Objective : The purpose of this study was to evaluate the different patterns of bone loss between the lumbar spine and the femur after ovariectomy in rats. Methods : Twenty-four female Sprague-Dawley rats underwent a sham operation (the sham group) or bilateral ovariectomy (the ovariectomized group). Four and eight weeks after operation, six rats from each of the two groups were euthanized. Serum biochemical markers of bone turnover including osteocalcin and alkaline phosphatase (ALP), which are sensitive biochemical markers of bone formation, and the telopeptide fragment of type I collagen C-terminus (CTX), which is a sensitive biochemical marker of bone resorption, were analyzed. Bone histomorphometric parameters of the 4th lumbar vertebrae and femur were determined by micro-computed tomography. Results : Ovariectomized rats were found to have higher osteocalcin, ALP and CTX levels than sham controls. Additionally, 8 weeks after ovariectomy in the OVX group, serum levels of osteocalcin, ALP and CTX were significantly higher than those of 4 weeks after ovariectomy. Bone loss after ovariectomy was more extensive in the 4th lumbar spine compared to the femur. Bone loss in the 4th lumbar spine was mainly caused by trabecular thinning, but in the femur, it was mainly caused by trabecular elimination. Conclusion : The present study demonstrates different patterns of bone loss between the 4th lumbar spine and the femur in ovariectomized rats. Therefore, when considering animal models of osteoporosis, it is important that bone sites should be taken into account.
This study was performed to evaluate the effect of red-yeast-rice on blood lipids and also to investigated the relation of blood lipids, bone related hormones, and bone mineral density in overiectomized rats. Forty female rats (body weight $210\pm5$g) were divided into two groups. The rats in the first group were ovariectomized which the others received sham operation (SHAM). And then each rat group was further divided into control diet $(casein\;20\%)$ and red-yeast-rice powder supplemented $(0.1\%)$ diet group. All rats were fed on experimental diet and deionized water ad libitum for 9 weeks. Bone mineral density (BMD) and bone mineral content (BMC) were measured using PIXImus in spine and femur. Bone formation and bone resorption were measured by serum osteocalcin and urinary deoxypyridinoline (DPD) crosslinks value. Serum growth hormone, IGF-1 and calcitonin were analyzed using radioimmunoassay kits. The red-yeast-rice group had significantly lower the blood triglyceride concentration and had lower the blood total cholesterol concentration than casein group did in ovariectomized rats. And the red-yeast-rice group than casein group in ovariectomized rats. The red-yeast-rice group had significantly lower the atherogenic index than control group within the ovariectomized groups. In the experimental rats, serum total cholesterol concentration was negatively correlated with femur BMC and crosslink value. Crosslink value was negatively correlated with spine BMC and IGF-1. Osteocalcin concentration was negatively correlated with crosslink value. Growth hormone was negatively correlated with crosslink value and positively correlated with spine BMC. The findings of this study suggest that red-yeast-rices are beneficial for blood lipid in ovariectomized rats. And when considering a population-based public health approach to lowering cholesterol and bone loss, and preventing coronary heart disease and osteoporosis, the red-yeast-rice dietary supplement could provide a new approach for the maintenance of healthier cholesterol and bone.
골은 지속적으로 재형성이 일어나며, 오래된 골을 흡수하는 파골세포와 새로운 골을 생성하는 조골세포의 균형에 의하여 항상성이 유지된다. 골대사의 건전성을 측정하기 위한 골흡수 표시자에는 tartrate resistant acid phosphatase, pyridinium 연결부위, 콜라겐 telopeptide 등이 있으며, 골 형성 표시자로는 골 유래 alkaline phosphatase, osteocalcin, procollagen I extension peptide를 사용할 수 있다. 골밀도를 증진하기 위한 기능성 소재로는 milk basic protein, lactoferrin 등이 있으며, 우유의 유산균 발효과정에 의하여 생산되는 생리활성 펩타이드도 골밀도의 증진에 기여할 수 있다. Lactobacillus casei ATCC 393을 이용하여 생산한 발효분해물은 다양한 조골세포의 생화학적 지표 평가와 동물실험 결과를 근거로 할 때 조골세포의 증식과 분화를 촉진하고 파골세포의 활성을 억제시킴으로써 골대사를 개선할 수 있는 것으로 나타났다.
