The chitosanolytic capabilities of cellulases, glucosidases, proteases and commercial enzymes were evaluated, and effective chitosanolytic cellulases from T. viride, T. reesei and Celluclast, a commercial enzyme from T. reesei were characterized. The reaction of cellulase from T. viride, T. reesei and Celluclast was optimal at pH 5. 0 and $45{\sim}55^{\circ}C$. Max. chitosanolytic activities of cellulases from both T. viride and T. reesei were observed at the enzyme/chitosan ratio=0.1 and chitosan concentration=3.0%. For the possible application of commercial Celluclast to chitosan oligosaccharides production, 3%(w/v) chitosan was reacted with 1%(v/v) Celluclast at pH 5.0 and $55^{\circ}C$. The apparent viscosity decreased by 98% within 30 minutes reaction and Max. contents of 50% EtOH solubles were 70% at 15 hrs reaction. Total reducing sugars were also increased with reaction time and maintained approx. 13.5% after 2hrs reaction. In 15 hrs treated chitosan hydrolyzates, various kinds of chitosan oligosaccharides were produced and contents of chitosan hexamer, known for its antitumor activities, were about 8.0%, about 4 times higher values compared with acid hydrolysis method. The results suggested that chitosan oligosaccharides could be produced with low-cost cellulases from T. reesei.
Aspergillus oryzae is a filamentous fungus classified in the group Aspergillaceae Ascomycetes. It is an important microorganism for industrial production of enzymes and fermented food productions. The genetic transformation system in A. oryzae was used to protoplast mediated transformation with PEG/$CaCl_2$. When the protoplast was used, the regeneration efficiency was decreased and then transformation frequence was also effected. In this study, fungal transformation was carried out by bypassing the protoplast isolation step, changing enzymes, such as hemicellulase and celluclast, and decreasing the culturing time for the increment of the transformation efficiency. 83 transformants/10ug of DNA with hemicellulase were obtained, compared with less than 10 transformants with novozyme234 and celluclast.
The persimmon puree was hydrolyzed with commercial polysaccharide hydrolyzing enzymes, Viscozyme and Celluclast and jam was prepared with the enzyme treated persimmon juice by addition of pectin. The textural characteristics of the jam were studied for the effects of pectin addition and storage temperature. When the persimmon jam was prepared with the enzyme treated juice with addition of pectin(2.2∼3.0%), the hardness of the go] was stabilized at the addition level of more than 2.8% as measured by %sag. The hardness, cohesiveness, adhesiveness, and gumminess were also significantly increased as the amount of pectin addition increased, whereas the cohesiveness and elasticity did not change significantly. The gel prepared with the puree hydrolyzed with Celluclast generally showed higher hardness, gumminess and adhesiveness and less cohesiveness and elasticity than those treated with Viscozyme. Higher temperature (17$^{\circ}C$) caused a significant decrease in most of the textural properties except elasticity. Results of sensory test showed the orange colors was much improved by the Celluclast treatment, while other characteristics such as total acceptability and texture were not significantly different.
Wheat germ, which is rich in nutrients and phytochemicals, is a by-product during the milling process of wheat kernel. In this study, we aimed to increase the amount of bioactive 2,6-dimethoxy-1,4-benzoquinone (2,6-DMBQ) in wheat germ using the cell-wall-degrading enzyme cellulase (Celluclast 1.5L). The amounts of organic acids, free sugars, and 2,6-DMBQ in wheat germ treated with Celluclast 1.5L were evaluated at various reaction times and temperatures. The results of reversed-phase high-performance liquid chromatography of Celluclast 1.5L-treated wheat germ revealed 2,6-DMBQ, four organic acids (tartaric, acetic, lactic, and succinic acids), and three free sugars (sucrose, fructose, and glucose). As reaction time and temperature of the mixture of wheat germ and Celluclast 1.5L increased, the contents of four organic acids, glucose, fructose, and 2,6-DMBQ increased, but that of sucrose decreased. Taken together, these results suggest that Celluclast 1.5L-treated wheat germ containing increased amounts of 2,6-DMBQ serves as a source of functional ingredients in food industry.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.6
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pp.1147-1151
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1997
To develop an onion sauce, reaction conditions of celluclast 1.5L and pectinex on onion were investigated and organoleptic evaluations were carried out. Degree of hydrolysis(D.H) of hydrolysate by a mixture of celluclast 1.5L and pectinex was a higher than that by each enzyme. Hydrolysate by a mixture of celluclast 1.5L and pectinex(1:3v/v) showed 86% of D.H. and total sugar content of the hydrolysate was 54mg/ml. Hydrolysates showed 83~86% of D.H. at reaction temperature of $25^{\circ}C$ to 45$^{\circ}C$. Total sugar content of the hydrolysate was increased with increasing temperature. D.H. and total sugar content of hydrolysate was 76~86% and 51~63mg/ml, respectively, under acidic conditions. D.H. and total sugar content of hydrolysate were also increased with increasing time. Bitterness, sweetness and ordor of roasted pork prepared by adding onion and onion hydrolysate were significantly different(p<0.05), but color and preference between two groups were not significantly different(p<0.05) between two groups. There was no significant difference(p<0.05) in sweetness and bitterness of the roasted pork prepared by adding different amounts of onion hydrolysate, although ordor and preference of the roasted pork were significantly different(p<0.05).
