Industrial-scale Ca-fortified Dangmyon was manufactured with added casein phosphopeptides (CPP) to increase Ca adsorption in the intestine. Very low P content in eggshell Ca (egg Ca) and Dangmyon could make it possible to indirectly measure CPP content in Dangmyon. Partitions of the whole P present in Dangmyon were made into sweet potato, egg Ca, and CPP. The CPP content was obtained by multiplying CPP per P by the amount of P partitioned into CPP. It was found that 88.46% of CPP was obtained. However, when milk Ca, which was much higher in P, was added to fortify Dangmyon with CPP, it was found that the CPP content was either under- or over-estimated. Care must be taken when a much higher content of P as a Ca source is selected using this method. It was discovered that the added Ca and CPP were retained after cooking at boiling temperature; therefore, Dangmyon could be an excellent Ca and CPP carrier for humans.
Streptococcus faecalis var. liquefaciens를 calcium alginate gel에 고정화 후 CPP생산 가능성을 실험하였다. 균체를 회수하여 담체에 고정화하는 방법보다는 배양액 전체를 고정화하는 방법이 보다 높은 생산성으로 CPP를 생산하였다. Streptococcus faecalis var. liquefaciens 전세포 고정화 방법에 의한 sodium casenate로부터의 CPP 생산의 최적조건은 bioreactor부피대비 bead사용량이 30%, 반응온도는 $50^{\circ}C$, 반응 pH는 7.0, 기질의 농도는 10% 이었다. 또한, 고정화 균체를 이용한 연속적인 생산은 회분식 반응에서 설정된 최적 조건하에서 20% 수준의 CPP를 최소한 1개월 이상 연속적으로 생산할 수 있었다.
For the production of Casein Phosphopeptide(CPP) inhibiting the insolubility of calcium, 10% sodium caseinate was treated with 1.5% of protease from Streptococcus sp.. Optimal conditions and productivity for the CPP production, and properties of the CPP were compared with tryptic hydrolysates of sodium caseinate. Optimum conditions of pH, temperature and reaction time were 8.0, 50C, 4 hrs, respectively. Under these conditions the productivity of CPP was 23% and Molecular weight of CPP was ranged from 3, 000 to 17, 000. The results also showed that the insolubility of calcium was completely inhibited by using 1.5 times of CPP for the amount of calcium.
유당(乳糖)을 함유(含有)하지 않은 분유식(粉乳食)을 섭취한 흰쥐의 장관내(腸管內)에는 Casein함유식(含有食)을 섭취한 때와 마찬가지로 C.P.P.가 생성(生成)되며 이 C.P.P.에 의해 장관내(腸管內) 칼슘이 증가(增加)되며 소장하부(小腸下部)에서의 칼슘흡수(吸收)가 촉진(促進)되는 것을 밝혔다. 그러나 10% 또는 30% Lactose를 첨가한 경우, 위의 제(諸) 현상(現象)은 보이지 않았다. 이것은 장관내(腸管內)에서의 칼슘의 가용화(可溶化) 및 흡수(吸收)에 대 한 C.P.P의 촉진효과(促進效果)가 유당(乳糖)과는 독립적(獨立的)으로 일어나는 것임을 시사함이다.
Hee Song Kim;Dong Hun Yang;Seok Jun Park;Hye Jin Kim;Hyoung Su Park;Eui-Jong Lee;Mee-Ryung Lee
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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제41권3호
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pp.149-156
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2023
Milk protein is often fractionated/concentrated by using various techniques in dairy industries. Among these techniques, ultrafiltration (UF) is particularly efficient at concentrating the casein fraction of milk protein. The objectives of this study were to produce casein hydrolysates by concentrating the casein fraction in skim milk using the UF technique and to investigate the chemical composition of the casein hydrolysates. The skim milk was concentrated using a UF laboratory test unit equipped with 10 kDa and 30 kDa membranes. After UF, the protein content of the milk was concentrated up to ~7.2% and the Ca was concentrated up to ~196 mg/100 g of milk. Trypsin was then added to the concentrated skim milk to produce the casein hydrolysates. The results of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis showed that the casein fraction was not present after hydrolysis, indicating that casein in the milk had been hydrolyzed. The Ca content in the casein hydrolysates was much higher (p<0.05) compared to Ca content in commercial casein phosphopeptides (CPP) indicating that was acidified during the manufacture of commercial CPP. In conclusion, it seems that casein hydrolysates containing large concentrations of protein and Ca can also be made from concentrated UF milk without acidification or renneting.
