direct bone apposition during bone remodelling. To address these problem, we developed a new ceramic, calcium metaphosphate(CMP), and report herein the biologic response to CMP in subcutaneous tissue, muscle and bone. Porous CMP blocks were prepared by condensation of anhydrous $Ca(H_2PO_4)_2$ to form non-crystalline $Ca(PO_3)_2$. Macroporous scaffolds were made using a polyurethane sponge method. CMP block possesses a macroporous structure with approximate pore size range of 0.3-1mm. CMP blocks were implanted in 8mm sized calvarial defect, subcutaneous tissue and muscle of 6 Newzealand White rabbits and histologic observation were performed at 4 and 6 weeks later. CMP blocks in subcutaneous tissue and muscle were well adapted without any adverse tissue reaction and resorbed slowly and spontaneously. Histologic observation of calvarial defect at 4 and 6 weeks revealed that CMP matrix were mingled with and directly apposed to new bone without any intervention of fibrous connective tissue. CMP blocks didn't show any adverse tissue reaction and resorbed spontaneously also in calvarial defect. This result revealed that CMP had a high affinity for bone and was very biocompatible. From this preliminary result, it was suggested that CMP was a promising ceramic as a bone substitute and tissue engineering scaffold for bone formation.
Purpose: The aim of this study was to evaluate the bio-durability and bone regeneration capacity of the non-cross-linked collagen membrane in rabbit calvarial defect models. Materials and Methods: Four circular defects with 8 mm diameter were made in each of calvarium of 10 male rabbits. The following groups was randomly assigned to each defect - 1) Control, 2) membrane group containing non-cross-linked collagen membrane only (M), 3) bone graft group (B), 4) bone graft with membrane group (B+M). Animals were sacrificed and samples were harvested at 2 weeks (n=5) and 8 weeks (n=5). Histologic sections were prepared and histomorphometric analysis was performed. Result: Histologic results showed well adaptation of the non-cross-linked membrane on each defect and normal healing response at 2 weeks. At 8 weeks, the membranes were partially biodegraded. Histomorphometrically, B and B+M group showed the significantly greater total augmented area (B+M group, 10.44±1.49, P=0.016; B group, 9.13±0.53, P=0.032) and new bone formation (B+M group, 2.89±0.93, P=0.008; B group, 2.85±1.15, P=0.008) compared to control group. Collapsing of the central portion of the membrane, membrane group showed greater value in new bone formation at 8 weeks (1.78±0.68, P=0.032). Conclusion: Within the limitations of this study, the non-cross-linked collagen membrane fabricated using the improved decellularized method was shown to be effective for the regeneration of calvarial bone defects. In addition, prolonged barrier function might be provided using this collagen membrane.
The purpose of this study was to evaluate the effect of porcine cancellous bone as a scaffold in a rat calvarial defect model. Critical-sized defects were created in 30 male Sprague-Dawley rats. The animals were divided into critical defect (CD, n=10), $\beta$-tricalcium phosphate (TCP) graft (BT, n=10) and porcine cancellous bone graft (PCB, n=10) groups. Each defect was filled with $\beta$-TCP mixed with fibrin glue or porcine cancellous bone powder mixed with fibrin glue. In the CD group, the defect was left empty. All rats were sacrificed at 8 weeks after bone graft surgery, and bone formation was evaluated by gross observation, plain radiography, micro-computed tomography scanning and histological evaluation. Repair of bone defect was the least in the CD group, and significant new bone formation was observed in the PCB group. Grafting of porcine cancellous bone was more efficient for regenerating new bone than grafting $\beta$-TCP.
