• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권6호
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• pp.633-639
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• 1990

Cellulase 복합체와 xylanase를 동시에 분비하는 Pseudomonas sp. LBC 505와 CYC 10의 cellulase 유전자를 pUC19를 사용하여 E.coli에 클로닝시켰다. Congo red 염색시 노란색 환을 형성하는 대장균 형질전환에서 7.0Kb-와 4.6Kb-HindIII 단편을 함유한 재조합 플라스미드 pLC1과 pLC2를 가각 분리하였다. DNA hybridization 실험에서 pLC1 과 pLC2는 Pseudomonas sp. LBC 505와 CYC 10 유래임이 각각 밝혀졌고, Immunoassay 실험에서도 유사성이 인정되었다. pLC1을 함유하고 있는 대장균은 cellulas의 24를 세포외로 분비하였고, 효소활성은 모균주에 비해 1.4배 증가하였다. pLC1과 pLC2의 효소학적 성질도 모균주와 동일하였으며, 기질특이성과 HPLC로 유리당을 분석한 결과, 클로닝된 유전자는 endo type인 것으로 나타났다.

• 대한가정학회지
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• 제39권4호
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• pp.49-59
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• 2001

Natural red and yellow dyestuff was extracted from safflower (Carthamus tinctorius Linnaeus) by a new process of cellulase extraction compared with the conventional hot water extraction. Dyestuffs were extracted from safflower easily and repeatedly by means of cellulose as safflower cell wall destroyer. It means that new dyestuff extraction by cellulase improves not only yields of dyestuff from safflower successfully but also the rate of repetition of extraction. From the above experiments, the conclusions of this study were summarized as follows. 1. The optimum conditions of dyestuff extraction from safflower by general extraction method were that the solvent was the water of pH 6.0 on yellow dyestuff and 3% $K_2CO_3$ solution on red dyestuff, extraction temperature was $55^{\circ}C$, and extraction time was 30 min. 2. Among various cellulase, the NOVO cellulase was the best cell wall destroyer of safflower and finally produced the largest amount of dyestuff from safflower by cellulase extraction method. 3. The optimum conditions of dyestuff extraction by cellulase extraction method were conducted on 10 unit of cellulase per gram of safflower at $100m{\ell}$ water of pH 5.0 at $50^{\circ}C$ for 30 min.

• 한국의류학회지
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• 제22권8호
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• pp.1032-1042
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• 1998

The purpose of this study is to measure, compare, and investigate the physical properties of rayon/cotton blend fabrics treated with cellulase and cellulase & specific degeneration silicon and to present basic data which is in development a value-added fabric. The results are as follows. The condition for the treatment of cellulase was at 55$^{\circ}C$, pH 4 and the weight loss increased as the concentration of cellulase and the treated time increased. On treatment with cellulase, the crossectional view & longitudinal view of fiber noticed remarkable crack as weight loss increased and tensile strength and elongation decreased, and pilling was enhanced remarkably. KOSHI was increased, NUMERI and FUKURAMI were decreased as weight loss increased. In the basic characteristic value of clothing wearning, shape stability and drapability were decreased, but air content was improved. On treatment with cellulase & silicon, the degree of damage in the crossectional view & longitudinal view of the fiber reduced. Tensile strength, elongation, moisture regain improved. KOSHI and FUKURAMI were reduced, NUMERI was improved rather than when it was treated with cellulase. Therefore handle was improved. In the basic characteristic value of the clothing wearing, shape stability, air content, drapability were improved.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제47권6호
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• pp.751-760
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• 2019

Cellulase is an eco-friendly biocatalyst, and its demand is growing in many industrial applications such as food, textile, paper, and bioenergy. Strains with a high cellulase activities are the starting point for the economic production of cellulase. In a previous study, Acanthophysium sp. KMF001 with high cellulase production ability was selected among 54 wood-rotting fungi. In this study, we evaluated the cellulase productivity of Acanthophysium sp. KMF001 quantitatively and analyzed its taxonomic location using a genetic method. Acanthophysium sp. KMF001 showed high cellulase productivity similar to that of Acanthophysium bisporum and was much better than A. bisporum in specific enzyme activity. The 28S rRNA sequence of Acanthophysium sp. KMF001 was similar to that of Acanthophysium lividocaeruleum MB1825, with 98.40% homology. Phylogenetic analysis suggested that Acanthophysium sp. KMF001 is a new strain. In this study, we propose a new strain with high cellulase productivity.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권4호
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• pp.311-317
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• 2006

