Park, Young-Wook;Min, Bong-Gi;Kim, Ji-Hyuck;Kim, Soung-Min;Lee, Young-Joon;Lee, Sang-Shin;Lee, Suk-Keun;Moon, Huck-Soo;Chi, Je-Geun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권1호
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pp.19-26
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2006
Objective: In order to elucidate the retrogressive degeneration of orofacial cleft, the fissured tissues of prenatal and postnatal cleft lip and palate were examined by histological and immunohistochemical methods. Design: Totally 42 cases of prenatal (n=17) and postnatal (n=25) cleft lip and/or palate were examined in comparison with 10 cases of normal lip and oral mucosa using immunohistochemical stainings of MMP-3, MMP-9, MMP-10, cathepsin G, PCNA, E-cadherin, TGase 2, HSP-70, vWF, and VEGF. Main Outcome Measures: In the fissured tissue the sebaceous glands were strongly positive for PCNA and grew into the underlying fibromuscular tissue (24/42). Some hyperplastic sebaceous glands of prenatal cleft lip produced infundibular follicular cyst (9/17). The skin and mucosal epithelia from the postnatal cleft lip and palate (10/25) showed severe basal hyperplasia (11/25) and melanocyte infiltration (7/25). Results: The immunostaining of MMP-3 and HSP-70 were strongly positive in the hyperplastic sebaceous glands and nearby atrophying muscle bundles of the fissured tissue, while MMP-9, MMP-10, and cathepsin G were almost negative. The immunoreactions of the other antibodies used in this study were similar between in the fissured tissues and in the normal controls. Conclusions: These data suggest that the over-expression of MMP-3 is closely related to the sebaceous gland hyperplasia, epithelial dysplasia, and the muscle degeneration, and that the over-expression of MMP-3 in the fissured tissue may continuously aggravate the cleft condition in the later life.
파골세포의 분화에 대한 시금치 추출물의 영향을 확인하고자 RANKL을 처리한 RAW264.7 세포에서 세포독성, TRAP(+) 다핵세포의 형성, 파골세포 분화 관련 유전자의 발현, 그리고 단백질 발현을 확인하였다. 물과 25, 50, 75 및 100% 에탄올 시금치 추출물의 세포독성을 측정한 결과 모든 추출물들이 $100{\mu}g/mL$ 이하의 농도에서 RAW264.7 세포에 독성을 유발하지 않았다. TRAP 염색을 통해 TRAP(+) 다핵세포의 수와 효소 활성을 측정한 결과 물 추출물을 제외한 모든 추출물이 대조군에 비해 분화 억제 및 효소 활성 저해 효과가 있었다. 특히 $100{\mu}g/mL$ 농도의 100% 에탄올 추출물은 RANKL만 처리한 대조군과 비교해 80%의 유의한 TRAP(+) 다핵세포 숫자 감소와 44%의 TRAP 효소 활성 저해율을 보였다. 시금치 에탄올 추출물은 RANKL에 의한 파골세포 분화의 지표가 되는 관련유전자인 NFAT, c-FOS, cathepsin K 및 TRAP의 발현을 억제하였다. 또한 단백질 수준에서 시금치 에탄올 추출물은 RANKL에 의해 증가된 NFATc1의 발현을 현저히 감소시키는 것으로 확인되었고, 또한 c-FOS의 활성화 형태인 인산화된 c-FOS의 발현뿐만 아니라 인산화되지 않은 비활성의 c-FOS 발현도 감소시켰다. 반면 파골세포의 분화에 직간접적인 영향을 미친다고 알려진 MAPK 중 ERK의 활성에는 거의 영향을 미치지 않는 것으로 보아 시금치 에탄올 추출물은 c-FOS의 활성, 비활성형 전체를 감소시킴으로 파골세포 분화를 감소시키는 것으로 확인되었다.
