PCR 기술을 이용하여 고추와 토마토의 탄저병을 일으키는 Colletotrichum coccodes 균을 빠르고 정확하게 검출하는 방법을 개발하였다. Colletotrichum 13종 22개 균주로 부터 translation elongation factor 1 alpha 유전자를 분석하여 C. coccodes에 특이적인 coccoTef-F/cocco Tef-R primer set를 제작하였다. 제작된 primer를 사용한 결과 일반 PCR 방법으로 10 ng, real-time PCR 방법으로는 10 pg 수준에서 C. coccodes가 특이적으로 검출이 가능하였다. 인공적으로 C. coccodes에 감염시킨 고추와 토마토 종자에서도 일반 PCR 방법과 real-time PCR 방법 모두 C. coccodes검출이 가능하였다. 본 연구에서 개발한 PCR 방법은 수출입되는 종자에서 신속하고 정확하게 탄저병균 C. coccodes를 특이적으로 검출하는데 활용될 수 있을 것이다.
2003년부터 2009년까지 전북 고창지역에 재배하는 복분자에서 탄저병이 발생하였다. 탄저병은 처음에 흑갈색의 작은 원형반점들이 잎자루와 줄기에 나타나고 병반이 커지거나 융합되어 불규칙한 병반에 나타난 반점은 대개 원형이나 타원형으로 융합되거나 진전되어 불규칙한 병반을 형성하기도 한다. 탄저병징에서 분리한 병원균은 배양형태적 특성조사 결과 Colletotrichum gloeosporioides, C. cocode, C. acutatum로 동정되었다. 분리된 C. gloeosporioides, C. cocodes, C. acutatum 3종의 병원균은 인공접종에 의한 병원성 검정에서도 동일한 병징을 나타냈다.
Cho Jun-Young;Choi Gyung-Ja;Lee Seon-Woo;Jang Kyoung-Soo;Lim He-Kyoung;Lim Chi-Hwan;Lee Sun-Og;Cho Kwang-Yun;Kim Jin-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권2호
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pp.280-285
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2006
Methanol extract of the rhizomes of turmeric, Curcuma longa L., effectively controlled the development of red pepper anthracnose caused by Colletotrichum coccodes. In addition three antifungal substances were identified from the methanol extract of C. longa rhizomes as curcumin, demethoxycurcumin, and bisdemethoxycurcumin using mass and $^{1}H-NMR$ spectral analyses. The curcuminoids in a range $0.4-100\;{\mu}g/ml$ effectively inhibited the mycelial growth of three red pepper anthracnose pathogens, C. coccodes, C. gloeosporioides, and C. acutatum. The three curcuminoids inhibited mycelial growth of C. coccodes and C. gloeosporioides to an extent similar to the synthetic fungicide dithianon did, but the synthetic agent was a little more effective against C. acutatum. The curcuminoids also effectively inhibited spore germination of C. coccodes, and bisdemethoxycurcumin was the most active. Among the three curcuminoids, only demethoxycurcumin was effective in a greenhouse test in suppressing red pepper anthracnose caused by C. coccodes.