Park, In-Bae;Kim, Seon-Jae;Ma, Seung-Jin;Park, Jeong-Wook;Jung, Soon-Teck
Journal of the Korean Society of Food Culture
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v.20
no.4
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pp.421-425
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2005
The difference on compositions of enzyme extracts which were produced with two kinds of enzyme, celluclast and pectinex, and from sea mustards prepared with two kinds of pretreatments, heating and non-heating treatment, were investigated. The moisture compositions of enzyme extracts from the heating sea mustard were little higher than that of nonheating sea mustard, although the compositions of crude ash and pectin were no significant differences between two kinds of different pretreatment extracts. The supernatant extract ratio was slightly higher level in the heating pretreatment enzyme extracts than non-heating pretreatment extracts and the level of extracts prepared with only celluclast enzyme was higher than using only pectinex and the mixture of two enzymes. The general sensory evaluation value of jelly made from non-heating pretreatment extracts was higher than that from heating pretreatment extracts except on the taste and the texture.
A pretreatment process of cellulose decomposition to a monosaccharide plays an important role in the cellulosic ethanol production using the lignocellulosic biomass. In this study, a cellulosic ethanol was produced by using acidic hydrolysis and enzymatic saccharification process from the lignocellulosic biomass such as rice straw, sawdust, copying paper and newspaper. Three different pretreatment processes were compared; the acidic hydrolysis ($100^{\circ}C$, 1 h) using 10~30 wt% of sulfuric acid, the enzymatic saccharification (30 min) using celluclast ($55^{\circ}C$, pH = 5.0), AMG ($60^{\circ}C$, pH = 4.5), and spirizyme ($60^{\circ}C$, pH = 4.2) and also the hybrid process (enzymatic saccharification after acidic hydrolysis). The yield of cellulosic ethanol conversion with those pretreatment processes were obtained as the following order : hybrid process > acidic hydrolysis > enzymatic saccharification. The optimum fermentation time was proven to be two days in this work. The yield of cellulosic ethanol conversion using celluclast after the acidic hydrolysis with 20 wt% sulfuric acid were obtained as the following order : sawdust > rice straw > copying paper > newspaper when conducting enzymatic saccharification.
The ground persimmon puree was treated with two kinds of commercial polysaccharide hydrolyzing enzymes (Viscozyme and Celluclast) in order to study their effects on the extraction yield, viscosity, color, titratable acidity and sugars. Hydrolysis with Viscozyme which has enzymatic activity of arabinase, cellulase, xylanase, hemicellulase and ${\beta}-glucanase$ significantly increased the extraction yield, L-value and reducing sugar and decreased in viscosity by treatment for 10 min at $50^{\circ}C$. The extraction yield of the juice was increased from 42.7% to 80% by Viscozyme while the Celluclast to 73.3%. On the other hand, the sensory properties of persimmon-like flavor, scarlet and orange color were greatly improved for the juice hydrolyzed with Viscozyme for 60 min.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.10
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pp.1417-1422
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2012
Alkyl glucosides were synthesized using the transglycosylation reaction of Celluclast, the cellulase from Trichoderma reesei, with cellobiose and various alcohols. Glucose as a by-product of the reaction was removed using the immobilized yeast system. Among the alkyl glucoside products, the acceptor products of methanol and ethanol were confirmed as methyl ${\beta}$-D-glucopyranoside and ethyl ${\beta}$-D-glucopyranoside via MALDI-TOF MS and enzymatic analysis. Optimal yields of methyl ${\beta}$-glucoside and ethyl ${\beta}$-glucoside were 65.3% (mol/mol) and 59.0% (mol/mol), respectively, based on cellobiose consumed.
In our previous study, we preliminarily demonstrated that Celluclast and Neutrase extracts exhibited the strongest $H_2O_2$-scavenging activities among five carbohydrases (Viscozyme, Celluclast, Termamyl, Ultraflo and AMG) and five proteases (Kojizyme, Alcalse, Flavourzyme Protamex and Neutrase) extracts. Thus, Celluclast and Neutrase extracts were selected for use in further experiments and were separated into four different molecular weight fractions (<5, 5-10, 10-30 and >30 kDa). Among them, the 5-10 kDa fraction showed the highest $H_2O_2$-scavenging activity. The 5-10 kDa fraction also strongly enhanced cell viability against $H_2O_2$-induced oxidative damage. Furthermore, the fraction reduced the proportion of apoptotic cells induced by $H_2O_2$, as demonstrated by decreased sub-G1 hypodiploid cells and decreased apoptotic body formation by flow cytometry. These results indicated that the 5-10 kDa fraction of the Celluclast and Neutrase extracts from S. coreanum exhibited strong antioxidant activity over $H_2O_2$-mediated cell damage in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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