Though anatomical and histological investigations on the novel threadlike and corpuscular structures, Bonghan duct(BHD) and Bonghan corpuscles(BHC) of internal organs of rats and rabbits were extensively studied. In this article we introduce the refined method to observe the BHD and BHC on the internal organs of mice. This development is needed because immunohistochemical analysis and other modern biological techniques were mostly applicable only to mice but not to rats and rabbits. We made uses of grazing effect of light as well as discriminating technique of BHD/C from fibrin and take the novel structures, BHD/C on mouse internal organ. The specimens taken were examined by hematoxyline and eosin(H & E) and revealed as novel structures. Our method described herein to take BHD/C characterization of mouse, especially for stem cell related researches.
We report the new threadlike structures outside the blood vessels of mice. For this, we developed an in-situ searching method of the structure by vital staining with the dye of acridine orange and using a fluorescent stereomicroscope designed specifically for this purpose. We consider that the newly found threadlike structure might be rediscovery of the extra-vascular Bonghan duct which was reported in 1963 by Bonghan Kim.
동양의학 이론의 주요 관심사인 경락의 연구에 있어 생체 내 신호전달 체계와 해부학적 실체에 대한 단서를 확인하기 위하여 본 실험을 수행하였다. 1960년대 이루어졌던 봉한학설의 이론과 문헌을 근거로 하여 토끼의 복막에 존재하는 봉한관으로 생각되는 반투명의 회백색의 탄성이 있는 섬유상 구조물을 분리하여 조직학적으로 관찰하였다. 각 조직 샘플은 봉한관 확인을 위하여 hematoxylin eosin과 Masson's trichrome 염색, 교원섬유는 Van Gieson's 염색, 신경은 Kluver Barrera's luxol fast blul 염색을 하여 비교함으로써 구성성분에 대한 분석을 실시하였다. 광학현미경상에서 관찰된 조직들은 교원섬유와 신경으로 구성된 집합체였으며 다발의 형태를 이루고 있었고, 여러 개의 myoid spindle형태의 세포들이 종으로 배열되어 있었다. 이러한 세포들은 신경의 슈반세포이며 봉한관의 myoid형태의 세포들과 같은 소견이었다. 같은 부위를 전자현미경으로 관찰한 결과 잘 배열된 교원섬유와 신경을 관찰할 수 있었으며 신경다발 사이로 교원섬유가 둘러싸고 있었다. 이상의 결과를 종합해 보면 복막에 존재하는 봉한관은 교원섬유와 어우러진 신경임을 확인할 수 있었고 신경과 어우러져 존재하는 교원섬유의 절연성과, 침의 치료에 있어 교원섬유가 주위의 신경과의 신호전달 체계에 영향을 미치는 점을 고려하여 볼 때 교원섬유와 신경 그리고 혈관의 유기적인 관계 속에서 교원섬유의 새로운 역할 규명에 대한 연구가 필요할 것으로 사료된다.
During a last decade, there have been considerable reports of novel thread-like structures (NTSs) in animals. The NTSs are thought to be a part of the Bonghan Ducts (BHD) system, which is described as a newly-discovered circulatory system. Networks of BHD system are completely different from blood vessels or lymphatic system in animal. To demonstrate intravascular NTSs, it is necessary to develop the effective method to observe the NTSs morphology. We considered several methods to study morphologically with NTSs. There are not explaining such structure in the current knowledge of anatomy and physiology. But we found very effective and easy method to study NTSs and BHD by agar-mediated embedding method.
Objective: We took intravascular threadlike structures from rat aortas to investigate their histological characteristics consistent with the intravascular Bonghan duct. Methods: Gomori s silver impregnation method, in addition to routine hematoxylin and eosin staining, was applied to demonstrate the characteristic feature of the intravascular threadlike structures. Results: These two staining methods clearly showed that the intravascular threadlike structures had unique features of argyrophilic reticular fibers and heavily stained oval or rod-shaped nuclei in them. Conclusion: The results are strong evidences for identifying threadlike structure as the intravascular Bonghan duct.
미분간섭현미경법과 아크리딘-오렌지(acridine-orange) 형광 염색을 이용하여 쥐 혈관 내의 실 모양 구조물을 관찰하였다. 공초점현미경법과 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin) 염색을 통해 피브린, 모세혈관, 소정맥, 소동맥 혹은 림프관의 핵 분포와 뚜렷이 구별되는 혈관 내 실 모양 구조물의 핵 분포 패턴을 얻어낼 수 있었다. 이 실 모양 구조물의 생리적 기능을 침술과 연관하여 논의하였다. 특히, 이 실 모양 관을 통한 약물의 흐름이 약침의 기전에 해당할 것이라는 가설을 제기하였다.
Objective : In 1960's Bonghan Kim's team found BongHan(BH) ducts which were presumed as acupuncture meridians and BH corpuscles. They asserted Bonghan theory and SanAl theory which was involved in cell division and cell restoration. However, many other experiments which had been operated to demonstrate and find the existence of BH ducts had failed because of the secret of blue stain drugs. During the last several years, BongHan theory has been revived through experimental researches to find the anatomical structures of BH ducts and corpuscles by Soh's Biomedical Physics Lab. Soh's research team used the staining with Janus Green B, Alcian blue, nanoparticles and Acridine Orange. We used DAPI staining to find the existence of BH ducts and the corpuscles and to observe nuclear arrangement. Methods : We used japan white rabbits as experimental animals. BH ducts and corpuscles were stained with DAPI. The nucleus configuration in BH ducts stained with DAPI were observed with microscope. Results : In this study, we found thread like structures in silver white color distinguished from the blood vessels, nerves and lymph vessels. These thread like vessels in the linear duct shape were connected to same colored mass in the ball shape. Thread like structures we found could be separated easily from the surrounding other organ mass. The nuclei of the thread like structure in DAPI staining, are about 10${\sim}$20${\mu}m$ length, in rod shape and linear arrangement. Conclusion : We concluded that the thread like structure we found was same vessel reported by Soh's research team, BongHan ducts and corpuscle.
목적 : 본 논문에서는 경락을 추적하기 위한 피내(皮內) 알시안 블루(Alcian blue) 염색 방법을 기술한다. 방법 : 1% 알시안 블루 용액을 31게이지 바늘이 달린 0.5mL 인슐린 주사기를 사용하여 경혈 지점에 피내 주사한 후 실체 현미경하에서 수술, 관찰하였다. 면역조직화학적 방법을 사용하여 해당 조직을 레이저 공초점주사현미경으로 관찰하였다. 결과 : 알시안 블루로 염색되고 피하로 이어지는 실 모양 구조물을 관찰하였다. 이 조직 내에서 특징적인 막대모양 핵 배열 및 $1-2{\mu}m$크기의 데옥시리보핵산 입자가 관찰되었다. 또한 경혈 조직 내에서 풍부한 모세혈관총 및 말초신경 말단, 그리고 약 $300{\mu}m$크기의 소체형 구조물을 확인하였다. 결론 : 경혈 지점의 피내에서 발견된 특징적 실 모양 구조물 및 소체형 구조물은 각각 표층 봉한관 및 소체로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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