본 연구에서는 전국 가정집에서 제조한 김치로부터 분리한 유산균들 중에서 protease 활성 및 CPP 생산 능력이 가장 높은 균주인 strain 0301을 동정하였고 해당 균주의 특성과 CPP 생산 최적 조건을 조사하였다. 0301은 $0.6-0.8{\mu}m$ 크기의 gram 양성 구균이며, 16s rDNA 염기서열 분석 결과 Enterococcus faecalis MG-379로 동정 명명하였다. E. faecalis MG-379 균주를 2% fructose를 첨가하고 pH 6.0인 배지에서 37oC에서 36시간 배양하였을 때 CPP 생산 능력이 최대였으며, ICP를 이용하여 측정한 결과 2227.5 mg/kg으로, 비교 균주인 Enterococcus faecalis KCCM 40450에 비해 약 2배 가량 높은 CPP 생산 능력을 갖는 것으로 나타내었다.
Cheese pizzas fortified with casein phosphopeptide (CPP) and calcium were subjected to an in vitro digestion to assess whether CPP could prevent the precipitation of calcium. The total calcium content of the cheese pizzas was adjusted to 1,000 mg per pizza (~370 g) with the addition of calcium originating from eggshells. Two levels of trypsin-digested caseins (367 and 459 mg), with a CPP content of ~20%, were added to each pizza. The in vitro digested pizzas were then centrifuged and the supernatant was mixed with Na2HPO3 at 37℃ to estimate the possible soluble effect of CPP on calcium. After 24 h of reaction, the solution was centrifuged and the calcium content in the resultant supernatant was analyzed by inductively coupled plasma-atomic emission spectroscopy. One-way statistical analyses showed that CPP had a positive effect on the solubilization of calcium against phosphate (p<0.05). Cheese pizza supplemented with 459 mg of CPP powder was able to prevent precipitation of calcium by 98.8%, whereas no CPP-added cheese pizza solubilized 86.4% of the calcium. A sensory test was also carried out, revealing that panelists could not discern the bitter taste of the CPP added to the pizzas.
많은 연구에서 불소 이온을 이용한 치아우식증의 예방 및 재광화 효과에 대해 밝힌 바 있다. 불소는 치아우식을 예방하고 재광화를 촉진하는 대표적인 성분이다. 하지만 불소를 이용한 재광화는 하부의 탈회 병소를 충분히 광화시키지 못하며 다공성으로 인해 불완전한 광화를 보인다. 또한 그 적용 과정에서 과량이 섭취되었을 경우에 발생할 수 있는 독성도 고려해야 한다. 한편 CPP-ACP(Casein Phosphopeptides-Amorphous Calcium Phosphate)는 초기의 우식병소를 재광화 시키며 우유 단백질인 casein으로부터 추출한 성분으로 섭취되어도 인체에 무해하다. 본 연구의 목적은 APF gel과 CPP-ACP 제제의 재광화 효과를 비교해 보고자 하는 것이다. 본 실험에서는 법랑질 인공우식 병소에 Acidulated Phosphate Fluoride(APF) gel과 CPP-ACP 제제를 각 도포 방법에 따라 적용하였다. 14일 후, 표면미세경도를 측정하고 편광 현미경 하에서 재광화 병소를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 실험 전후 표면미세경도를 측정하여 비교한 결과, 모든 군에서 실험 후에 표면미세경도가 증가하였다(P<0.05). 2. CPP-ACP 제제를 도포한 군에서 불소를 도포한 군에 비해 표면미세경도 증가 폭이 유의하게 컸다(P<0.05). 3. 편광현미경 하에서 관찰한 결과 불소도포 군은 불규칙하고 얇은 재광화 층을, CPP-ACP 제제를 도포한 군은 균일하고 두터운 재광화 층을 보였다.
