New type of chitosan derivatives, chitosan-g-MAP, were synthesized by graft copolymerization of mono (2-methacryloyl oxyethyl) acid phosphate (MAP) into chitosan, in order to solubilize chitosan in water. Ceric ammonium nitrate was used as an initiator for graft copolymerization. The optimal conditions for graft copolymerization were determined on the basis of reaction temperature, time, and the concentration of initiator and monomer. The reaction conditions for the highest percentage of grafting were as follows: an initiator concentration, 3.5${\times}$10$\^$-3/ M; monomer concentration, 0.19 M; and reaction temperature, 40$^{\circ}C$ The reaction rate reached the maximum value after 4 hrs of reaction. Antifungal activity was tested against Candida albicans, Trichophyton rubrum and Trichophyton violaceum by using chitosan-g-MAP and two other chitosan samples which have degree of deacetylation of 70% (DA-7) and 90% (DA-90). Their antifungal activities were investigated in weak acidic range. Maximum antifungal activity of them was observed at pH 5.75. Chitosan-g-MAP inhibited thoroughly the growth of Candida albicans and Trichophyton violaceum. Howerver, DA-70 and DA-90 showed higher antifungal activities on Trichophyton rubrum than that of chitosan-g-MAP.
Dyeability of microbial violacein produced from Chromobacterum violaceum CV107 on to multifiber fabrics has been studied. The bluish-purple colourants were produced by cultivation of Chromobacterum violaceum using LB liquid medium for 2 days. The colourant was extracted with 80% acetone and identified as violacein by LC/MS analysis. The violacein could be dyed on not only natural fibers such as Cotton, Silk and Wool but also synthetic fibers such as Diacetate, Triacetate, Creslan 61 and Nylon 66. Maximum K/S values were shown at 540-580 nm according to different fiber with color appearance of purple or blue. An optimum pH and temperature under dyeing condition were 10 and $70^{\circ}C$, respectively. Any mordants were not improved colour density and quality on various fabrics. From this studies, pigments produced microbe have a high potentials for natural dyeing on fabrics. Finally, development of new colourants from microbe has made a possible change for new dyeing field in respects of eco-friend and repeatability of natural dyeing for apparels.
This study was carried out particularly focusing on he antitumor effect in combination with 5-fluorocytosine(5-FC), antifungal agent, and extracellular cytosine deaminase from Chromobacterium violaceum YK 391 against U-937, K-562 and SNU-C4 cells. While the addition of 10$\mu\textrm{g}$/100 ${\mu}\ell$ of anticancer agent, 5-fluorouracil(5-FU), to U-937, K-562 and SNU-C4 caused the decrease of proliferation 90%, 75% and 93% respectively, the addition of 20 $\mu\textrm{g}$/100 ${\mu}\ell$ of the extracellular cytosine deaminase and 10 $\mu\textrm{g}$/100 ${\mu}\ell$ of antifungal agent 5-FC caused the decrease of proliferation 80%, 70% and 90%, respectively. These results, therefore, reveal that this enzyme has the similar clinical effect for considering of adjuvant antitumor effect. From the above results, the treatment of 5-FC and the cytosine deaminase was very effective and showed the possibility to remove side effects which easily occur by the treatment of 5-FU only. An extracellular cytosine deaminase.
