• 한국응용과학기술학회지
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• 제37권6호
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• pp.1545-1555
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• 2020

In the present study, we investigated the antioxidant activity of Aucklandia lappa Decne (AL). Cell viability was measured in an MTT assay. Antioxidant effects were evaluated based on total polyphenol/flavonoid contents, ABTS radical scavenging activity, DPPH radical scavenging activity, SOD activity, and ROS content. AL was found not to be toxic at concentrations of 1 ㎍/mL, 10 ㎍/mL, and 100 ㎍/mL, respectively. The phenolic content was higher in AL-D than in AL-E, while the flavonoid content was higher in AL-E than in AL-D. AL-E exhibited higher ABTS radical scavenging activity than AL-D, and the EC50 values for BHA were 217.1 ㎍/mL in AL-D and 180.5 ㎍/mL in AL-E. AL-E also showed the highest DPPH radical scavenging activity. EC50 values for BHA were 114.2 ㎍/mL in AL-D and 95.8 ㎍/mL in AL-E. The SOD-like activity of AL-E was higher than that of AL-D. The EC50 values for ascorbic acid were 48.5 ㎍/mL in AL-D and 72.9 ㎍/mL in AL-E, indicating that both AL extracts have a SOD activity higher than that of ascorbic acid. AL-E reduced relatively more ROS than AL-D. With 100 ㎍/mL AL-E, the reduction level was almost similar to that of dexamethasone. Our results demonstrate that AL have antioxidant effects, and we believe that they could be very valuable as raw materials for anti-aging products, based on their antioxidant activity.

• 인간식물환경학회지
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• 제22권1호
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• pp.39-52
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• 2019

To evaluate the protective effect of collagen peptide-coated coffee extract on skin aging, cell viability was measured with a MTT assay using cultured CCD-986sk fibroblasts, and its effect on wrinkles in the skin of hairless mice induced by UVB-irradiation was examined. In addition, its effect on procollagen synthesis and anti-oxidative, and its inhibitory activity against collagenase, elastase, tyrosinase and MMP-1 were analysed. After the 30-minute topical treatment, the animals were exposed to UVB irradiation (60-100 mJ/cm²) for 4 weeks and its intensity increased during the period. Under the experimental conditions set in this study, the skin thickness of hairless mice significantly decreased (11.8-21.3%) compared to the control group. Based on these results, the prolonged oral intake of a collagen peptide mixture with coffee is expected to significantly increase the synthesis of procollagen in dermal fibroblasts, thereby contributing to the alleviation of wrinkling and lowered elasticity due to structural damage to the dermal layer caused by UV. The oral intake of collagen-coated coffee contributes to increasing collagen biosynthesis in a dose-dependent manner and alleviates the symptoms of thickened keratin caused by UV irradiation. However, it did not inhibit the enzymes involved in skin aging, whitening, wrinkle improvement, and antioxidation. Based on the these results, it can be concluded that the intake of collagen peptide-coated coffee extract can be utilized as an alternative material for the prevention or treatment of diseases associated with photoaging.

• 치위생과학회지
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• 제23권4호
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• pp.264-270
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• 2023

Background: Resin-based dental materials release residual monomers or other substances from incomplete polymerization into the oral cavity, thereby causing adverse biological effects on oral tissue. 10-Methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate (10-MDP), an acidic monomer containing dihydrogen phosphate and methacrylate groups, is the most commonly used component of resin-based dental materials, such as restorative composite resins, dentin adhesives, and resin cements. Although previous studies have reported the cytotoxicity and biocompatibility in various cultured cells, the effects of resin monomers on cellular aging have not been reported to date. Therefore, this study aimed to investigate the effects of the resin monomer 10-MDP on cellular senescence and inflamm-aging in vitro. Methods: After stimulation with 10-MDP, MC3T3-E1 osteoblast-like cells were examined for cell viability by WST-8 assay and reactive oxygen species (ROS) production by flow cytometry. The protein and mRNA levels of molecular markers of aging were determined by western blotting and RT-PCR analysis, respectively. Results: Treatment with 0.05 to 1 mM 10-MDP for 24 hours reduced the survival of MC3T3-E1 cells in a concentration-dependent manner. The intracellular ROS levels in the 10-MDP-treated experimental group were significantly higher than those in the control group. 10-MDP at a concentration of 0.1 mM increased p53, p16, and p21 protein levels. Additionally, an aging pattern was observed with blue staining due to intracellular senescence-associated beta-galactosidase activity. Treatment with 10-MDP increased the levels of tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-1β, IL-6 and IL-8, however their expression was decreased by mitogen-activated-protein-kinase (MAPK) inhibitors. Conclusion: Taken together, these results suggest that the exposure of osteoblast-like cells to the dental resin monomer 10-MDP, increases the level of cellular senescence and the inflammatory response is mediated by the MAPK pathway.

