이탈리안 라이그라스 (Lolium multiflorum Lam.) 종자로부터 직접 갤러스를 유도하고, 형성된 캘러스로부터 식물체를 재분화하는데 조건을 확립하였다. 캘러스 유도시 사용한 SH (Schenk and Hildebrandt), MS (Murashige and Skoog) 및 N6(Chu). 배지중에서 MS 배지가 캘러스 유도에 유리한 것으로 나타났으며, 캘러스 유도시에는 2,4-D $5\;mg/{\ell}$를 첨가한 조건, 캘러스 증식시에는 2,4-D $3\;mg/{\ell}$을 첨가한 조건이 가장 효율이 좋았다. 식물제 재분화 조건은 MS 배지에 BA $1.0\;mg/{\ell}$와 NAA $0.1\;mg/{\ell}$를 첨가한 재분화배지에서 계대배양하며 재분화를 완성한 처리구 9의 조건에서 재분화율 (15%)이 가장 높았다.
상수리나무와 굴참나무의 잎과 절간조직(節間組織)을 MS 및 GD배지(培地)에 식물생장조절물질(植物生長調節物質)로 NAA와 BAP, NAA와 kinetin, 2,4-D와 BAP, 2,4-D와 kinetin을 몇가지 농도(濃度)로 첨가하여 callus 배양(培養)한 결과(結果) 다음과 같은 결과(結果)를 얻을 수 있었다. 1. NAA와 BAP를 GD배지(培地)에 첨가하여 배양(培養)한 것이 callus 형성율(形成率)이 양호(良好)할 뿐만 아니라 callus 생장(生長)도 좋았으며, MS배지(培地)에서는 처리농도(處理濃度)에 따라 많은 차이(差異)가 나타났다. 뿌리는 NAA와 BAP의 농도 비(比)가 10~100배(倍)일 때 형성(形成)되었다. 2. NAA와 kinetin 조합(組合)에서도 GD배지(培地)에서 callus 형성율(形成率)이 100%로 좋았으며, callus 생장(生長)도 저농도(低濃度)의 NAA와 kinetin을 처리(處理)한 것을 제외(除外)하고는 대체적으로 양호(良好)하였다. 뿌리는 주(主)로 잎조직을 GD배지(培地)에 배양(培養)하였을 때 발생(發生)되었다. 3. 2,4-D와 BAP조합(組合)에서도 GD배지(培地)에서 callus가 100% 형성(形成)되었으며, callus의 생장(生長)은 MS 및 GD배지(培地)에서 모두 양호하였고, 특히 절간조직(節間組織)을 MS배지(培地)에 2,4-D $10{\mu}M$, BAP $1.0{\mu}M$과 2,4-D $10{\mu}M$, BAP $0.1{\mu}M$ 첨가하여 배양(培養)하였을 때 직경(直徑) 22mm이상(以上)으로 가장 왕성(旺盛)한 생장(生長)을 보여주었다. 4. 2,4-D와 kinetin에서도 MS배지(培地)에 비하여 GD배지(培地)에서 callus 형성율(形成率)이 높았으며 callus의 생장(生長)은 MS 및 GD배지(培地)에서 모두 양호(良好)하였다. 이상(以上)의 결과(結果)를 종합해 보면 callus 형성(形成)은 GD배지(培地)에서 생장조절물질(生長調節物質)의 종류(種類) 및 농도(濃度)에 관계없이 양호(良好)하였으며, callus의 생장(生長)은 2,4-D와 BAP 및 2,4-D와 kinetin 조합(組合)이 좋았으며, MS배지(培地)에 비(比)하여 GD배지(培地)에서 생장(生長)이 양호(良好)하였다. callus로부터 뿌리분화(分化)는 NAA와 BAP 및 NAA와 kinetin을 첨가한 배지(培地)에서만 나타났다.
Background: Callus cultivation has the advantage of producing a large amount of tissue of a plant in a laboratory regardless of the environment, for extracting an active substance. In the present study, callus formation was induced in the leaves of the succulent plant Adenium obesum (Forssk.) Roem & Schult. After callus cultivation, anti-inflammatory activity tests were conducted, because leaves and stems of A. obesum have been reported to possess biological activity. Methods and Results: In order to induce callus formation, various concentrations of plant growth factors, such as kinetin, naphtha-leneacetic acid (NAA), 6-benzyladenine (BA), and indole-3-acetic acid (IAA) were added to MS solid medium. The maximum callus proliferation was induced by mixed medium consisting of NAA ($2mg/{\ell}$) and BA ($1mg/{\ell}$). In addition, an elicitor was added to the medium under optimal conditions for initiating suspension culture. After suspension culturing, the activities of the callus extracts were compared and analyzed. The cytotoxicity and anti-inflammatory activity tests revealed that the anti-inflammatory activity of the callus extract and the content of phenolic compounds were elevated after treatment of the callus culture with the elicitior. Conclusions: A. obesum callus might be considered as potential source of biologically active anti-inflammatory material.