The extracellular cytosine deaminase (EC 3.5.4.1) from Chromobacterium violaceum YK 391 was purified 264.7-fold with an overall yield of 14.3%. The enzyme was for the first time homogeneous by the criteria of polyacrylamide gel electrophoresis performed in the absence and in the presence of sodium dodecyl sulfate. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be about 156 kDa. The enzyme consisted of two identical subunits of approximate molecular weight 78 kDa. The isoelectric point of the enzyme was pH 5.55. The enzyme had a pH optimum of 7.5 and a temperature optimum of around 40 to $45^{\circ}C$. Besides cytosine, the enzyme deaminated 5-fluorocytosine, cytidine, 5-methylcytosine, and 6-azacytosine, but not 5-azacytosine. The extracellular cytosine deaminase is believed to be unique because it was active not only on cytosine but also on cytidine. The apparent $K_m$ values for cytosine, 5-fluorocytosine, cytidine, and 5-methylcytosine were determined to be 1.55 mM, 5.52 mM, 10.4 mM, and 67.2 mM, respectively. The enzyme activity was strongly inhibited by heavy metal ions such as $Fe^{2+},Pb^{2+},Cd^{2+},Zn^{2+}, Hg^{2+}, and Cu^{2+}$ at 1 mM, and completely by $\alpha,\alpha$'-dipyridyl, and $\rho$-chloromercuribenzoate at 1 mM, and weakly inhibited by 1mM ο-phenanthroline. The enzyme activity was not affected by various nucleosides and nucleotides.
Violacein, a purple pigment first isolated from a gram-negative coccobacillus Chromobacterium violaceum, has gained extensive research interest in recent years due to its huge potential in the pharmaceutic area and industry. In this review, we summarize the latest research advances concerning this pigment, which include (1) fundamental studies of its biosynthetic pathway, (2) production of violacein by native producers, apart from C. violaceum, (3) metabolic engineering for improved production in heterologous hosts such as Escherichia coli, Citrobacter freundii, Corynebacterium glutamicum, and Yarrowia lipolytica, (4) biological/pharmaceutical and industrial properties, (5) and applications in synthetic biology. Due to the intrinsic properties of violacein and the intermediates during its biosynthesis, the prospective research has huge potential to move this pigment into real clinical and industrial applications.
Kim, Hanbyul;Myoung, Kilsun;Lee, Hyun Gee;Choi, Eun-Jeong;Park, Taehun;An, Susun
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.46
no.1
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pp.23-29
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2020
The skin is colonized by a large number of microorganisms with a stable composition of species. However, disease states of skin such as acne vulgaris, psoriasis, and atopic dermatitis have specific microbiome compositions that are different from those of healthy skin. The target modulation of the skin microbiome can be a potential treatment for these skin diseases. Quorum sensing (QS), a bacterial cell-cell communication system, can control the survival of bacteria and increase cell density. Also, QS affects the pathogenicity of bacteria such as biofilm formation and protease production. In this study, we confirmed anti-QS activity of Amorepacific patented ingredients, which are Lactobacillus ferment lysate (using Lactobacillus plantarum APsulloc 331261, KCCM 11179P) through bio-reporter bacterial strain Chromobacterium violaceum. The purple pigment production of C. violaceum controlled by QS was reduced 27.3% by adding 10 ㎍/mL of Lactobacillus ferment lysate (freeze dried). In addition, the Lactobacillus ferment lysate increased growth of Staphylococcus epidermidis 12% and decreased growth of Pseudomonas aeruginosa 38.5% and its biofilm formation 17.7% at a concentration of 10 ㎍/mL compared to the untreated control group. Moreover, S. epidermidis was co-cultured with the representative dermatological bacterium Staphylococcus aureus in the same genus, the growth of S. epidermidis was increased 134 % and the growth of S. aureus was decreased 13%. These results suggest that fermented lysate using Lactobacillus plantarum APsulloc 331261 may be useful as a cosmetic ingredient that can control the balance of skin microbiome.