식물생육을 촉진하고 고추역병균을 방제하는 다기능 PGPR 균주 Bacillus subtilis AH18 항진균성 cellulase 유전자를 PCR을 이용해 pUC18과 재조합 후 E. coli DH5$\alpha$에 cloning하여 E. coli내에 발현시켰으며, 그 형질전환 균주를 E. coli DH5$\alpha$(pCM 41)이라 명명하였고, 발현된 cellulase를 ce/H라 하였다. E. coli DH5$\alpha$(pCM 41)의 inset 부위는 B. subtilis AH18의 1,582 bp 유전자를 포함하며 cellulase의 유전자는 1,524 bp로 508개의 amino acid가 암호화된 것으로 추정되었고, CMC를 함유한 SDS-PAGE의 방법으로 약 55 kDa의 분자량을 확인하였다. B. subtilis AH18이 가지는 ce/H는 3종의 대표적인 Bacillus spp.들의 cellulase 유전자의 DNA와 아미노산 배열이 98% 이상 유사하였으며, CMC(carboxymethyl-cellulose) 뿐만 아니라, 불용성 섬유소인 Avicel, filter paper(Whatman No. 1) 특히 고추역병균인 Phytophthora capsici의 건조 cell wall도 분해하였다. 또한 colH의 cellulase는 $50^{\circ}C$에서 효소활성이 가장 높았으며, 최적 pH는 pH 6.0이었다. 그리고 $AgNO_3$ 또는 $CoCl_2$ 첨가시 활성이 1.7배, 2배 정도 증가하였고 $HgC1_2$ 첨가시는 활성이 20%까지 떨어졌다. 또한 여러 화학 저해제들 중 Sodium azide 또는 Hydroxy urea는 효소 활성을 증가시켰으며, CDTA 또는 EDIA는 섬유소분해능을 감소시켰다. 이들의 결과는 고추역병균 P. capsici의 생육을 억제하는 B. subtilis AM18의 진균세포벽 용해성 cellula의 효소학적 특성을 구명한 것이라고 할 수 있다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제21권3호
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• pp.442-450
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• 2014

수집한 장류 시료에서 분리한 균주들을 CMC를 함유하는 배지에 접종하여 섬유소 분해 활성이 우수한 4-1 균주를 선발하였다. 4-1 균주의 16S rRNA 염기서열을 분석한 결과, B. subtilis로 동정되었다. B. subtilis 4-1의 효소생산을 위한 최적 배양조건은 탄소원으로 1.0% soluble starch와 질소원으로 0.1% yeast extract를 첨가하여 $45^{\circ}C$에서 24시간 배양하였을 때로 나타났다. 최적 배양 pH를 조사한 결과, pH 5.0~9.0에서 cellulase 효소활성이 높았다. B. subtilis 4-1의 조효소 특성은 효소반응의 최적 pH가 pH 9.0, 반응온도는 $60^{\circ}C$에서 효소활성이 가장 높았으며, $20{\sim}90^{\circ}C$ 온도에서 60분간 열처리시 효소 활성이 80%이상 유지되었다. 따라서 B. subtilis 4-1에 의해 생산되는 cellulase는 내알칼리성 효소로 추정되며, 높은 열에도 안정한 것으로 나타났다. B. subtilis 4-1이 생산하는 cellulase는 CMC에 가장 높은 효소활성을 나타내었으며 avicel과 pNPG에서도 활성을 보여 복합효소로 생각된다.

• 한국키틴키토산학회지
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• 제23권4호
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• pp.228-233
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• 2018

