• 제목/요약/키워드: Bt. Protein

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큰비쑥 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과 (Antimelanogenic of Artemisia fukudo Makino Extract in Melanoma Cells)

  • 김민진;김서연;현광희;김덕수;김승영;현창구
    • KSBB Journal
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    • 제32권3호
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    • pp.233-237
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    • 2017
  • Melanin is one of the most important factors affecting skin color. Melanogenesis is the bioprocess of melanin production by melanocytes in the skin and hair follicles and is mediated by several enzymes, such as tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1, and TRP-2, MITF. In this study, we investigated the effect of Artemisia fukudo Makino extracts on tyrosinase activity and melanin production as natural products of whitening functional cosmetics. Melanin content in murine B16F10 melanoma cells were decreased by Artemisia fukudo Makino extracts in a dose-dependently. In addition, the inhibition of tyrosinase activity of Artemisia fukudo Makino extracts showed to decrease tyrosinase activity as the concentration of ${\alpha}-MSH$ was increased. Furthermore, western blot analysis revealed that Artemisia fukudo Makino extracts significantly downregulated the expression of tyrosinase, TRP-1 which treat of ${\alpha}-MSH-induced$ melanogenesis in murine B16F10 melanoma cells. As a result, Artemisia fukudo Makino extract showed functionalities as an effective whitening agent to inhibit melanin formation.

곤충살충성 세균 Photorhabdus의 Insecticidal Toxin과 연구동향 (Insecticidal Toxin and Research Trends of Photorhabdus, Entomopathogenic Bacteria)

  • 장은경;신재호
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제38권2호
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    • pp.117-123
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    • 2010
  • BT toxin is produced by a soil bacterium Bacillus thuringiensis and has long been used as a biological insecticide without any competition. Recently, Photorhabdus, a symbiotic bacterium from entomopathogenic nematodes, family Heterorhabditae, has been researched and discussed as alternatives to B. thuringiensis. Photorhabdus, which lives in the gut of entomopathogenic nematodes, is a highly virulent pathogen of a wide range of insect larvae. When an insect is infected by the nematodes, the bacteria are released into the cadaver, and produce a number of insecticidal toxins. The biological role of the different Photorhabdus toxins in the infection process is still unclear. Photorhabdus toxin complex (Tc) is highly secreted gut-active toxin and has been characterized as a potent three-component (A, B and C) insecticidal protein complex. These components are necessary for full oral activity against insect larvae. The Photorhabdus PirAB binary toxins exhibit a potent injectable activity for Galleria mellonella larvae, and have oral toxicity against mosquitoes and caterpillar pest Plutella xylostella. Other toxin, 'makes caterpillars floppy' (Mcf) showed injectable activity on caterpillars. Recombinant Mcf triggers apoptosis in both insect hemocytes and the midgut epithelium and carries a BH3 domain. In this review, the relationship between the Photorhabdus and the nematode is discussed and recent important insecticidal toxins from Photorhabdus are described.

Double-stranded RNA 발현 세균의 동결건조 제형화와 적용 대상 해충 선택성 (A Freeze-drying Formulation and Target Specificity of Double-stranded RNA-expressing Bacteria to Control Insect Pests)

  • 김은성;김용균
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제55권2호
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    • pp.81-89
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    • 2016
  • 이중가닥 RNA (double-stranded RNA, dsRNA)는 표적 유전자의 발현을 억제하는 기능으로 해충방제에 응용되었다. 인테그린은 ${\alpha}$${\beta}$ 단위체로 구성된 이량체 막 단백질이다. 진핵생명체에서 인테그린은 세포-세포 및 세포-세포외기질의 상호연결에 중요한 역할을 담당한다. 인테그린 ${\beta}$ 단위체 발현을 억제하는 특정한 dsRNA (= dsINT)는 해당 곤충에 뚜렷한 치사효과를 유발한다. 또한, dsINT를 발현시키는 형질전환된 대장균도 해당 곤충에 뚜렷한 살충력을 가진다. 그러나 이 세균 살충제의 야외 적용을 위해서는 제형화 기술이 필요했다. 본 연구는 dsINT를 발현하는 재조합 세균을 동결 건조시켜 대상 곤충에 대해 살충효능을 검정하였다. 동결 건조된 세균은 파밤나방(Spodoptera exigua) 종령 유충에 높은 섭식독을 일으켰다. 파밤나방에 대해서 Bacillus thuringiensis 상용 살충제 처리는 불과 60%의 살충력을 보이는 반면, 동결 건조된 dsINT 발현 세균과 혼합 처리할 때 살충력은 크게 증가하였다. dsINT 발현 세균은 해당 인테그린 염기서열 유사성에 따라 차이를 보이는 해충 종에 선택적 독성을 나타냈다. 이 결과는 인테그린에 특이적 dsRNA를 발현하는 세균이 동결 건조 제형화 조건하에서도 살충력을 유지한다는 것을 나타냈다.

