Eightyseven strains of indigenous Rhizobia were isolated from the nodule of soybean cultivar, Danyup, cultivated in four different soils sampled from continuously soybean cultivated and newly reclaimed fields. The strains were grouped into Bradyrhizobium japanicum (slow-grower:55 strains) and Rhizobium fredii (fast-grower: 32 strains). The both groups could be divided into two sub-groups according to the denitrification characteristics, that is, denitrifying fast-grower (F-I), nitrate respiring fast-grower (F-II), denitrifying slow-grower (S-I). and nitrate respiring slow-grower (S-II). Among the 87 isolates, F-I, F-II, S-I and S-II sub-groups were 10, 22, 48 and 7 strains, respectively. The one-and two-dimensional polyacrylamide gel electrophoretic pattern of the four sub-groups were compared and discernible difference was observed between fast and slow-grower, but the difference was not discernible between subgroups within the same growth rate group.
Symbiotic effectiveness and significance of Bradyrhizobium japonicum strains in five serogroups which were consisted of three corresponding serotype strains, respectively, indigenous to Korean soils were evaluated in terms of utility of strain serogroup for symbiotic improvement on soybean plant. The nodulation by rhizobia of each serogroup on four soybean cultivars(Danweonkong, Kwangkyo, Pangsakong, and Eunhakong) was good in order of USDA 123 > YCK 150 > YCK 117 > YCK 141 > USDA 110 serogroup members. Shoot dry weight of soybean was relatively high with USDA 110 serogroup members as well as with YCK 141 serogroup members, whereas the effectiveness of USDA 123 serogroup members was the lowest among the serogroups examined. In particular, Pangsakong among soybeans inoculated with five-serogroup members was positively outstanding on nodulation and shoot dry weight of the plant. Overall, symbiotic parameters of serogroup members associated with soybean plant such as nodule number, nodule mass, $N_2$ase activity, and shoot dry weight showed significantly different responses at level of 1% probability among both rhizobial serogroups and soybean cultivars, respectively. The rate in symbiotic similarity of the members of each serogroup from F-test ($$P{\leq_-}0.05$$) was 100% for nodule No., 90% for $N_2$ase activity. and 80% for soybean shoot dry weight. Taken together, the results indicated that the serological grouping of B. japonicum could be strongly useful for improving the symbiotic effectiveness hetween soybean and Rhizobium.
Kim, Kwang-Sik;Kim, Kil-Yong;Son, Bo-Gyun;Lee, Young-Hwan;Kim, Yong-Woong;Seong, Ki-Young
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.25
no.2
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pp.181-188
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1992
This study was carried out to evaluate the fate of inoculant Bradyrhizobium japonicum and the inoculation effect on soybean in complex soil environment. To moniter Rhizobium strains from the root, streptomycine and streptomycine and nalidixic acid resistant marker strains were prepared by spontaneous mutagenesis. The characteristics and properties of antibiotic marked strains were not altered by the mutagenesis. The comparison of properties of wild type and antibiotic resistant Bradyrhizobium strains are summarized as follow : 1) The strains of USDA110K-$STR^r$, USDA110N-$STR^r$ and R318-$STR^r$ showed weak tolerance to pH 9.0. The utilization of carbon sources by fast growing group was different from that of slow growing group. The marked strains of R214-$STR^rNAL^r$, USDA110K-$STR^r$ and USDA110N-$STR^r$ was doubtful in utilization of sorbitol and R138-$STR^rNAL^r$ was doubtful in utilization of xylose as a carbon source. 2) By examining the agglutination reaction of serogroups, the strains used were identified as different ones. There were no differences between wild type and marked strains in agglutination titer values. 3) The plasmid size of fast group was slightly greater than that of slow group. However, there was no differences in plasmid size between the wild type and antibiotic resistant strains. This result indicates that the antibiotic resistance was not encoded in plasmid. 4) The recovery of the inoculated strains was up to 12.5 % in soybean cultivated soil and was up to 25 % in soybean uncultivated soil. 5) When the wild type or marked strains were inoculated. there was no significant effect on soybean plant, whereas the inoculation effect was pronounced in soybean uncultivated soil. The inoculation effect seemed to be more pronounced in wild type strains than antibiotic resistant strains. however, the difference was not significant.
