan is applied as a dressing for oral mucous wound and a tampon following radical treatment of maxillary sinus. Furthermore, it is being investigated as an absorbing membrane for endodontic and periodontic surgeries. A few studies have reported osteoconduction and osteogenesia at the site of chitosan implant in vivo. However, compared with soft tissue healing processes, the mechanisms concerning effects of chitosan for biological mineralization have not yet been resoil In the present study, we studied the gene expression pattern using cDNA microarray and RT-PCR analyses in hard tissue forming osteoblasts cultured with water-soluble and low molecular weight chitooligosaccharide. cDNA microarray analysis revealed that 16 genes were expressed at 〉1.5-fold higher signal ratio levels in the experimental group compared with the control group after 3 days. RT-PCR analysis showed that chitosan oligomer induced an increase in the expression of two genes, CD56 antigen and tissue-type plasminogen activator. Furthermore, the expression of mRNAs for BMP-2 was almost identical in the experimental and control groups after 3 days of culture, but slightly increased after 7 days of culture with chitosan oligomer. These results suggest that a super-low concentration of chitooligosaccharide could modulate the activity of osteoblastic cells through mRNA levels and that the genes concerning cell proliferation and differentiation can be controlled by water-soluble chitosan.
A bacterial strain producing extracellular chitosanase was isolated from crab shells and identified as a member of the genus Aureobacterium The production of chitosanase was proportionally related to the microbial growth, induced by the presence of chitosan, and repressed by glucose at 0.5% (w/v) concentration or higher. The optimal culture conditions for the production of chitosase were 3$0^{\circ}C$ and pH 7.0. Among the nitrogen sources tested, incubation with 0.25% (w/v) concentrations of tryptone and casitione showed the best production of chitosanase. The chitosanase of Aureobacterium sp. YL produced chitobiose as a major product and glucosamine, chitotriose, chitotetraose, and chitopentaose as minor products from chitosan.
Chitinase (EC 3.2.1.14) was isolated from the culture filtrate of Streptomyces sp. M-20 and purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose ion-exchange chromatography, and Sephadex G-100 gel filtration. No exochitinase activity was found in the culture filtrate. The molecular mass of the purified chitinase was 20 kDa, estimated by a sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and was confirmed by activity staining with Calcofluor White M2R. Chitinase was optimally active at pH of 5.0 and at $30^{\circ}C$. The enzyme was stable from pH 4 to 8, and up to $40^{\circ}C$. Among the metals and inhibitors that were tested, the $Hg^+$, $Hg^{2+}$, and p-chloromercuribenzoic acid completely inhibited the enzyme activity. The chitinase activity was high on colloidal chitin, chitotriose, and chitooligosaccharide. The purified chitinase showed antifungal activity against Botrytis cinerea, and lysozyme activity against the cell wall of Botrytis cinerea.
Park, Pyo-Jam;Je, Jae-Young;Byun, Hee-Guk;Moon, Sung-Hoon;Kim, Se-Kwon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.2
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pp.317-323
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2004
This study was performed to investigate the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides against three Gram-negative bacteria and five Gram-positive bacteria. Nine classes of hetero-chitosan oligosaccharides consisted of partially deacetylated chitosans; 90%, 75%, and 50% deacetylated chitosans. Based on molecular weight, they were prepared using an ultrafiltration membrane reactor system. Seventy-five percent deacetylated chitosan showed the highest antimicrobial acitivity as compared with the 90% and 50% deacetylated chitosan, and the activity was dependent on their molecular weights. It was apparent that the growth of Gram-negative bacteria is less inhibited in the presence of the heterochitosans and their oligosaccharides than Gram-positive bacteria. These results revealed that the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides depend on the degree of deacetylation, and their molecular weights.
This study was performed to investigate the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides on the halophilic bacterium, Vibrio parahaemolyticus. Nine classes of hetero-chitosan oligosaccharides were prepared based on their molecular weights, using an ultrafiltration membrane reactor system with chitosanase and celluase, from partially different deacetylated chitosans, 90%, 75%, and 50% deacetylated chitosan, respectively. Thirty-two strains of V. parahaemolyticus were isolated from various marine organisms such as shellfish, shrimps, octopus, and seabirds. Seventy-five percent deacetylated chitosan showed the highest antimicrobial acitivity. The minimal inhibitory concentration (MIC) was 0.5 mg/ml on 14 strains of V. parahaemolyticus, and MIC of the rest strains (18 strains) was 1.0 mg/ml. In addition, MIC of most hetero-chitosan oligosaccharides was 8.0 mg/ml. The results revealed that the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides against V. parahaemolyticus depend on the degree of deacetylation, their molecular weights, and strains tested.
The development of functional foods started booming from several years ago in the world. The size of functional materials are in the range of micrometer level. This size can be much smaller into nanometer level to be more effective. We face some problems from the materials, such as flavor, taste, color, viscosity, etc. in functional materials. The problems can be solved by micro / nanoencapsulation technique. This paper showed some results of the research related on the technique for functional milks and dairy products. The nono / microcapsules are the form of liquid instead of solid. Coating materials used were fatty acid esters, and core materials were lactase, iron, ascorbic acid. isoflavone, and chitooligosaccharide. The ranges of capsules are from 100 nm to 200 ${\mu}$m. The sample milks added nano/microcapsules were homogeneous and prevented the defects of core materials. It was observed that nano / microcapsules in milk and dairy products were effective as functional material without defaults. It was indicated that targeted functional foods can be developed further in various foods by nanotechnology.
Benign prostatic hyperplasia (BPH) is one of the common disease in elderly men. Recently old-age population is increased and we are growing more and more interested in clinical importance of BPH. In this study, the effect of PLX, which was the mixture of tomato extract (including 2% of lycopene) and chitooligosaccharide, on prostatic cancer cell and testosterone-induced BPH in adult rats of the Sprague Dawley strain was determined. The cell viability was evaluated by MTT method using L929 and LNCaP cell line, pretreated with various concentrations of PLX. The expression of prostatic specific antigen (PSA) and 5${\alpha$}$-reductase genes were evaluated by realtime PCR using LNCaP cell line and compared various concentrations of PLX with 50 ${\mu}$M of finasteride. An experimental prostatic hyperplasia was induced in male Sprague Dawley rats by giving testosterone for 8 weeks. After 2 weeks from start of giving testosterone, PLX and finasteride were administered orally once a day. The results were analyzed with prostate weight per body weight at 8 weeks. Cell viability of L929 cell line decreased specifically at the concentration of 2000 ${\mu}$g/mf of PLX. The cytotoxicity of PLX to the LNCaP cell line was shown at above 500 ${\mu}$g/ml of PLX. The inhibitory effect of PLX to the expression of PSA and 5${\alpha$}$-reductase genes in LNCaP cell line increased with the concentration of PLX. In vivo study, the results of PLX and finasteride administered group were 3.75${\pm}$0.60 and 3.49${\pm}$0.49 prostate weight ${\times}10^3$/body weight, which were lower than the result of BPH induced group (4.74${\pm}$0.58). These results suggested that PLX may be an effective material in BPH by having the role of the 5a-reductase inhibitor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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