삼림 토양 시료를 이용하여 cellulase 생산균주를 단리한 결과, Carboxymethylcellulose (CM-cellulose)를 기질로 첨가한 고체배지상에서 명확한 활성환을 형성하는 총 6종류의 cellulase 생산균주를 단리하여, 단리한 균주 유래의 16S rDNA유전자 염기서열 분석을 통하여 균주 동정을 진행하였다. 그 결과 본 연구에서 단리된 균주는 Bacillus subtilis 4종류, Bacillus amyloliquefaciens 1종류, Bacillus cereus 1종류로 동정되었다. 이 중에서 CM-cellulose에 대한 가장 높은 cellulase 활성을 보이는 Bacillus subtilis를 선정하여 Bacillus subtilis NSC로 명명하였다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase는 균주 배양 36~48시간에서 가장 높은 cellulase 생산성을 보였으며, 최적 pH 및 온도를 검토한 결과, 본 균주 유래 cellulase는 pH 5.0과 $40^{\circ}C$에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었다. 그리고, pH 4.0~5.0 조건에서 30분간 효소처리를 하여도 효소활성의 감소가 없었으며, $40^{\circ}C$까지는 30분간의 열처리에도 효소활성의 저하 없이 안정한 특성을 보였다. CM-cellulose, Alkali swollen cellulose, Sigmacell-cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel을 기질로 기질 특이성을 한 결과 CM-cellulose에 대하여 가장 높은 효소 활성을 나타내었으며, cellulose 결정구조를 보유하고 있지않는 CM-cellulose와 Alkali swollen cellulose에 대해서는 명확한 효소활성을 보였다. 하지만, cellulose 결정구조를 보유하고 있는 Sigmacell Cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel 기질에 대해서는 CM-cellulose 활성의 각각 8%, 8%, 그리고 4%의 매우 낮은 효소활성을 나타내었다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase의 0.26 U/ml 조효소액과 0.52 U/ml 조효소액을 이용하여 CM-cellulose의 분해 특성을 검토하였을 때 두 조효소액 모두 반응 CM-cellulose에 대해 반응 120분 후에 0.43 U/ml와 0.76 U/ml의 효소 활성을 나타내었다.

• 생명과학회지
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• 제23권11호
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• pp.1365-1370
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• 2013

약 염기성 이온교환 수지에 cellulase를 고정화하였고 고정화 cellulase는 흡착 특성이 Langmuir 흡착 등온선을 잘 따랐다. pH와 온도에 대한 효소 활성은 고정화 효소가 우수한 특성을 보였다. 열에 대한 효소 활성은 1차식으로 감소하였고 고정화 효소가 자유 효소에 비해 열 안정성이 우수하였다. 초기 속도법을 통해서 자유 효소와 고정화 효소의 Michaelis-Menten 속도 상수를 결정하였고 속도상수 Km은 고정화 효소가 큰 값을 나타내었다. 충진층 반응기에서 셀룰로스의 전환 공정을 재순환에 의해 측정하였다. 투입되는 셀룰로스의 유량 변화에 대한 셀룰로스의 변환을 연속 공정에서 조사하였다. 장기 운전의 성능을 평가하기 위해 7일 통한 연속공정을 실시하였고 고정화 효소는 48%의 활성을 유지하였다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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• pp.347-350
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• 2000

Enzymatic deinking of office-waste paper was studied using crude cellulase and papain-hydrolyzed cellulase from Trichoderma reesei Rut C-30 in small-scale and mid-scale. The results were compared with deinkings using commercial enzyme(Novozym 342) and conventional chemical methods. Maximum brightness and freeness were obtained at 3 units/g Oven Dry Paper(ODP) of CMCase activity using crude cellulase in mid-scale deinking experiments. The deinked pulp had higher physical strength and brightness, and lower freeness and yield than the pulp deinked in small scale. In small scale deinking, maximum brightness and freeness were obtained at 2 unit/g ODP. Deinking by papain-hydrolyzed cellulase showed similar results with one by Novozym 342. It was better in brightness and freeness, but showed lower physical strength and yield, than the conventional deinking by sodium hydroxide. The ratio of endo-1,4-glucanase and exo-1,4-glucanase components in papain hydrolyzed cellulase from T. reesei Rut C-30 was similar to that of commercial enzyme, Novozym 342, implicating a successful application as a deinking enzyme.

• 산업기술연구
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• 제29권B호
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• pp.121-125
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• 2009

New cellulase genes, named as CelV2 and CelN1, respectively, were isolated from Erwinia carotovora ATCC15713 and expressed in E. coli. The CelV2 and CelN1 gene were PCR amplified with degenerated primers and PCR products were sequenced and expressed in E. coli. Two new cellulase genes showed 97% homologies with previously reported Erwinia cellulase genes. The recombinant cellulase were purified with Ni-NTA column chromatography and its enzymatic properties were characterized. The optimum temperature of two enzymes were about $50^{\circ}C$ degree and optimum pH were around pH7.0. The newly isolated celluase genes could be used for enhancing substrate range of alcohol-producing bacteria such as Zymomonas mobilis.