Heo, Chan Yeong;Lee, Eun Hye;Seo, Seog Jin;Eun, Seok Chan;Chang, Hak;Baek, Rong Min;Minn, Kyeong Won
Archives of Plastic Surgery
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v.35
no.6
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pp.631-636
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2008
Purpose: Adipose tissue-derived stem cells(ADSC) has an osteoconductive potential and demineralized bone matrix(DBM) is an osteoinductive material. A combination of DBM and ADSC wound probably create osteoinductive properties. The purpose of this study is to determine the effect of the combination of DBM and ADSC mixture on healing of rat calvarial defect. Methods: Thirty adult male Sprague-Dawley rats were randomized into 3 groups(n=10) as 1) Control, 2) DBM alone, 3) DBM with ADSC mixture. DBM with ADSC mixture group has had a 3-day preculture of ADSC from groin fat pad. An 6 mm critical size circular calvarial defect was made in each rat. Defect was implanted with DBM alone or DBM with ADSC mixture. Control defect was left unfilled. 6 and 12 weeks after the implantation, the rats were sacrificed and the defects were evaluated by histomorphometric and radiographical studies. Results: Histomorphometric analysis revealed that DBM with ADSC mixture group showed significantly higher bone formation than DBM alone group(p<0.05). Although radiographs from DBM alone group and DBM with ADSC group revealed similar diffuse radiopaque spots dispersed throughout the defect. Densitometric analysis of calvarial defect revealed DBM with ADSC mixture group significantly higher bone formation than DBM alone(p<0.05). There was correlation of densitometry with new bone formation(Spearman's correlation of coefficient=0.804, 6 weeks, 0.802, 12 weeks). Conclusion: The DBM with ADSC mixture group showed the best healing response and the osteoinductive properties of DBM were accelerated with ADSC mixture. It will be clinically applicable that DBM and ADSC mixture in plastic and reconstructive surgery, such as alveolar cleft and congenital facial deformities that bone graft should be required.
Background: Radiation therapy is widely employed in the treatment of head and neck cancer. Adverse effects of therapeutic irradiation include delayed bone healing after dental extraction or impaired bone regeneration at the irradiated bony defect. Development of a reliable experimental model may be beneficial to study tissue regeneration in the irradiated field. The current study aimed to develop a relevant animal model of post-radiation cranial bone defect. Methods: A lead shielding block was designed for selective external irradiation of the mouse calvaria. Critical-size calvarial defect was created 2 weeks after the irradiation. The defect was filled with a collagen scaffold, with or without incorporation of bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) (1 ㎍/ml). The non-irradiated mice treated with or without BMP-2-included scaffold served as control. Four weeks after the surgery, the specimens were harvested and the degree of bone formation was evaluated by histological and radiographical examinations. Results: BMP-2-treated scaffold yielded significant bone regeneration in the mice calvarial defects. However, a single fraction of external irradiation was observed to eliminate the bone regeneration capacity of the BMP-2-incorporated scaffold without influencing the survival of the animals. Conclusion: The current study established an efficient model for post-radiation cranial bone regeneration and can be applied for evaluating the robust bone formation system using various chemokines or agents in unfavorable, demanding radiation-related bone defect models.
Kim, Soung-Min;Lee, Jong-Ho;Jo, Joung-Ae;Lee, Seung-Cheol;Lee, Suk-Keun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.31
no.5
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pp.440-453
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2005
Objectives : To develop a bioactive membrane for guided bone regeneration (GBR), the biocompatibility and bone regenerating capacity of the cellulose membrane obtained from the Ascidians squirt skin were evaluated. Materials and methods : After processing the pure cellulose membrane from the squirt skin, the morphological study, amino acid analysis and the immunoreactivity of the cellulose membrane were tested. Total eighteen male Spraque-Dawley rats (12 weeks, weighing 250 to 300g) were divided into two control (n=8) and another two experimental groups (n=10). In the first experimental group (n=5), the cellulose membrane was applicated to the 8.0 mm sized calvarial bone defect and the same sized defect was left without cellulose membrane in the first control group (n=4). In the another experimental group (n=5), the cellulose membrane was applicated to the same sized calvarial bone defect after femoral bone graft and the same sized defect with bone graft was left without cellulose membrane in the another control group (n=4). Each group was sacrificed after 6 weeks, the histological study with H&E and Masson trichrome stain was done, and immunohistochemical stainings of angiogenin and VEGF were also carried out. Results : The squirt skin cellulose showed the bio-inductive effect on the bone and mesenchymal tissues in the periosteum of rat calvarial bone. This phenomenon was found only in the inner surface of the cellulose membrane after 6 weeks contrast to the outer surface. Bone defect covered with the bioactive cellulose membrane showed significantly greater bone formation compared with control groups. Mesenchymal cells beneath the inner surface of the bioactive cellulose membrane were positive to the angiogenin and VEGF antibodies. Conclusion : We suppose that there still remains extremely little amount of peptide fragment derived from the basement membrane matrix proteins of squirt skin, which is a kind of anchoring protein composed of glycocalyx. This composition could prevent the adverse immunological hypersensitivity and also induce bioactive properties of cellulose membrane. These properties induced the effective angiogenesis with rapid osteogenesis beneath the inner surface of cellulose membrane, and so the possibilities of clinical application in dental field as a GBR material will be able to be suggested.