Park, Jun-Ho;Hwang, In-Gyu;Kim, Jin-Wan;Lee, Soo-O;Conway, B.;Peter Greenberg, E.;Lee, Kyoung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.5
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pp.804-811
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2001
In many Gram-negative bacteria, autoinducers, such as N-acyl-L-homoserine lactone(acyl-HSL) and its derivative molecules, mediate the cell-density-dependnet expression of certain operons. The current study identified the autoinducers produced by Burkholderia cepacia G4, a trichloroethylene-degrading lagoon isolate, using TLC bioassays with Agrobacterium tumefaciens NT1(pDCI141E33) and Chromobacterium violaceum CVO26, and a GC-MS analysis. The ${R_f}\;and\;{R_t}$ values and mass spectra were compared with those of synthetic compounds. Based on the analyses, it was confirmed that G4 produces N-hexanoyl (C6)-, N-octanoyl (C8)-, N-decanoyl (C10)-, N-dodecanoyl (C12)-HSL, and an unknown active species. The integration of the GC peak areas exhibited a ratio of C8-HSL:C10-HSL:C12-HSL at 3:17:1 with C6-HSL and C10-HSL production at trace and micromolar levels, respectively, in the culture supernatants. Nutants partially defective in producing acyl-HSLs were also partially defective in the biosynthesis of an antibiotic substance. These results indicate that the autoinducer-dependent gene regulation in G4 is dissimilar to the clinical B. cepacia strains isolated from patients with cystic fibrosis.
Acyl homoserine lactone (AHL) lactonase has been proved to be the AHL-degrading enzyme with the highest substrate specificity for AHL molecules and has shown a considerable potential as low-cost and efficient quorum quenching (QQ) technique. However, few studies focused on its inhibitory effect on biofilm formation which is also a quorum sensing (QS)-regulated phenomenon. In this study, QQ activity of six isolates from biofouled reverse osmosis membranes was studied using Chromobacterium violaceum CV026 and Agrobacterium tumefaciens NTL4 as biosensors under various conditions. All of the isolates belonged to the genus Bacillus and showed QQ activity regardless of the acyl chain length or substitution of AHL molecule. The isolates were capable of significantly inhibiting biofilm formation (46.7-58.3%) by Pseudomonas aeruginosa PAO1 and produced heat-sensitive extracellular QQ substances. The LC-MS analysis of the QQ activity of a selected isolate, RO1S-5, revealed the degradation of N-(3-oxododecanoyl)-L-homoserine lactone (3-oxo-C12 AHL) and the production of corresponding acyl homoserine (3-oxo-C12-HS), which indicated the activity of AHL lactonase. The broad AHL substrate range and high substrate specificity suggested that the isolate would be useful for the control of biofilm-related pathogenesis and biofouling in industrial processes.
For the phylogenetic study of the genus Trichaptum, nuclear ribosomal DNA sequences from eight strains of four Trichaptium species were examined. Phylogenetic trees were constructed using molecular data on 18 rDNA and 5.8S rDNA and thei ITSs. Parsimony analyses of the Trichaptum species showed that T. biforme and T. laricinum made a monophyletic group respectively, suggesting that each species is phylogenetically independent. However, T. abietum represented a polyphyletic group and T. fusco-violaceum formed a polytomous group, suggesting that these species could be in the process of evolutionary differentiation. Examination of base substitutions of the 18S rRNA gene reveals that the C-T transition is most predominant and that there is a stronger transition bias between closely related organisms rather than between distantly related ones.
Fourteen different taxa of dictyostelid cellular slime molds were recovered from the alpine and subalpine zone in Mt. Paektu. In subalpine zone, six species were recovered : Dictyostelium minutum, D. brefeldianum, D. crassicaule, D. capitatum, Polysphondylium solitarium and P. pallidum. One of these species which were isolated from the soils of Larix olgensis community exhibited several distinctive features which differed from the published species. This species was designated as a new species, Polysphondylium solitarium Kang et Chang, sp. nov. When cultivated at 22~24$^{\circ}C$ on low-nutrient agar media with Escherichia coli, Polysphondylium solitarium is distinguishable from other species by the following combination of features: (ⅰ) the sorocarps with vinaceous pigmentation; (ⅱ) pseudoplasmodia radial. usually centralized and rarely subdivided; (ⅲ) the various number of whorls; (ⅳ) the spores with unconsolidated and nonconspicuous polar granules. Also, we confirmed this new species by analyzing ribosomal DNA (ITS1, ITS2 and 5.8s DNA) sequences of P. solitarium and P. violaceum.
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