Objectives : This study was performed to evaluate the effect of CJ(Cuscuta japonica Chois) on osteoclast differentiation and gene expression. Methods : The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand)-stimulated RAW 264.7. The results were summarized as followes. Results : CJ decreased the number of TRAP positive cell in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. CJ decreased the expression of RANK(receptor activator of nuclear factor kappa B), $TNF{\alpha}$, and IL-6 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. CJ decreased the expression of iNOS and COX-2 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. CJ decreased the expression of Cathepsin K in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. Conclusions : It is concluded that CJ might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression.
돼지 백혈구(白血球) Iysoromal enzyme의 latency를 서로 다른 농도의 sucrose용액(0.0125-0.25M)으로서 조사하고 각(各) sedimentation fraction에 분포되어 있는 효소들의 specific activity, pH optima 및 activation energy를 측정하였다.
Objectives : This study was performed to evaluate the effect of Securinega suffructicosa Rehder (SS) on osteoclast differentiation and gene expression. Methods : The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7. The results were summarized as followes. Results : SS decreased the number of TRAP positive cell in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of RANK, TNF${\alpha}$, and IL-6 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of iNOS and COX-2 in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. SS decreased the expression of Cathepsin K in RANKL-stimulated RAW264.7 cell. Conclusions : It is concluded that SS might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression.
In order to compare and study the effects of Kamipalmijiwhang tang(加味八味地黃湯) & Kamigangwhalsokdantang(加味羌活續斷湯) on inhibition of osteoporosis induced by ovariectomy, the author administered Kamipalmijiwhangtang & Kamigangwhalsokdantang to the sample groups per orally before and after ovariectomy. The author observed the activities of cathepsin L, K and the contents of calcium, calcitonin, osteocalcin and phosphorus in the serum for the biochemical index, the contents of IL-6 in the serum and bone marrow for immunological index, the state of bone loss in the metaphysis of tibia by histological study, the expression of ELAM-1 &collagen IV by immunohistochemical analysis, the expression of fos by immunocytochemical analysis. The results were as follows: 1. The activities of cathepsin L, K in the serum had a significant inhibitive effects in all sample groups compared with the control group. The inhibitive effects of Sample A-1 & B-1 was better than those of A-2 & B-2 and the inhibitive effects of sample B-1 & B-2 was better than those of A-1 & A-2. 2. The content changes of IL-6 in the serum and bone marrow had a significant inhibitive effects in all sample groups compared with the control group. The inhibitive effects of sample A-1 & B-1 was better than those of A-2 & B-2 and the inhibitive effects of sample B-1 & B-2 was better than those of A-1 & A-2. 3. In the histological study of tibial metaphysis all the sample groups inhibited bone loss significantly compared with the control group and expressed trabecula shape of bone similar to the normal group. 4. The expression of ELAM-1 & collagen IV decreased a little bit in sample A-2. It also decreased to a similar degree in sample B-2 like normal group and disturbed itself. 5. The expression of fos was inhibited in all sample groups compared with control group. The inhibitive expression of sample B-1 & B-2 was more remarkable than those of A-1. & A-2. 6. The serum calcium had a significant increasing effects in an sample groups compared with control group. Each sample groups didn't have any significant difference. 7. The serum calcitonin had a significant increasing effects in sample A-1, A-2 and B-1 groups compared with control group. Each sample groups didn't have any significant difference. 8. The serum osteocalcin and phosphorus didn't have any significant difference in all sample groups compared with control group.
RAW 264.7과 이것이 분화한 파골세포양 세포에서 파골세포 분화관련유전자의 전체적인 유전자 발현을 조사하기 위해 cDNA array 방법을 사용하였다. 1176 cDNA spot grid가 있는 Mouse Atlas cDNA array 결과를 확인하기 위하여 역전사 효소 중합반응 검사를 시행하였다. cDNA array 결과 6개의 유전자가 2.5% 이상 발현이 증가하였으며(PKC beta II, POMC, PTEN 등), 16개의 유전자가 2.5%이상 발현이 감소하였다(Osteopontin, Cyclin D1, Cathepsin C, PTMA 등). PKC beta II 유전자의 역전사-효소 중합 반응검사결과 이 유전자를 확인할 수 있었다. 파골세포 분화 결과 RAW 264.7세포주에 비해 파골세포양 세포에서 PKC beta II 유전자의 발현이 많았다. 파골세포 분화 관련 유전자는 RAW 264.7 세포주와 이것이 분화된 파골세포양 세포와 차이를 보였고, 이 유전자의 발현증가와 RAW 264.7 세포주의 파골세포 분화와 연관을 보였다.