Objectives : The process through which mesenchymal cells condense and differentiate into chondrocytes to form new bone is known as endochondral bone formation. Chondrogenic differentiation and hypertrophy are essential steps in bone formation and are influenced by various factors. The stem bark and root bark of Eleutherococcus sessiliflorus (ES) have been widely used to treat growth retardation and arthritis in traditional Korean Medicine. In this study, we aimed to investigate the possible role of the stem bark of ES in the stimulation of chondrogenic differentiation in clonal murine chondrogenic ATDC5 cells. Methods : In ATDC5 cells treated with ES extract, cell viability and extracellular matrix production were determined using CCK-8 assay and Alcian blue staining, respectively, and alkaline phosphatase activity was measured. We also examined mRNA and protein expression levels of genes related to chondrogenic expression in ATDC5 cells using reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot analyses. Results : ES extract increased the accumulation of Alcian blue-stained cartilage nodules and alkaline phosphatase activity in ATDC5 cells. It increased the mRNA expressions of chondrogenic markers including bone sialoprotein (BSP), cartilage collagens, Runt-related transcription factor-2 (RUNX-2), osteocalcin (OCN), β-catenin, and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), as well as the protein expressions of β-catenin, RUNX-2, BMP-2, and alkaline phosphatase (ALP). Conclusion : Taken together, these results suggest that ES extract exhibits a chondromodulating activity and therefore may be a possible agent for the treatment of bone growth disorders.
Although tectorigenin (TG), a major compound in the rhizome of Belamcanda chinensis, is conventionally used for the treatment of inflammatory diseases, its effects on osteogenesis and osteoclastogenesis have not been reported. The objective of this study was to investigate the effects and possible underlying mechanism of TG on in vitro osteoblastic differentiation and in vivo bone formation, as well as in vitro osteoclast differentiation and in vivo bone resorption. TG promoted the osteogenic differentiation of primary osteoblasts and periodontal ligament cells. Moreover, TG upregulated the expression of the BMP2, BMP4, and Smad-4 genes, and enhanced the expression of Runx2 and Osterix. In vivo studies involving mouse calvarial bone defects with ${\mu}CT$ and histologic analysis revealed that TG significantly increased new bone formation. Furthermore, TG treatment inhibited osteoclast differentiation and the mRNA levels of osteoclast markers. In vivo studies of mice demonstrated that TG caused the marked attenuation of bone resorption. These results collectively demonstrated that TG stimulated osteogenic differentiation in vitro, increased in vivo bone regeneration, inhibited osteoclast differentiation in vitro, and suppressed inflammatory bone loss in vivo. These novel findings suggest that TG may be useful for bone regeneration and treatment of bone diseases.
BMP-2 is a well-known TGF-beta related growth factor, having a significant role in bone and cartilage formation. It has been employed to promote bone formation in some clinical trials, and to differentiate mesenchymal stem cells into osteoblasts. However, it is difficult to obtain this protein in its soluble and active form. hBMP-2 is expressed as an inclusion body in the bacterial system. To continuously supply hBMP-2 for research, we optimized the refolding of recombinant hBMP-2 expressed in E. coli, and established an efficient method by using detergent and alkali. Using a heparin column, the recombinant hBMP-2 was purified with the correct refolding. Although combinatorial refolding remarkably enhanced the solubility of the inclusion body, a higher yield of active dimer form of hBMP-2 was obtained from one-step refolding with detergent. The refolded recombinant hBMP-2 induced alkaline phosphatase activity in mouse myoblasts, at $ED_{50}$ of 300-480ng/ml. Furthermore, the expressions of osteogenic markers were upregulated in hPDLSCs and hDPSCs. Therefore, using the process described in this study, the refolded hBMP-2 might be cost-effectively useful for various differentiation experiments in a laboratory.
The purpose of this study was to investigate the relationship between serum leptin, lipids, bone metabolism markers and nutrient intakes of obese middle-school girls compared to those of normal subjects. Each subject was assigned to either the normal(n=22) or obese groups(n=25) according to their BMI. The subjects were asked for their general characteristics and nutrient intakes using a questionnaire and 24-hr recall method. The serum leptin, lipids and osteocalcin(bone metabolism marker) were measured using blood analyses. The average ages of the subjects in the normal and obese groups were 13.9 and 14.0 years, respectively. The average weight(p<0.001) and BMI(p<0.001) of normal group were significantly lower than those of the obese group. The plant protein intake of the girls in the obese group was lower than that of the normal group(p<0.01). The levels of serum leptin in the obese and normal groups were 18.0 and 10.0 ng/mL, respectively(p<0.001). The serum LDL-cholesterol(p<0.01) and triacylgeride(p<0.05) of the obese girls were higher than those in the normal group. Also, the serum osteocalcin(bone formation marker) in the obese group was lower than that in the normal group(p<0.001). The BMI was negatively correlated to osteocalcin(p<0.001), but positively correlated to the serum leptin(p<0.001). The serum osteocalcin was also positively correlated to the plant protein intake(p<0.05). In conclusion, the excessive increase in weight and % body fat in middle-school students appeared to have a negative impact on bone health. Based on these results, further studies will be needed on the effects of bone metabolism markers, obesity and nutrient intakes for proper bone health.