하수 슬러지로부터 감자 뿌리썩음병 및 토마토 탄저병을 유발하는 Colletotrichum coccodes에 대해 항진균 활성이 있는 세균을 분리하였다. 분리균의 partial 16S rRNA sequence는 Bacillus methylotrophicus CBMB205 및 Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum FZB42와 각각 99%의 상동성을 보여주었다. 분리균은 neighbor-joining phylogenetic tree, BlastN 염기서열 분석, 형태학적 및 배양학적 특성에 따라 Bacillus sp. SW29-2로 동정하였다. 분리균 Baciilus sp. SW29-2는 B. methylotrophicus CBMB205 type strain과 비교시 4% 이상 NaCl에서 생육하는 것이외에 형태학적, 생리학적 특성이 모두 동일하였다. 분리은 호기성, Gram-양성, 내생포자를 형성하는 세균이었다. 실험한 $18-47^{\circ}C$(최적, 약 $38^{\circ}C$)의 온도범위에서, pH 3-9(최적, 약 6.0) 범위의 초기 배지 pH에서 모두 생육이 관찰되었다. Baciilus sp. SW29-2의 C. coccodes에 대한 생육저지환(직경)은 23 mm에서 29 mm의 범위이었다. 분리 세균은 또한 사과 푸른곰팡이병(penicillum rot disease)을 유발하는 Penicillium expansum에 대해 우수한 항진균 활성을 보여주었다. 현재까지, Bacillus속 세균의 C. coccodes에 대한 항균활성 연구는 파악할 수 없었다. 이 결과는 분리균 Bacillus sp. SW29-2가 식물 병원성 C. coccodes에 대해 생물학적 방제제로의 활용 가능성이 있으며, 추후, 식물병을 유발하는 다른 진균에 대해서 적용할 예정이다.
Han, Jae Woo;Shim, Sang Hee;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Hun;Choi, Gyung Ja
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권2호
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pp.262-266
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2018
Phytochemicals have been considered as alternatives for synthetic fungicides because of their biodegradability and low toxicity. In this study, we found that the methanolic extract of Corydalis ternata suppressed the development of plant diseases caused by Puccinia triticina and Colletotrichum coccodes. As the antifungal substance, three isoquinoline alkaloids (dehydrocorydaline, stylopine, and corydaline) were isolated from C. ternata. These active compounds also exhibited in vivo antifungal activity against P. triticina and C. coccodes. Taken together, our results suggest that C. ternata and its active compounds can be used to control plant diseases.
Kim, J. H.;S. S. Cheong;J, Ryu;Park, J. S.;Park, Y. G.;Lee, W. H.
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.132.2-132
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2003
Anthracnose occurred on rapsberry grown in Gochang areas of Korea in 2003. The disease incidence was ranged from 1.1 to 2.6%. Anthracnose of rapsberry appeared as dark brown circular spots on naturally infected stems. The symptoms of infected stems were small brown to dark brown spots and gradually enlarged larger cylindrical dark brown lesions. The causal fungus of anthracnose isolated from the diseased plants was identifed as Colletotrichum coccodes based on the morphological and cultural characteristics. All isolates of C. coccodes were produced similar symptoms on the host leaves by artificial inocultion.
고추 종자에서 Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C.dematium 및 C. gloeosporioides 등 4종의 탄저병균(炭疽病菌)이 검출(檢出)되었다. 그중 C.dematium과 C.gloeosporioides가 높은 비율(比率)로 검출(檢出)되었으며, 감염율(感染率)이 높은 종자시료(種子試料)는 각각(各各) 최고 84% 및 28%의 감염율(感染率)을 나타내었다. 반면에 C.acutatum과 C.coccodes는 각각 1개의 종자 시료(試料)에서 1% 및 2%의 낮은 비율(比率)로 검출(檢出)되었다. 표준습지법(標準濕紙法)이 냉동습지법(冷凍濕紙法)이나 한천배지배양법(培地培養法)에 비하여 종자상의 탄저병균(炭疽病菌) 검출(檢出)에 효과적(效果的)이었다. C.dematium과 C. gloeosporioides의 종자내 감염부위(感染部位)를 조사(調査)하였던 바, 종피(種皮)뿐 아니라 종자내 깊숙이 배유(胚乳)와 자엽(子葉)에 까지 감염(感染)되어 있음이 확인되었으나 종피(種皮) 감염율(感染率)이 높았다. C.dematium과 C.gloeosporioides 감염종자(感染種子)를 한천배지와 살균토양에 옮겨 발아율과 유묘생육상황(幼苗生育狀況)을 조사한 결과, 감염종자(感染種子)는 종자부패(種子腐敗), 모잘록, 유묘고사(幼苗枯死) 및 자엽(子葉)과 하배축(下胚軸)의 변색(變色)을 초래하였다. 접종실험(接種實驗) 결과 C.acutatum은 고추의 적과(赤果)에 병원성(病原性)이 있었고 C.coccodes는 고추 적과(赤果)에 강한 병원성(病原性)이, 고추 잎에 약한 병원성(病原性)이 있었다. C.dematium은 고추 잎과 청과(靑果)에 강한 병원성(病原性)이 있었고, C.gloeosporioides 는 고추 잎과 청과(靑果) 및 적과(赤果)에 병원성이 있었다. 이들 4종의 종자전염성(種子傳染性) 탄저병균(炭疽病菌)의 고추 이외의 다른 작물(作物)에 대한 병원성도 조사하였다.