• 한국식품과학회지
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• 제42권3호
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• pp.329-334
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• 2010

본 연구에서는 최근 식품이나 농축산물 등에서 빈번하게 검출되고 있는 장관출혈성 대장균인 E. coli O157:H7에 대한 단크론성 항체를 생산하고, 신속 정확하게 검색할 수 있는 간접효소면역분석법을 개발한 후 시료적용가능성을 확인하였다. 먼저 LPS, HKEC 및 FKEC를 E. coli O157:H7의 면역원으로 준비하여 mouse 면역에 사용하였고, 세포융합과 cloning을 실시하여 단클론성 항체를 생산하였으며, 생산된 항체 중 높은 역가를 나타낸 HKEC 4G8-5 항체로 ID-ELISA법을 개발하였다. 개발된 IDELISA법의 최저검출한계는 $10^5\;cell/mL$이었고, S. aureus와 Sal. Typhimurium에 대해서 약간의 반응성을 나타내었지만 E. coli O157:H7에 대해 보다 강한 반응성을 나타내었기 때문에 E. coli O157:H7에 매우 특이적인 분석법인 것으로 확인되었다. 개발된 ID-ELISA법을 이용하여 돼지고기, 소고기, 닭고기 및 새싹채소에 대한 검출률 향상을 위해 각 시료를 증균한 결과, 3종의 육류와 새싹채소는 각각 증균 6시간과 2시간부터 검출이 가능한 것으로 나타나 기존의 증균법보다 신속하게 시료 속 E. coli O157:H7을 분석할 수 있을 것으로 판단된다. 따라서 본 연구에서 개발된 IDELISA법을 적용하여 농축산물 중에 존재하는 E. coli O157:H7을 분석한다면 보다 신속하고 간편하게 분석할 수 있을 것으로 판단된다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제46권5호
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• pp.636-644
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• 1999

연구배경 : 종양괴사인자(tumor necrosis factor ; TNF)는 다양한 생물학적 기능을 가지고 있는바, 그 중 생체 외에서 증명된 뚜렷한 항암 효과로 말미암아 최근 항암유전자요법의 중요한 대상으로 관심을 모으고 있다. 그러나 TNF의 세포독성의 기전에 대해서는 확실히 밝혀진 바가 없고 반응성 산소기가 관여할 것임을 시사하는 연구들이 있었으나, 항산화제에 의해서 TNF의 세포독성이 감소되는 지에 대해서는 상충되는 결과가 있었다. 본 연구는 TNF의 세포독성의 기전에서 반응성 산소기의 역할을 알아보기 위해 TNF 감수성 종양세포에 여러 가지 항산화제를 전처치한 후의 TNF 세포독성이 감소하는 지를 대조군과 비교하였다. 방 법 : TNF에 비교적 감수성을 보이는 세포주인 WEHI164(murine fibrosarcoma cell line)와 ME180(human cervix cancer cell line)을 배양하여 각각 3가지 항산화제로 전처치한 것과 대조군을 TNF 10ng/ml로 세포독성을 유도하고 그 정도를 MTT(dimethylthiazolyl-diphenyltetrazolium bromide) assay를 이용하여 세포독성 정도를 측정 비교하였다. 결 과 : 항산화제를 전처치하지 않은 대조군에서는 WEHI164 세포와 ME180 세포가 각각 $92.2{\pm}2.8%$와 $59.9{\pm}7.0%$의 세포독성을 보였고, TMTU를 전처지한 군은 각각 $91.4{\pm}3.7%$와 $74.6{\pm}7.0%$, PMZ을 전처치한 군은 $90.2{\pm}2.5%$와 $62.5{\pm}5.7%$, BHT을 전처치한 군은 $93.2{\pm}1.3%$와 $66.3{\pm}6.1%$로 세포독성의 유의한 감소는 없었다. 결 론 : 종양세포에 대한 TNF의 세포독성은 항산화제에 의해 감소되지 않으며 따라서 TNF의 세포독성은 반응성 산소기에 의한 것이 주된 기전은 아니라고 판단된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제45권11호
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• pp.1552-1563
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• 2016