The effects of vitamin $D_{3}$ supplementation on bone mineral density and bone mineral content in ovariectmized rats were investigated. Forty female Sprague-Dawley rats (body weight 180 g) were divided into two group, ovariectomy and Sham groups, which were each randomly divided into two subgroups that were fed casein and casein supplemented with vitamin $D_{3}$ diets. Bone mineral density (BMD) and bone mineral content (BMC) were measured using PIXlmus (GE Lunar Co, Wisconsin, USA) in spine and femur on 6 weeks after feeding. Osteocalcin and urinary DPD crosslinks value were measured as markers of bone formation and resorption. The body weight gain and food efficiency ratio (FER) were higher in OVX groups than in Sham groups regardless of diets. Serum Ca concentration and urinary Ca excretion were higher in vitamin $D_{3}$ supplemented group than in casein group in Sham and OVX. Crosslinks values were higher in OVX groups than in Sham groups. Spine BMD and femur BMD of ovariectomy group were significantly lower than Sham groups, however vitamin $D_{3}$ supplemented groups were significantly higher than control groups in Sham and OVX. In conclusion, dietary vitamin $D_{3}$ supplementation on ovariectimized rats were significantly increased bone mineral density and bone mineral content in spine and femur.
본 연구는 20대부터 50대까지의 광주, 전남에 거주하는 180명의 건강한 성인 여성을 대상으로 진행되었다. 골대사지표로 골형성지표인 BAP와 OC, 골흡수지표인 NTx를 측정하였으며 골밀도로는 T-score를 이용하였다. 일반적 특징으로 영향 요인으로 연령, 음주, 신체 활동량, 골다공증에 대한 가족력, 폐경, 건강기능성식품 섭취 여부, BMI, 체지방률을 분석하였다. 연령에 따라 비교했을 때 BAP와 OC는 20대가 다른 나이군에 비해 낮았고 음주군은 비음주군에 비해 BAP가 더 높았다. 활동 정도에 따라서는 차이가 없었고 골다공증에 대한 가족력이 있는 군은 골다공증에 대한 가족력이 없는 군에 비해 BAP가 더 높았다. 또한 폐경군은 폐경전군에 비해 BAP가 더 높았으며 건강보조식품 섭취 여부에 따라서는 생화학적 골대사지표나 골밀도의 차이가 없었다. BMI에 따라서는 생화학적 골대사지표 및 골밀도의 차이가 없었지만 체지방률에 따라 분류했을 때는 정상군에 비해 비만군의 BAP가 더 높았고 골밀도는 더 낮았다. 이상의 결과로 보아 노령군, 음주, 골다공증에 대한 가족력, 폐경, 비만이 있는 경우 골형성지표가 증가하였고 특히 비만군에서 골밀도가 낮은 것을 확인하였다. 따라서 골대사지표로 보았을 때, 한국인 여성들은 골 건강을 위해서 나이가 증가함에 따라 음주 및 비만 관리가 중요함을 시사하였다.
A recent study reported that a diet rich in isoflavones is beneficial for bone formation in growing rats. It therefore seemed desirable to find out whether the beneficial effect of isoflavones in ovariectomized rats could also be reproduced with same amount of isoflavones which used for growing rats. To study the effect of isoflavones, an equal amount of isoflavones which used for growing rats, on bone mineral density and bone mineral content in ovariectmized rats were performed. Forty female Sprague-Dawley rats (body weight $210{\pm}5g$) were divided into two groups, ovariectomy and sham groups, which were each randomly divided into two subgroups that were fed casein and casein supplemented with isoflavones diets for 9 weeks after operation. All rats were fed on experimental diet and deionized water ad libitum for 9 weeks. Bone mineral density (BMD) and bone mineral content (BMC) were measured using PIXImus (GE Lunar Co, Wisconsin) in spine and femur. Serum alkaline phosphatase activity (ALP) and osteocalcin and urinary DPD crosslinks value were measured as markers of bone formation and resorption. The results of this study indicate that body weight gain and food intake were higher in ovariectomy groups than in sham groups regardless of diets. Serum Ca concentration was lower in ovariectomy groups than in SHAM groups. Serum ALP, osteocalcin, and crosslink value were increased in ovariectomy groups. Spine BMD/weight, femur BMD/weight, and femur BMC/weight of ovariectomy groups were significantly lower than SHAM groups after 9 weeks. However, isoflavones supplemented group in ovariectomy groups, serum ALP and osteocalcin concentrations, spine BMD/weight and spine BMC, femur BMD/weight and femur BMC/weight were significantly increased after 9 weeks. In conclusion, the beneficial effect of isoflavones on bone in ovareiectomized rats was shown on 9 weeks after feeding with an equal amount of isoflavones supplementation which used for growing rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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