Two extracellular proteases, EP I and EP II, from cells of Oligotropha carboxydovorans (formerly Pseudomonas carboxydovorans) DSM 1227 grown in nutrient broth were purified to greater than 95% homogeneity in five steps using azocasein as a substrate. The final specific activities of EPs I and II were 214.9 and 667.4 units per mg of protein. The molecular weights of native EPs I and II were determined to be 23,000. Sodium dodecyl sulfate-gel electrophoresis revealed the two enzymes to be monomers. The enzymes were found to be serine-type proteases. The activity of EP I was stimulated by Ca2+, Mg2+, and Ba2+, but that of EP II was not. The enzymes were completely inhibited by Fe2+, Hg2+, Co2+, Zn2+, and Cd2+. EDTA and EGTA exhibited a strong inhibitory effect on EP I. The optimal pH for the two enzymes was pH 9.0. The optimal temperatures for EP I and II were 60 and 50$^{\circ}C$, respectively. The enzymes were stable under alkaline conditions. The thermal stability of EP I was higher than that of EP II. Cell-free extracts did not inhibit the purified enzymes. The enzymes were active on casein, azocasein, azocoll, and carbon monoxide dehydrogenase, but weakly active with bovine serum albumin.
A bimetallic chip made of gold and silver was investigated in intensity interrogation mode to confirm enhancement of the SPR sensor resolution. Both reflectance curves of the bimetallic chip and the conventional gold chip was acquired and compared. The line width of the reflectance curve of the bimetallic chip was narrower than that of the conventional Au chip, resulting in steeper tangential slope. The reflectance was monitored at the angle related to the steepest tangential slope. The change in reflectance of the bimetallic chip was larger than that of the Au chip. The critical angle was analyzed by differentiating the reflectance with respect to incident angle twice. Acquiring the critical angle regarding to the sample informs the refractive index of the sample. Using various concentration of Bovine Serum Albumin, we confirmed that refractive index was linearly related to variation of reflectance of the bimetallic chip.
In order to evaluate the effect of fabrication methods on the controlled release of an antibiotic from a polymeric device, two types of polyurethane-cefadroxil matrix were prepared by the solvent casting method or the freeze drying method, using bovine serum albumin as a pore former. The amount of cefadroxil released from various formulations at $37^{\circ}C$ was measured by HPLC. The duration of antimicrobial activity of matrices against S. aureus was evaluated by measuring the diameters of the inhibition zone. The morphology of the matrices was investigated by scanning electron microscopy (SEM). Changing the fabrication method could alter the release rate of cefadroxil from the matrix. The matrix fabricated by the freeze drying method had more porous inner structure and showed higher release rate than that prepared by the solvent casting method. However, the duration of antimicrobial activity was shorter when the matrix was fabricated by the freeze drying method.
Near infrared(NIR) spectral data have been used for the noninvasive analysis of various biological samples. Nonetheless, absorption bands of NIR region are overlapped extensively. It is very difficult to select the proper wavelengths of spectral data, which give the best PCR(principal component regression) models for the analysis of constituents of biological samples. The NIR data were used after polynomial smoothing and differentiation of 1st order, using Savitzky-Golay filters. To find the best PCR models, all-possible combinations of available principal components from the given NIR spectral data were derived by in-house programs written in MATLAB codes. All of the extensively generated PCR models were compared in terms of SEC(standard error of calibration), $R^2$, SEP(standard error of prediction) and SECP(standard error of calibration and prediction) to find the best combination of principal components of the initial PCR models. The initial PCR models were found by SEC or Malinowski's indicator function and a priori selection of spectral points were examined in terms of correlation coefficients between NIR data at each wavelength and corresponding concentrations. For the test of the developed program, aqueous solutions of BSA(bovine serum albumin) and glucose were prepared and analyzed. As a result, the best PCR models were found using a priori selection of spectral points and the final model selection by SEP or SECP.
For a survey of the occurrence of aflatoxin M$_{1}$ (AFM$_{1}$) in domestic cow's milk, we developed an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system, and quantitated the toxin in cow's milk. In order to produce specific antibodies AFM, conjugated to bovine serum albumin (AFM$_{1}$-BSA) and Freund's adjuvant were immunized subcutaneously to rabbits. By use of the antiserum showing the highest titer and AFB$_{1}$-HRP conjugate, we established a competitive direct ELISA (cdELISA) for AFM$_{1}$, whose detection limit was 0.003 ppb. The cross-reactivities of the antiserum against aflatoxin M$_{1}$ M$_{2}$, B$_{1}$, B$_{2}$, G$_{1}$, G$_{2}$, B$_{2a}$, and G$_{2a}$, were 100, 29.9, 25.0, 2.7, 13.0, 0.65, 0, and 0%, respectively. When the cdELISA was applied to the cow's milk spiked with AFM$_{1}$ and followed by cleanup with C$_{18}$ cartridge, the mean recovery of the assay was 104% (mean of CV, 6.4%) in the final concentration of 0.01-1 ppb (10-1, 000 ppt). When cow's milk samples gathered from markets and farms were assayed by the cdELISA, the mean concentration and SD of AFM$_{1}$ was 80.4 $\pm$ 55.0 ppt (n=64; range, 5.6-280 ppt).