Kim, Hyun Ju;Jung, Bo Hyun;Yoo, Ki-Yeon;Han, Jin-Woo;Um, Heung-Sik;Chang, Beom-Seok;Lee, Jae-Kwan
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.47
no.5
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pp.339-350
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2017
Purpose: The purpose of this study was to determine the critical diabetes duration in a streptozotocin (STZ)-induced diabetic rat calvarial defect model for experimentation regarding bone regeneration by evaluating the association between diabetes duration and bone healing capacity through histological and radiographic analyses. Methods: Experimental diabetes was induced in 50 of 60 rats by an STZ injection. The rats were divided into 5 groups, including a control group (group 1), according to diabetes durations of 0, 2, 4, 6, and 8 weeks, respectively. Eighteen rats survived: 4 in group 1, 4 in group 2, 4 in group 3, 5 in group 4, and 1 in group 5. Calvarial defects were created at 0, 2, 4, 6, and 8 weeks after STZ injection in groups 1-5. Cone-beam computed tomography scanning was performed at baseline and at 5 and 7 weeks after surgery. The rats were sacrificed 7 weeks after surgery, followed by histological evaluation. Results: The voxel gray values (VGVs) of group 1 and group 2 increased, whereas the VGVs of group 3 and group 4 decreased starting 5 weeks after surgery, although this trend did not reach statistical significance between groups. On the reconstructed 3-dimensional images and based on an analysis of histological features, groups 1 and 2 showed apparent bone regeneration, while groups 3-5 showed very limited bone regeneration. Conclusions: The critical diabetes duration in an STZ-induced diabetic rat calvarial defect model for experimentation regarding bone regeneration was between 2 and 4 weeks. It is suggested that researchers who use STZ-induced diabetic rats wait for more than 2 weeks following diabetes induction before placing implants or conducting bone regeneration studies to allow definite disturbances in bone healing to emerge.
Bone remodeling results from the combined process of bone resorption and new bone formation which is regulated in part by some of Dexamethasone related proliferation & mineralization of cultured bone cell and polypeptide growth factors such as platelet derived growth factor(PDGF), which has been known to be an important local regulator of bone cell activity and participate in normal bone remodeling. To evaluate the effects of Dex and PDGF on bony healing of calvarial defect in rats, 10 ng/ml PDGF were applied on P group and 10 ng/ml PDGF and $10^7$ M Dex were applied PD group. 4 rats in each group were sacrificed at 7, 14. 21 days after operation respectively, and the tissue blocks were prepared for light microscope with H-E for evaluation of overall healing, with TRAP(tartrate resistant acid phosphatase) for evaluation of osteoclastic activity and with immunohistochemical staining for macrophages. The results were as follows : 1. In all group, healing aspects were progressed from 7 days to 21 days in soft and bony tissue, but complete repair were not observed in bony defect 2. PDGF and control group were showed similar bony healing aspect , but bony healing in combination of PDGF-BB and Dex were observed slower aspect compared to PDGF and control group from early healing times. 3. There were no significant difference on activities of osteoclast and macrophages in bony healing between control and experimental group In conclusion, PDGF were not influenced on bony healing of defect and combination of PDGF-BB and Dex were showed slower healing through early healing times. it was considered that Dex compared to PDGF did influenced on early hone formation factors in healing period
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[게시일 2004년 10월 1일]
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