본 연구는 양파의 불쾌치를 저감화시킨 무취음료와 양파 과피 추출물을 첨가한 생리활성 성분 강화음료의 $H_2O_2$로 유도된 산화적 스트레스에 대한 뇌신경세포 보호 효과와 $A{\beta}$로 유도된 인지기능 장애 동물모델에서의 개선 효과를 검증하고자 수행되었다. 뇌신경세포 보호 효과에서는 상대적으로 강화음료에서 무취음료 대비 우수한 산화적 스트레스 억제효과 및 생존율을 나타내었다. $A{\beta}$로 유도된 인지기능 장애 동물모델에 있어 Y-maze, passive avoidance 및 Morris water maze test에서 강화음료가 상대적으로 우수한 학습 및 기억력 개선 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 마우스의 뇌 조직에서 강화음료 그룹은 AChE 활성을 저해하고, 신경전달물질인 ACh의 함량을 증가시킴으로써 $A{\beta}$로 유도된 cholinergic system 장애에 있어 개선 효과를 나타내었다. 또한, 마우스 뇌에서 SOD 함량의 증가, oxidized GSH/total GSH와 MDA 함량을 감소시킴으로써 $A{\beta}$와 같은 산화적 스트레스 인자에 대한 뛰어난 항산화 효과를 나타내었다. 최종적으로 무취음료와 강화음료의 주요성분들을 Q-TOF UPLC/MS system을 통하여 분석한 결과, 강화음료의 경우 무취음료보다 생리활성을 가진 2개의 steroidal saponin과 6개의 phenolic 화합물 등이 추가 검출되었다. 이러한 결과들을 종합해볼 때 강화음료는 상대적으로 protocatechuic acid와 quercetin 같은 강력한 항산화 효과를 나타내는 phenolic 화합물과 steroidal saponin 계열에 의한 우수한 인지기능 개선 효과를 기반으로 한 고부가가치 식품으로 활용될 수 있는 산업적 가능성이 있다고 판단된다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제37권sup2호
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• pp.427-445
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• 2007