A bacterial strain L1 producing a thermostable esterase was isolated from soil taken near a hot spring and identified as Bacillus stearothermophilus by its microbiological properties. The isolated thermostable esterase was purified by ammonium sulfate fractionation, ion .exchange and hydrophobic interaction chromatographies. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 50,000 by SDS-PAGE. Its optimum temperature and pH for hydrolytic activity against PNP caprylate were $85^{\circ}C$ and 9.0, respectively. The purified enzyme was stable up to $70^{\circ}C$ and at a broad pH range of 4.0-11.5 in the presence of bovine serum albumin. The enzyme was inhibited by phenylmethylsulfonyl fluoride and diethyl p-nitrophenyl phosphate, indicating the enzyme is a serine esterase. The enzyme obeyed Michaelis-Menten kinetics in the hydrolysis of PNPEs and had maximum activity for PNP caproate ($C_6$) among PNPEs ($C_2-C_12$) tested.
${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was highly purified with the following sequence of steps; DEAE-cellulose, CM-cellulose, and Sephadex G-200 gel filtration chromatograpies. The specific activity of the purified ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was 2.2 units/mg protein with 12.9 % yield and 196.2 fold purity. The purified ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B showed single band on polyacrylamide gel electrophoresis. The final preparation of ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was completely free friom arylsulfatase and ${\beta}$-glucuronidase. ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B had pH optimum of 4.5 in 0.5 M sodium citrate buffer. The molecular weight of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B was 133,000 by Sephadex G-200 gel filtration. The Km value of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B using p-nitrophenyl-N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminide as substrate was 1.0 mM and $V_{max}$ was 0.014 ${\mu}$ mole/min. ${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was stable at $55^{circ}C$ for 70 minutes. The crude ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosamiinidase in 70 % ammonium sulfate retained 93 % activity after 7 months storage at -$55^{circ}C$. Bovine serum albumin, sodium chloride, and phosphate activated ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B. N-Acetyl-D-glucosamine, ${\alpha}$-methyl-D-mannoside, and acetate inhibited ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B.
The specificity of conjugation site for coating ligands was investigated using toluene-bovine serum albumin (BSA) conjugates in which BSA was conjugated at the position of o-, m-, and ${\rho}-toluic$ acid. Toluene-BSA conjugated at ${\rho}-position$ showed a binding activity of about 89-95%, whereas, those conjugated at o- and m-position of toluene exhibited a binding activity of 5 and 11%, respectively. On the basis of the above result, coating ligands with various proteins (OVA, BSA, KLH) were compared by conjugating with $\rho-toluic$ acid, and toluene-KLH was considered as the best coating ligand for this ELISA. Indirect competitive ELISA method was developed using anti-toluene antibody and $\rho-position$ conjugated toluene-KLH. The dose-response curve constructed after kinetic and optimization studies showed a 1${\times}$10-4 - 1${\times}$102 mM detectable response range with 0.1 ${\mu}M$ detectability. In specificity test of the antibody, the binding capabilities of aromatic compounds substituted with nitro-, alkyl-, chloro-, and hydroxyl group were larger rather than those of aromatic compounds (benzene, toluene and xylene) themselves. Also, tests with soil and water samples that had been spiked with toluene resulted in 102.7-113.7% recovery.
The study investigated the effect of carrier composition (ionic strength and pH) on the retention of various proteins in flow field-flow fractionation (Flow FFF) as well as the conformational change of Bovine Serum Albumin (BSA) with urea concentration, storage time and temperature. The study found that the retention of protein in Flow FFF increased with the ionic strength of the carrier liquid. Most proteins were well solubilized at pH = 7-8. The hydrodynamic diameters obtained from Flow FFF retention data agree well with theoretical values. The retention increased and the peak shape became distorted at extreme pH conditions of the carrier solution. The selected carrier composition for comparison between the literature value of proteins was 0.05 M tris buffer solution with a pH of 8. Storing BSA at 4 ±2℃ over a period of three months resulted in slow dimerization. Also, in case of the storage of BSA at 37 ±5℃ for one week, the retention of both BSA monomer and dimer increased with the urea concentration. Finally, the structural composition of specific enzymes: malonyl-CoA decarboxylase (MCDC) and malonyl-CoA synthesis (MCS) was determined by using Flow FFF at specific carrier solutions. The molecular weight of the natural MCDC was determined to be 208 kDa, which means it is a homotetramer, while that of the MCS was determined to be 47 kDa, which means it is a monomer.
This paper investigated the effects of ionic strength in the medium on a preconcentrator for a protein sample with low concentration. The preconcentration chip was designed and fabricated using a polydimethylsiloxane replica through standard lithophotography. A glass substrate is silanized prior to functionalizing the nanoparticles for self-assembly at a designed region. Due to the overlap of electrical double layers in a nanofluidic channel, a concentration polarization effect can be achieved using an electric field. A nonlinear electrokinetic flow is induced, resulting in the fast accumulation of proteins in front of the induced ionic depletion zone, so called exclusion-enrichment effect. Thus, the protein sample can be driven by electroosmotic flow and accumulated at a specific location. The chip is used to collect fluorescein isothiocyanate-labeled bovine serum albumin (FITC-BSA) diluted in phosphate-buffered saline (PBS) buffer solution. Different concentrations of the buffer media were studied herein. Fluorescence intensity images show that the buffer concentration of 4 mM is more appropriate than all the other ones. The sample of FITC-BSA with an initial concentration of $10{\mu}M$ in the 4 mM PBS solution increases its concentration at the desired region by up to 50 times within 30 min, demonstrating the results in this investigation.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.