Malonate is a three-carbon dicarboxylic acid. It is well known as a competitive inhibitor of succinate dehydrogenase. It occurs naturally in biological systems, such as legumes and developing rat brains, which indicates that it may play an important role in symbiotic nitrogen metabolism and brain development. Recently, enzymes that are related to malonate metabolism were discovered and characterized. The genes that encode the enzymes were isolated, and the regulation of their expression was also studied. The mutant bacteria, in which the malonate-metabolizing gene was deleted, lost its primary function, symbiosis, between Rhizobium leguminosarium bv trifolii and clover. This suggests that malonate metabolism is essential in symbiotic nitrogen metabolism, at least in clover nodules. In addition to these, the genes matB and matC have been successfully used for generation of the industrial strain of Streptomyces for the production of antibiotics.
Nine dichlorprop-degrading bacteria and three pairs of bacteria showing syntrophic metabolism of the herbicide were isolated from soils, and their genetic and phenotypic characteristics were investigated. Analysis of 16S rDNA sequences indicated that the isolates were related to members of the genera, Sphingomonas, Herbaspirillum, and Bradyrhizobium. Twelve different chromosomal DNA patterns were obtained by polymerase-chain-reaction (PCR) amplification of repetitive extragenic palindromic (REP) sequences from the 15 isolates. The isolates were able to utilize the herbicide dichlorprop as a sole source of carbon and energy and their dichlorprop derogative pathways were induced by the presence of dichlorprop. Most of the isolates and syntrophic pairs were able to degrade both (R)- and (S)-dichlorprop, but strain DP522 exhibited enantioselective degradation of (S)-dichlorprop. The isolates degraded 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2-methyl-4-chlorophenoxyacetic acid , and mecoprop, in addition to dichlorprop. Oxygen uptake experiments indicated that most of the isolates degraded dichlorprop through 2,4-dichlorophenol.
The dual inoculation response of soybean with rhizobium and mycorrhiza was examined in pot vermiculite and field soils. In order to select a symbiotically compatible mycorrhiza with Bradyrhizobium japonicum, a highly germinating spore among 60 strains from 32 upland soils in southern part of Korea was obtained in Acaulospora sp., Gigaspora sp. and Glomus sp., respectively. As a result of dual inoculation of Glycin max cv. Dajangkong and Eunhakong both with $1{\times}10^8$cells of B. japonicum YCK 213 and 10 spores of each mycorrhiza in vermiculite pot, only Glomus sp. treatment together with the rhizobium showed significant increase ($P{\leqq}0.05$) both in shoot dry wt and nodule mass of not Eunhakong but Dajangkong. In red-yellow soils with pH 5.2($1:5H_2O$) and 203 mg of Lancaster P per kg of soil, in which $10^3$ cells of B. japonicum and $10{\pm}0.2$ spores of mycorrhizae per gram of soil were naturalized, grain yield of G. max cv. Dajangkong was increased to 3.9% by dual inoculation both of $4.8{\times}10^6$cells of B. japonicum and 10 spores of mycorrhizae per two seeds under condition applied with 30 kg $P_2O_5$ and 34 kg $K_2O$ per hectare compared to conventionally fertilized plot (2.75 MT $ha^{-1}$) added with 30 kg N $ha^{-1}$. However, there was not significant.
Kang, Ui-Gum;Jung, Yeun-Tae;Somasegaran, Padma;Hoben, H.;Bohlool, B. Ben
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.24
no.1
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pp.61-68
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1991
Thirty Bradyrhizobium japonicum isolates (10 strains per each soil) from 1 uncultivated [Sangnam(Soil 1), Milyang]- and 2 cultivated [Dong(Soil 2)and Chinbuk(Soil 3), Changweon] upland soils in Yeongnam area were evaluated on their symbiotic effectiveness to soybean [Glycin max (L.)] cv. Korean Jangbaekkong and American Clark and examined on their serological diversity. The results obtained were summarized as follows : 1. On symbiotic effectiveness of B. japonicum with plant genotypes, isolates showed a relatively high value of nodule mass in Jangbaekkong cv. and of shoot dry weight and total nitrogen in Clark cv. demonstrating the order of Soil 1> Soil 2> Soil 3 isolates. 2. Among 30 B. japonicum isolates, YCK 141 showed the best effectiveness on mean nitrogen fixation of two cultivars. 3. Thirty indigenous B. japonicum showed 6 types of serological diversities in the immunoblot analysis which were present in various proportions at Soil 2(5) and Soil 3(5) except Soil 1 where all isolates fell into the YCK 117 serogroup. And their distribution order was serotype YCK 117( 12 strains) > USDA 1l0(5strains), USDA 123(5 strains) > YCK 150(4 strains) > YCK 141(3 strains) > YCK 226(1 strain). 4. Especially, 10 isolates from Soil 1, an uncultivated orchard, showed a very homologous pattern in not only effectiveness but serological distribution. It seemed to indicate that the isolates were typically affected by numerous physical and environmental factors of the soil.