임플란트와 골 사이의 결합력을 증가시키기 위하여 타이타늄 표면에 변화를 주기위한 많은 연구들이 진행되고 있다. 타이타늄의 표면 구조나 미세 지지도의 변화가 임플란트에 대한 세포의 반응에 영향을 미치며, 골아 유사세포는 표면 조도가 높은 타이타늄 표면에 더 잘 부착하며, 세포외 기질의 합성과 광물화 결정이 더 잘 일어난다고 알려져 있다. 그러나 대부분의 연구들은 마이크로 단위의 미세 지지도에 대한 연구들이고 나노 단위의 미세 지지도에 대한 연구들은 미미하다. 이에 본 연구에서는 ROS 17/2.8 cell line을 이용하여 기계적 처리만한 군을 대조군으로 하여 blasting 처리한 마이크로 단위의 미세 지지도 표면과 알칼리 처리된 나노 단위의 미세 지지도 표면에 대한 골아 유사세포의 세포 부착양상, 증식 그리고 골아 유사세포의 표식인자 발현양상 등을 상호 비교하여 골아 유사세포에 미치는 영향을 관찰하고자 하였다. SEM을 이용한 미세 지지도 관찰에서 알칼리 처리군에서는 약 200mm의 초미세 다공성의 양상을 나타내었고, blasting 처리한 군에서는 $10\;{\mu}m$ 이하의 움푹 파인 양상을 보였다. 표면조도 측정에 있어서는 blasting 처리한 군에서 기계적 처리와 알칼리 처리된 군보다 더 높은 표면 조도를 보였으며 이는 통계학적으로 유의한 차이를 나타내었다 (p<0.01). 표면결정성 분석에서는 알칼리처리 군에서 anatase와 rutile결정형이 보였으나, blasting 처리한 군과 기계적 처리 군에서는 관찰되지 않았다. 골아 유사세포 1시간 배양 후의 전자현미경 관찰에서 모든 군의 세포는 부착 및 전개 과정을 보였고, 3시간 배양에서는 모든 군의 세포가 더 많이 전개되었으나, blasting 처리한 군과 알칼리처리 군에서 세포가 다소 더 불규칙한 형태를 나타내었다. 24시간 배양에서는 모든 군의 세포에서 완전히 전개가 일어난 양상을 보였다. 1, 4, 7일간 세포배양 후 세포활성을 평가하기 위한 MTT assay에서는 모든 군에서 시간이 증가함에 따라 세포수가 증가하였으며, 1일째에 blasting 처리한 군과 알칼리처리 군에서 기계적 처리 군에 비해 세포활성도가 통계학적으로 유의한 증가를 보였다(p<0.01). 골아 유사세포 표식인자인 osteopontin, alkaline phosphatase, ${\alpha}\;1(1)$ collagen의 유전자 발현양상을 관찰해 본 결과, osteopontin, alkaline phosphatase, ${\alpha}\;1(1)$ collagen의 유전자 발현양상이 세 군 모두에서 유의한 차이는 관찰할 수 없었으나, blasting 처리한 군과 알칼리처리 군에서 기계적 처리 군에 비해 유전자 발현양상이 다소 증가하는 경향을 보였다. 결론적으로 blasting 처리한 마이크로 단위의 미세 지지도 표면과 알칼리 처리된 나노 단위의 미세 지지도 표면이 기계적 처리 군에 비해 골아 유사세포의 기능을 촉진시키나, 알칼리 처리된 나노 단위의 미세 지지도 표면은 blasting 처리한 마이크로 단위의 미세 지지도 표면이 골아 유사세포의 기능에 미치는 영향을 압도하지는 않는 것으로 사료된다.

• 대한한의학방제학회지
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• 제26권3호
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• pp.223-236
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• 2018

Objectives : We compared the inhibitory effects of herb-combined remedies, which were recorded on "Yooam" prescription of Dongeuibogam, on cell migration and invasion, two critical cellular processes that are often deregulated during metastasis, in B16F10 melanoma cells. For this purpose, water extracts of Sipyukmiryukieum (SYMRKU), Danjacheongpitang (DJCPT), Cheongganhaeultang (CGHUT) and Jipaesan (JPS) were used. Methods : Cytotoxicity was assessed by an MTT assay. Wound healing and matrigel transwell assays were used to examine on B16F10 cell migration and invasion. The levels of mRNA and protein expression of matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs) were analyzed by RT-PCR and Western blotting. Results : Our data showed that DJCPT showed the strongest inhibitory effect among the four prescriptions in inhibiting cell motility of B16F10 melanoma cells within the concentration range that was not cytotoxic. The inhibitory potential of colony formation was higher in DJCPT and SYMRKU compared to the other two types of prescriptions, and the inhibitory effect of invasiveness is shown in order of DJCPT, SYMRKU, CGHUT and JPS. DJCPT, and SYMRKU strongly inhibited the activity and expression of MMP-2 and MMP-9, which are important mediators in cancer invasion, compared to CGHUT and JPS, and the increased expression of TIMP-1 and TIMP-2 was also more effective in these two prescriptions. In conclusion, DJCPT is expected to exhibit the most potent blocking effect on migration and invasion among four herb-combined remedies compared in B16F10 melanoma cells. Conclusion : Overall, the results of this study will be used as an important source to validate these prescriptions in animal models and to understand the mechanism of action of herbal remedies recorded in Dongeuibogam.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제33권3호
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• pp.359-372
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• 2003