A cDNA microarray composed of 2,028 different ESTs from two shrimp species, Penaeus monodon and Masupenaeus japonicus, was employed to identify yellow head virus (YHV)-responsive genes in hemocytes of P. monodon. A total of 105 differentially expressed genes were identified and grouped into five different clusters according to their expression patterns. One of these clusters, which comprised five genes including cathepsin L-like cysteine peptidase, hypothetical proteins and unknown genes, was of particular interest because the transcripts increased rapidly ($\leq$ 0.25 hours) and reached high expression levels in response to YHV injection. Microarray data were validated by realtime RT-PCR analyses of selected differentially expressed transcripts. In addition, comparative analysis of the hemocyte transcription levels of three of these genes between surviving and non-surviving shrimp revealed significantly higher expression levels in surviving shrimp.
연구목적: 이 연구는 대황 추출물이 골수 유래 대식세포(BMM)에서 파골세포 분화에 미치는 영향을 조사하는 것을 목적으로 한다. 파골 세포는 골 재흡수 및 재형성에 중요한 역할을 하며, 파골 세포의 조절 장애는 다양한 골 관련 질환을 유발할 수 있다. 잠재적인 항염증 특성을 가진 약용 식물인 대황은 뼈 대사를 조절하는 것으로 제안되었다. 연구방법: 생후 5주령의 C57BL/6 마우스의 대퇴골과 경골에서 BMM을 분리하고 M-CSF(mouse macrophage colony-stimulating factor) 존재하에 3일간 배양한 후 M-CSF와 파골 세포 분화를 유도하기 위한 핵 인자-κB 리간드(RANKL)의 활성화제를 처리하였다. 연구결과: 대황 추출물로 처리하면 BMM에서 파골 세포 분화가 현저하게 억제되었다. 또한 대황 추출물은 파골세포 형성에 필수적인 유전자인 TRAP(tartrate-resistant acid phosphatase) 및 CTSK(cathepsin K)의 mRNA 발현을 억제하였다. 또한 파골세포 분화에 중요한 전사 인자인 활성화된 T 세포 c1(NFATc1)의 핵 인자의 RANKL 유도 발현을 억제하였다. 결론: 이러한 결과는 대황 추출물이 BMMs에서 파골 세포 형성에 억제 효과가 있음을 나타낸다. 따라서 대황 추출물은 비정상적인 파골 세포 활동과 관련된 뼈 관련 질환의 치료를 위한 유망한 치료제이다. 잠재적인 임상 적용을 완전히 이해하기 위해서는 메커니즘에 대한 추가 연구와 탐색이 필요하다.
Marine organism extracts were prepared from 26 species of Korean indigenous marine organisms, including 25 species belonging in class Anthozoa of phylum Cnidaria and a species belonging to subphylum Urochordata of phylum Chordata, and screened their inhibitory effects against ${\mu}$-calpain. As a result, the thirteen extracts were found to be active in the criteria of $IC_{50}$ < 100 ${\mu}g/ml$. Among them, the MeOH extracts of Plexauroides praelonga and Alveopora japonica showed remarkable ${\mu}$-calpain inhibitory activity with $IC_{50}$ values of $4.62{\pm}0.22$ and $4.82{\pm}0.07{\mu}g/ml$, respectively. In addition, chemical investigation of A. japonica led to the isolation of an active compound, hexadecyl tetradecanoate, as a selective cathepsin B inhibitor ($IC_{50}=9.05{\pm}2.45{\mu}M$). This compound was isolated as constituent of A. japonica for the first time in the present study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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