이 연구는 Casein phosphopeptides-amorphous calcium phosphate (CPP-ACP)paste에 의해 제공되는 Calcium(Ca)과 Phosphorous(P) 이온이 탈회된 법랑질 표면에 적용된 시간에 따라 침투되는 깊이와 Ca/P의 상대적 정량값을 평가하고자 하였다. Field Emission Scanning Electron Microscopy(FE-SEM)와 Energy Dispersive X-ray Spectrometer(EDS)를 이용하여 Ca/P 이온의 정량적 측정으로 탈회된 법랑질 내로의 침투깊이를 계측하였다. 교정치료를 위해 발거된 제 1소구치 치관 협측면의 중앙 1/3부위에 $4{\times}9mm$의 법랑질 window를 제외한 나머지 치관부위는 nail varnish로 도포하여 window 부위의 법랑질만 노출시킨 후, 모든 치아를 0.1M lactic acid로 7일 동안 탈회시켰다. 탈회된 각 치아의 정중앙을 장축에 따라 절단한 후 그 중 4개의 소구치 절편은 10배 희석된 CPP-ACP paste 용액에 각각 1, 2, 3 및 5주 동안 침지시켰고, 나머지 4개의 소구치 절편은 증류수에 동일 기간 침지시켰다. 각 절편을 window에 대해 수직으로 절단하여 건전 법랑질, 탈회된 법랑질 및 재광화된 법랑질의 깊이에 따른 Ca/P의 Spectrum Density Index(SDI)를 FE-SEM과 EDS로 계측하였다. 각 계측치를 Student's t test로 비교 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Ca/P 이온이 법랑질 표면으로부터 약 $1050{\sim}1400{\mu}m$까지 침투하여 탈회 법랑질의 깊이인 $1050{\sim}1350{\mu}m$까지 재 광화되었다. 2. 1주군과 2주군의 재광화된 법랑질의 Ca/P SDI는 건전 법랑질보다 유의성 있게 높았으나(p<0.05), 3주군에서는 건전 법랑질보다 유의하게 낮았고(p<0.05), 5주군은 건전 법랑질과 유의한 차이가 없었다(p>0.05). 3. 모든 재광화된 법랑질 간에 Ca/P의 SDI는 유의한 차이가 없었다(p>0.05).
치아우식증은 치아의 탈회와 재광화가 반복하여 일어나는 동적인 과정으로, 탈회 및 재광화의 속도에 따라 우식이 정지되거나 악화된다. 재광화를 유도하기 위해 불소 제제가 흔히 사용되고 있으나, 개인마다 salivary flow rate이나 타액내 이온 함량 및 타액의 pH 등에 따라 그 효과가 제한될 수 있다. 또한 소아 환자의 경우 과량 섭취로 인한 독성 우려도 배제할 수 없다. 최근 CPP-ACP(Casein Phosphopeptides-Amorphous Calcium Phosphate) 제제를 이용하여 탈회된 법랑질의 재광화를 유도하는 술식이 보고되고 있는 바, 본 증례에서는 법랑질 초기 우식증을 가진 환아에게 국내에서 시판중인 CPP-ACP 제제인 Tooth Mousse를 적용하였다. 제제의 효과를 높이기 위하여 치아미백술 시행시와 동일한 방법으로 제작된 customed tray를 사용하여 매일 도포하도록 하였다. 주기적인 관찰 결과 추가적인 우식의 진행 없이 시술 전과 비교하여 법랑질 병소의 크기가 감소한 양상이 관찰되었다. 발육 장애 증례나 만성적 우식증의 경우에는 그 효과가 크지 않았으나 경도 및 중등도의 초기 우식증을 가진 소아 환자에게 CPP-ACP 제제를 6주간 적용한 결과 치아 삭제 등의 시술 없이 본래 법랑질 밀도를 회복할 수 있었으며 주기적인 점검과 구강위생 교육을 통해 구강 관리 능력을 향상시킬 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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