Among objectives of periodontal therapy. the principal one is the morphological and functional reconstruction of lost periodontal supporting tissues. This includes de novo formation of connective tissue attachment and the regrowth of alveolar bone. The use of enamel matrix derivative(EMD) may be a suitable means of regeneration new periodontal attachment in the infrabony defects. Implant used to replace lost tooth but, implantitis occurred after installation. The purpose of this study was to investigate the effects of EMD on differentiation and growth of osteoblast in titanium disc. Twentyfive millimeter diameter and 1mm thick Ti disc which was coated 25, 50, 100, 200${\mu}g$/ml of EMD(Emdogain(R)) used as experimental group, 25, 50, 100, 200ng/d of rhBMP-2 as positive control group, and no coat as negative control group. A human osteosarcoma cell line Saos-2 was cultured in Ti disc and cell proliferation and Alkaline phosphatase (ALP) activity were measured at 1 and 6 days. PCR was performed at 2 and 8 hours. Semi-quantitative RT-PCR for mRNA expressions of various osteoblastic differentiation markers -type I collagen, ALP, osteopontin, and bone sialoprotein - were performed at appropriate concentrations based upon the results of MTT and ALP assay. Cultured cell-disc complexes were prepared for scanning electron microscopy (SEM) at 2 hour. Data were analyzed using Mann-Whitney and repeated- measures 1-way analysis of variance(SPSS software version 10,SPSS. Chicago. IL). After culture, there was more osteoblast in EMD100${\mu}g$/ml than in EMD50, 200${\mu}g$/ml on day 6. There was significant difference in experimental and positive control group compared control group, as times go by(1 and 6 days). Alkaline phosphatase activity was different significantly in EMD100, 200${\mu}g$/ml and BMP100, 200${\mu}g$/ml on day 6. The results of reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) showed that expression of mRNA for ALPase, collagen type I, osteopontin. hone sialoprotein and BMP-2 was detected at 2 hour and 8 hour in EMI 200${\mu}g$/ml subgroup and BMP100ng/ml subgroup. The results of this study suggest that application of enamel matrix derivative on osteoblast attached to titanium surface facilitate the expression of bone specific protein and the differentiation and growth of osteoblast.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제36권4호
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• pp.1303-1311
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• 2019

본 연구는 열수와 에탄올 용매에 따른 복령 및 산수유 추출물의 농도별로 항산화 활성, 항염증 효과 및 신경세포 보호효과에 미치는 영향을 살펴보고자 진행하였다. 추출물들의 총 polyphenol 함량은 복령 열수 추출물에서 가장 높았고, 복령 에탄올 추출물, 산수유 열수 추출물, 산수유 에탄올 추출물 순으로 유의적으로 감소되는 경향을 나타냈다. DPPH 및 ABTS radical 소거 활성능은 추출물의 농도 의존적으로 증가하였고 산수유 열수 추출물은 모든 추출물에서 항산화 활성이 가장 높게 나타났으며, 복령 열수 추출물은 에탄올 추출물에 비해 높은 활성이 확인되었다. 복령과 산수유에 함유된 총 polyphenol과 항산화 성분을 추출하기 위해서는 에탄올 추출방법 보다는 열수 추출방법이 효과적인 방법이라고 사료된다. LPS로 염증이 유도된 RAW 264.7 세포에서 복령추출물이 산수유 추출물에 비해 NO 생성 억제 효과가 우수한 것으로 확인되었다. MPP⁺에 의해 유도된 SH-SY5Y 신경세포에 복령 열수 추출물은 산수유 열수 추출물에 비해 산화적 스트레스로부터 신경세포 보호효과가 우수하게 나타났다. 복령과 산수유 추출방법에 따른 항산화, 항염 및 산화적 스트레스로부터의 신경세포 보호효과를 갖는 기능성 소재로서 가능성이 있다고 사료된다.