불포화도가 다른 유지가 단식과 정상식이 흰쥐의 체중 및 간대사에 미치는 영향 (Effect of Various Fat and Oil Types on Weight Gain and Liver Metabolism in Fasting or Normal Diet Rats)

  • 서화중;박현희
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.19-26
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    • 1993
  • 단식 또는 기초사료를 투여한 성장기 rat 에 우지 또는 들깨유를 매일 일정량 투여하여 2일 간격으로 체중변화와 장기중량, 혈액의 생화학적검사 간조직검사를하여 다음의 결론을 얻었다. 완전 단식rat군(F)과 단식중 우지 (FT)와 들깨유(FP)를 투여한 rat군은 1일 평균 -6.2~-4.0%인 체중감소를 보이고 기초식이군 (B) 또는 기초식이에 우지 (BT)나 들깨유(BP)를 투여한 rat군은 1일 2.3~4.0%의 체중증가를 보였다. F군은 4일만에 모두 아사하였고, FT와 FP군은 6~10일 사이에 모두 아사하였다. 단식에 의한 영향으로 아사직전 이들 rat는 간중량(3.6~4.0g) serum cholesterol(70~73.2mg/㎗), serum triglyceride (6.5~7..5mg/㎗) blood glucose (76-91mg/㎗)의 현저한 감소와 GPT (117.5-186.5u), blood urea nitrogen (38~65mg/㎗)을 대폭 증가하는 특징을 가졌다. 유지시료 불포화도에 따른 영향에서 FP군은 FT군에 비해 약 2일 정도 생존일수의 감축과 serum cholesterol, serum triglyceride, blood urea nitrogen 감소를 보이나 GPT, blood glucose를 약간 증가하였다. BP군은 BT군에 비해 serum cholesterol, triglyceride를 상당히 감소하고 blood urea nitrogen의 근소한 감소와 GPT는 대폭 증가하였다. Blood glucose는 거의 차이가 없었다. 간조직 검사 결과 F군은 아사직전 간실질내 염증 세포 침윤을 보이고 FT, FP군은 유지 시료의 불포화도 차이에 관계없이 아사직전 일부 rat가 염증세포 침윤, 간실질의 염증, 간세포의 손상된 모양이 관찰되었다. 따라서 어떤 목적으로 단식 또는 유지만을 공급하는 무단백질 제한식이를 할 때 극심한 체중감소를 보이고 혈중 cholesterol과 trig1yceride는 크게 낮아지며 간을 포함한 모든 조직의 붕괴의 조짐으로 blood urea nitrogen이 크게 증가되고 그에 따른 간기능저하로 GPT도 크게 상승하고 rat의 경우 4~6일만에 사망하였다. 단식중이거나 혹은 정상식이내 고도 불포화 유지 (들깨유)의 섭취는 포화지방 (우지)에비해 혈중 cholesterol 과 triglyceride를 감소시키는 효과는 있지만 GPT가 유의적으로 증가됨을 볼때 장기간 고도 불포화 유지를 다량 섭취함은 간기능을 저하 시킬 수 있음이 나타났다.

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호박벌 일벌독의 성분 분석 및 생리활성 탐색 (Protein Composition and Biological Activities of Bombus ignitus Venom)

  • 한상미;이광길;여주홍;권해용;우순옥;윤형주;김미애;김원태;백하주
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.229-234
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    • 2007
  • 호박벌 일벌독의 성분과 생리활성을 규명하기 위하여 단백질 성분분석과 암세포 생육 저해 효능, 항균력을 검토하였다. 이차원단백질 분석을 통해 호박별의 일벌독은 63개의 단백질이 존재하는 것으로 확인되었으며, 가장 많은 함량을 보이는 3개의 단백질을 염기서열 분석하였다. 그러나 이들 성분은 아직 밝혀지지 않은 성분으로 판단되었다. 호박벌 일벌독의 암세포 (간암; Hep3B, 폐암; A549, 유방암; BT-20, 위암; AGS) 에 대한 생육 저해능은 시료 농도가 증가함에 따라 증가하는 경향을 보이며 100ng/ml에서 간암세포 (Hep3B) 에 대한 생육 저해능이 55%로 가장 높았다. 항균활성에 E. faecium 과 S. sonnei에 대하여 최소발육억제농도와 최소살균농도 모두 각각 0.256ug/ml 로 강한 항균활성을 나타내었으며, 그 외의 피검균에 대해서도 비교적 높은 활성을 보였다. 이상의 결과로부터 호박벌 일벌독의 성분은 다른 벌의 독성분과는 차이를 보이며, 그 생리활성에 있어 약리학적 이용이 가능할 것으로 판단되었다.