As a result of conducting a cultural experiment of tomato using chicken feather protein hydrolysate (CPH) which was mass produced by keratin protein degrading bacterium Chryseobacterium sp. FBF-7 (KACC 91463P), we found that the stem and the root of tomato showed significant improvement in growth. For the purpose of phylogenic interpretation, a comparison was drawn between the effect of CPH, a treated CPH and untreated, on the changes of bacterial populations by 454 pyrosequencing based on 16S rRNA gene sequences. Tomato rhizosphere soil untreated with CPH (NCPH) showed 6.54 Shannon index from 3,281 sequence reads, and the rhizosphere soil treated with CPH (TCPH) showed 6.33 Shannon index from 2,167 sequence reads, displaying that it does not affect the diversity. Bacterial populations were composed of 19 phyla in the rhizosphere soil, and the phylum Proteobacteria occupied 40% of total bacterial populations. Bradyrhizobium, Agromonas, Nitrobacter, and Afipia (BANA group) which belong to Bradyrhizobiaceae were abundant and commonly detected in both the treated and untreated soils, suggesting the dominance of bacterial group in rhizosphere soil. The results obtained showed that CPH treatment does not affect the indigenous bacterial populations present in the rhizosphere soil.
Kang, Ui-Gum;Jung, Yeun-Tae;Ha, Ho-Sung;Somasegaran, Padma;Bohlool, B. Ben
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.26
no.4
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pp.265-270
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1993
The symbiotic dynamics of Bradyrhiwbium japonicum YCK strains indigenous to Korean soils were investigated accordingly to their competitive conditions for nodulation. For this experiment the single strain inoculants of YCK strains and the mixed inoculants of one YCK strain and one USDA strain were applied to Korean Jangbaekkong and American Clark soybeans at mollisol soils(Torroxic Haplustoll, pH 6.8). The results were summarized as follows : 1. The symbiotic effectiveness of B. japonicum YCK strains was increased on the average of nitrogen accumulation by mixing with USDA strains, especially with strain USDA 110. 2. The effectiveness of each mixed inoculant was affected by soybean cultivar. 3. YCK strains occupied on the average of 83 and 86 % of the nodules against strain USDA 110 on Jangbaekkong and Clark soybeans, respectitvely. 4. The most effective strain among three YCK strains was strain YCK 213 as a single inoculant and was strain YCK 141 as a mixed inoculant with USDA strains. 5. The mixed inoculants of YCK strains and strain USDA 123 showed antagonism for nodulation.
Expermient were conducted to determine the effect of phosphorus stress on bacteroid content and energy status of soybean (Glycine max [L.] Merr.) nodules. Plants inoculated with Bradyrhizobium japonicum MN 110 were grown with P-stressed (0.05 mM-P) and control (1 mM-P) treatment in the greenhouse. Phosphorus stress decreased nodule mass per plant and nodule mass to whole plant mass ratio. Phosphorus concentration in leaf, stem and root tissues were reduced by 75% but in nodule tissue was reduced only by 40% under phosphorus stress during 3 week experimental period. The bacteroid content per unit nodule mass and the distribution of total nitrogen and total phosphorus among the bacteroid and plant cell fractions of nodule were not affected significantly by phosphorus stress. Regardless of phosphorus treatment, 22% of the nitrogen and 27% of the phosphorus in whole nodules were associated with the bacteroid fraction. The ATP and total adenylate concentrations in and energy charge of whole nodule were decreased 77%, 46% and 37%, respectively, by phosphorus stress. The ATP concentration in and energy charge of the host plant cell fraction of nodules were decreased 86% and 59%, respectively, but these parametres in bacteroid in nodules were not affected by phosphorus stress. These results indicated that nodule is a strong phosphorus sink and that nodule growth and development are regulated to maintain a high phosphorus and energy content in bacteroid even when the host plant is subjected to phosphorus deficiency.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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