Colletotrichum panacicola isolates were obtained from anthracnose lesions of Korean ginseng and compared with four Colletotrichum species in morphology, molecular phylogeny and pathogenicity. Based on morphological characteristics, C. panacicola was easily distinguished from Colletotrichum gloeosporioides but not from Colletotrichum higginsianum, Colletotrichum destructivum and Colletotrichum coccodes. A phylogenetic tree generated from ribosomal DNA-internal transcribed spacer sequences revealed that C. panacicola is remarkably distinguished from C. gloeosporioides and C. coccodes but not from C. higginsianum and C. destructivum. However, molecular sequence analysis of three combined genes (actin + elongation factor-$1{\alpha}$ + glutamine synthatase) provided sufficient variability to distinguish C. panacicola from other Colletotrichum species. Pathogencity tests showed that C. panacicola is pathogenic to Korean ginseng but not to other plants. These results suggest that C. panacicola is an independent taxon distin-zguishable from C. gloeosporioides and other morphologically similar Colletotrichum species.
사과, 호박, 고추에서 분리된 탄저병균들(Colletotrichum gloeosporioides, C. orbiculare, C. acutatum)이 복분자딸기에 병원성을 나타냈으며. 특히 사과에서 분리된 탄저병균은 무상처 접종에서도 병원성을 나타냈다. 복분자 딸기에서 분리한 탄저병균(Colletotrichum gloeosporioides, C. coccodes, C. acutatum)은 사과와 딸기에서는 dropping 접종에 의해 병원성을 보였으나 고추와 토마토에서는 낮은 병원성을 나타내었다.
본 연구는 식물 근권에서 분리한 유용미생물 PA1, PA2, PA4, PA5, PA12 의 식물 생장 촉진능력과 식물 병원성 진균인 Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C. gloeosporioides, C. dematium, Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Sclerotinia minor 그리고 Fusarium sp.에 대한 생장억제능력을 평가하는데 그 목적이 있다. In vitro 실험에서 유용미생물의 식물 병원성 진균의 생장억제 능력을 확인하기 위해 세균배지인 TSA 배지와 곰팡이 배지인 PDA배지, 그리고 TSA와 PDA배지를 각각 50%씩 혼합한 배지(v/v, 1:1)에서 대치배양을 실시하였다. 그 결과 PDA배지에서는 PA2가 C. coccodes에 대해 65.5%로 가장 높은 억제능력을 보였으며, TSA배지에서는 PA2가 S. minor에 대해 96.5%로 가장 높은 억제력을 보였다. 또한 PDA와 TSA를 혼합한 배지에서는 PA2가 C. acutatum에 대해 58.5%로 가장 높은 억제능력을 보였다. 분리한 5균주 모두에서 식물병원성 진균에 대하여 생물적 방제 효과가 있음을 확인하였다. 또한 식물생장 촉진능력을 유발하는 원인물질을 탐색하기 위해 siderophore, protease, chitinase, hydrogen cyanide (HCN) 생성 유무를 확인하였고, phosphate solubilizing 실험을 실시하였다. 본 연구에서 사용된 유용미생물 5균주를 16s rDNA sequencing 결과 PA1, PA2는 Bacillus subtilis, PA4, PA5, PA12 각각 Bacillus altitudinis, Paenibacillus polymyxa, Bacillus amyloliquefaciens로 동정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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