제주흑우와 한우에서 Extension, Agouti 유전자형과 모색 출현 양상 (Coat Color Patterns and Genotypes of Extension and Agouti in Hanwoo and Jeju Black Cattle)

  • 한상현;조인철;김재환;고문석;김영훈;김은영;박세필;이성수
    • 생명과학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.494-501
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    • 2011
  • 소의 Extension (E), Agouti (A) 유전자형과 모색유전양상의 연관관계를 이해하기 위해, 한우와 제주흑우(JBC), 이들 사이에서 생산된 교배후손에서 melanocortin-1 receptor (MC1R)과 agouti signaling protein (ASIP)의 유전자형을 분석하였다. 흑모색의 JBC에서는 세 가지 MC1R 대립인자들($E^D$, $E^+$, e)이 모두 발견되었다. JBC 집단은 한우에서 우점적으로 나타나는 열성동형접합자(e/e)가 발견되지 않았다. 반면, MC1R $E^+$/e 한우는 흑모색이 아닌 갈색이나 적색의 모색을 나타내었다. ASIP 유전자에서, 한우에서는 L1-BT 전위인자의 삽입/결실에 의해 세 가지 유전자형(A/A, A/$A^{Br}$, $A^{Br}/A^{Br}$)이 모두 관찰되었다. JBC 집단에서는 ASIP $A^{Br}$ 대립인자가 드물게 관찰되고, ASIP $A^{Br}/A^{Br}$ 동형접합인 개체들은 발견되지 않았다. ASIP $A^{Br}$ 대립인자를 보유하더라도 한우와 JBC, 이들의 교배후손에서도 agouti-유사 얼룩무늬 모색은 발견되지 않았다. 교배후손의 모색은 Agouti 유전자형과는 무관하고, Extension 유전자형과 직접적으로 연관되어 황-갈색(e/e)과 암-갈/흑색($E^+$/e)으로만 구분되었다. ASIP 유전자형은 아마도 한우 또는 교배 후손에서 모색의 발달에 영향이 없는 것으로 추정된다. 본 연구 결과는 한우, 제주흑우, 이들의 교배후손에서 MC1R 유전자형이 모색 표현형을 결정하며, ASIP 유전자형은 모색의 변이에는 핵심적인 역할을 수행하지 않는다는 것을 시사한다.

Safety Assessment of Foods Produced Using Recombinant DNA Techniques

  • Toyoda, Masatake
    • Toxicological Research
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    • 제17권
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    • pp.167-171
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    • 2001
  • The introduction of genetically modified crops has raised concerns regarding safety issues over the insertion of foreign genes into plant genomes using recombinant DNA technology. Since 1991 in Japan, 29 foods and 6 food additives have been evaluated, based on the "Guideline for Safety Assessment", before these foods were marketed. The MHW, however, decided that safety assessment of such foods and food additives should be legally imposed. because soon such foods and food additives are expected to circulate globally and a new system for assessing safety of such foods and food additives at a pre-market stage is necessary, in order to avoid the distribution of any genetically modified foods that have had no safety assessment. The MHW published relevant announcements to amend existing regulations on 1 May 2000. "Standards for safety assessment of seed plant" is established based on a concept of substantial equivalence, and applicable to the products which are regarded as equivalent to the existing products used as foods and food additives. The characterization of the food products entails consideration of the molecular characterization. phenotypic and compositional characteristics, key nutrients and toxicants, and toxicity and allergenicity of the introduced proteins, and if there are indications of unintended effects of the modification, whether further safety testing (animal studies etc.) is needed should be considered. Safety and wholesomeness studies with whole foods should be care fully designed in order to avoid nutritional imbalances causing artifacts and uninterpretable results as was the case of Dr. Pusztaiis report. A case study of genetically modified soybeans (glyphosate-tolerant soybeans) on the immune system of rats and mice is shown. Chemical compositions were also compared with those of the non-GM soybeans. The studies failed to detect any differences in immuno-toxic activity.muno-toxic activity.