A breeding program in progress at Suweon Livestock Experiment Station, RDA, involves the hybridization of italian ryegrass (Lm) and several leading forage grasses in an effort to combine the nutritive, productivity and palatability qualities of Lm with the adaptive and cold resistance qual; .les of several leading grasses. In order to study the fate of the hybridization between remotely related species, immatured hybrid embryos were cultured on media. The emasculated plants of Lm were Sikem and Tetrone. Reweille, 2n=14, of perennial ryegrass (Lp.), Forager, 2n=42, of tall fescue(Fa), First, 2n=14,of meadow fescue(Fp), Potomac, 2n=28, of orchardgrass(Dg), and Richmond, 2n=42, of timothy(Ph.p) were used as pollinators. Embryos were isolated on 4, 8, 12, 16, and 20 days after pollination and cultured them on modified Murashige and Skoog media. Calluses and plantlets have been obtained after 8 days old embryos crossing between $Lm{\times}Fa$, after 12 days embryos crossing between $Lm{\times}Lp$, Dg, and Ph.p, and after 16 days embryos crossing between $Lm{\times}Fp$. Both callus and shoot formation occurred on 6 % or less of the plated embryos of $Lm{\times}Fp$, Dg, and Ph.p. Embryoderived callus forming shoots have been obtained from 4 days old embryo crossing between $Lm{\times}Dg$ which has not successfully been done anywhere as far as we know. It means that hybrid plants of species without crossability can be obtained through the use of immatured embryo culture. Some of plated embryos developed directly shoots from embryos and the others shoot-forming callus. Cross between related species showed a high frequency of directly shoot formation from plated embryos and cross between remotely related species a high frequency of callus formation.
본 실험은 무궁화 '홍화랑' 품종의 기내 대량 생산을 위한 액체 현탁배양에서의 배양조건과 방법을 구체적으로 규명하고자 수행되었다. Mesh 종류별로 비교해 보았을 때 가장 굵은 10 mesh를 사용한 것이 callus형성에 효과적이었으며, 회전속도에 따른 callus의 형성은 80 rpm에서 가장 효과적이었다. TDZ 0.01 mg/L 첨가된 MS 고체배지에서 유기된 callus를 TDZ 0.001 mg/L가 첨가된 액체배지에 현탁배양했을 경우 callus 형성과 신초원기 형성이 가장 왕성하였다. 형성된 신초원기를 MS와 1/2 MS 배지에 생장조절제가 첨가되지 않은 조건에서 현탁배양시 신초 재분화율이 가장 높았다. 따라서, 이러한 액체 현탁배양 조건과 방법의 구체적인 규명은 무궁화 급속 대량 번식체계 확립을 위한 가능성을 보여 주었다.
대두의 자엽 절편을 이용한 부정근 형성과 품종 반응을 비교하였다. 품종별 부정근 형성 양상은 직접적인 부정근 형성 품종과 callus형성이 동시에 이루어지는 품종들로 구분되었으며, callus 형성이 많은 품종에서는 부정근 형성수가 적었다. 자엽 절편에서의 부정근 형성은 절편의 향축면 치상시에만 부정근이 형성되었고, 배축면과 향축면이 동시에 치상될 경우에도 향축면에서만 부정근이 형성되며, 절편의 배축이 존재하였던 방향에서만 부정근이 형성되는 방향성이 존재하였다. 부정근 형성시 자엽 절편 내 탄수화물은 형성초기보다 형성이 가장 많은 유기 4일에 가장 많이 관찰되었으며 ,형성된 부정근의 생장이 이루어지는 7일 이후에는 관찰되지 않았다.
1. Ge는 명일엽(明日葉)이 일당귀에 비하여 2.1배 함유량이 더 높았다. 2. 분해 온도를 높이면 분해를 단시간에 할 수 있었으나 Ge 함량에 있어서는 낮은 온도로 분해할 때보다 낮았다 3. Ge 처리시 callus 형성은 일당귀가 명일엽(明日葉)보다 좋았으나 두 식물 모두 pH 5.7, 5.4, 6.0 순으로 좋았다. 명일엽(明日葉)에서는 일당귀와는 달리 pH 5.7에서 callus증식 중 신초형성이 많았다. 4. Callus형성에는 명일엽(明日葉)과 일당귀 모두 무기 Ge의 5 ppm까지 대체로 좋았으나 10 ppm부터 저해되다가 100 ppm에서는 거의 형성되지 않았고 유기Ge의 처리에서는 10 ppm까지 양호했고, 50 ppm부터 저해하지만 100 ppm에서도 다소 형성되었다.
카네이션의 약배양 기술을 확립하고자 저온 전처리, 암처리, Ficoll처리가 약배양에 미치는 효과를 조사하였다. 약배양에 적합한 화분의 발육단계인 1핵기 소포자 전후 화분의 약을 가지는 카네이션 화뢰의 직경은 4~6mm이었다. 카네이션 약배양 후 캘러스 형성과 배양 후 약의 반응에 가장 효과적인 저온전처리 기간은 7일이었다. 명배양하는 것보다 암배양하는 것이 캘러스 형성과, 형성된 캘러스로부터 root 분화에 효과적이었다. Ficoll처리는 캘러스 형성에 큰 효과는 없었지만, 형성된 캘러스로부터 신초와 root가 분화되었다.
Orchardgrass의 종자배양에서 캘러스형성과 식물체 재분화에 적합한 조건을구명하기 위하여 품종간의 차이와 배지조성 및 생장조절물질의 조성 등에 대한 일련의 실험을 수행한 바, 공시품종중 "Amba"의 식물체 재분화율이 가장 높았고, $N_6$ 배지가 MS, $B_5$ 배지보다 종자에서 형성된 캘러스 생체중이 무거웠으며, 식물체 재분화율도 높게 나타났다. 또한 3 mg/L의 dicamba가 첨가된 배지에서 형성된 캘러스를 재분화배지에 이식하였을 때 식물체 재분화율이 30%로 가장 높게 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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