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Cancer/Testis OIP5 and TAF7L Genes are Up-Regulated in Breast Cancer

  • Mobasheri, Maryam Beigom;Shirkoohi, Reza;Modarressi, Mohammad Hossein
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제16권11호
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    • pp.4623-4628
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    • 2015
  • Breast cancer still remains as the most frequent cancer with second mortality rate in women worldwide. There are no validated biomarkers for detection of the disease in early stages with effective power in diagnosis and therapeutic approaches. Cancer/testis antigens are recently promising tumor antigens and suitable candidates for targeted therapies and generating cancer vaccines. We conducted the present study to analyze transcript changes of two cancer/testis antigens, OIP5 and TAF7L, in breast tumors and cell lines in comparison with normal breast tissues by quantitative real time RT-PCR for the first time. Significant over-expression of OIP5 was observed in breast tumors and three out of six cell lines including MDA-MB-468, T47D and SKBR3. Not significant expression of TAF7L was evident in breast tumors but significant increase was noted in three out of six cell lines including MDA-MB-231, BT474 and T47D. OIP5 has ssignificant role in chromatin organization and cell cycle control during cell cycle exit and normal chromosome segregation during mitosis and TAF7L is a component of the transcription factor IID, which is involved in transcription initiation of most protein coding genes. TAF7Lis located at X chromosome and belongs to the CT-X gene family of cancer/testis antigens which contains about 50% of CT antigens, including those which have been used in cancer immunotherapy.

Inhibition of p90RSK activation sensitizes triple-negative breast cancer cells to cisplatin by inhibiting proliferation, migration and EMT

  • Jin, Yujin;Huynh, Diem Thi Ngoc;Kang, Keon Wook;Myung, Chang-Seon;Heo, Kyung-Sun
    • BMB Reports
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    • 제52권12호
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    • pp.706-711
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    • 2019
  • Cisplatin (Cis-DDP) is one of the most widely used anti-cancer drugs. It is applicable to many types of cancer, including lung, bladder, and breast cancer. However, its use is now limited because of drug resistance. p90 ribosomal S6 kinase (p90RSK) is one of the downstream effectors in the extracellular signal-regulated protein kinases 1 and 2 (ERK1/2) pathway and high expression of p90RSK is observed in human breast cancer tissues. Therefore, we investigated the role of p90RSK in the Cis-DDP resistance-related signaling pathway and epithelial-mesenchymal transition (EMT) in breast cancer cells. First, we discovered that MDA-MB-231 cells exhibited more Cis-DDP resistance than other breast cancer cells, including MCF-7 and BT549 cells. Cis-DDP increased p90RSK activation, whereas the inactivation of p90RSK using a small interfering RNA (siRNA) or dominant-negative kinase mutant plasmid overexpression significantly reduced Cis-DDP-induced cell proliferation and migration via the inhibition of matrix metallopeptidase (MMP)2 and MMP9 in MDA-MB-231 cells. In addition, p90RSK activation was involved in EMT via the upregulation of mRNA expression, including that of Snail, Twist, ZEB1, N-cadherin, and vimentin. We also investigated NF-κB, the upstream regulator of EMT markers, and discovered that Cis-DDP treatment led to NF-κB translocation in the nucleus as well as its promoter activity. Our results suggest that targeting p90RSK would be a good strategy to increase Cis-DDP sensitivity in triple-negative breast cancers.

보툴리눔 신경독소 A를 중화하는 재조합 항체의 제조와 특성 분석 (Production and Characterization of a Recombinant Antibody Neutralizing Botulinum Neurotoxin A)

  • 박홍규;최미영
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제18권1호
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    • pp.295-301
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    • 2017
  • 보툴리눔 신경독소는 콜린성 신경말단(부)을 선택적으로 공격하여 신경마비를 일으키는 신경독소로서, 그람양성을 띠고 내성포자를 형성하는 절대혐기성 세균인 보툴리눔 균(Clostridium botulinum)이 만들어낸다. 이 중 보툴리눔 A형 독소(BoNT/A)는 음식물과 물을 오염시킬 수 있으며 생물 무기나 생물 협박물질로 사용될 수도 있다. 이 때문에 독성을 탐지할 수 있는 예민한 분석방법과 중독을 치료할 수 있는 효능 있는 항독소를 개발해낼 필요성이 제기되어 왔다. 본 연구에서는 BoNT/A를 중화할 수 있는 단일클론 항체(mAb)를 생산하기 위하여 BoNT/A로 면역된 토끼의 항혈청에서 유래한 scFv 라이브러리를 인간 IgG와 융합시켰다. 그렇게 재조합된 scFvIgG 항체 단백질을 안정된 세포주에서 발현시켰고 항체 친화 크로마토그래피를 사용하여 scFvIgG mAb 단백질을 정제하였다. ELISA로 정제된 scFvIgG mAb 단백질의 효율성을 확인하였고, in vivo 실험으로 BoNT/A에 대한 중화능을 시험하였다. 독성 중화능 실험은 마우스를 사용하여 수행하였는데, 그 결과 scFvIgG 항체(10 ug)는 BoNT/A(100,000 $LD_{50}$)의 독성이 주입된 마우스를 완전히 방어하지는 못하지만 마우스의 생존 기간을 현격하게 연장시키는 것이 확인되었다. 이러한 결과들은 이 scFvIgG mAb가 BoNT/A를 중화하는 효능을 가지고 있다는 점을 제시한다.