Shin, Hae Ja;Hyeon, Seok Hywan;Cho, Jae Ho;Lim, Woon Ki
한국미생물·생명공학회지
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제49권4호
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pp.510-518
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2021
Bacteriophages are considered excellent sensing elements for platforms detecting bacteria. However, their lytic cycle has restricted their efficacy. Here, we used the minor coat protein pIII domain (N1N2) of phage CTXφ to construct a novel surface plasmon resonance (SPR) biosensor that could detect Vibrio cholerae. N1N2 harboring the domains required for phage adsorption and entry was obtained from Escherichia coli using recombinant protein expression and purification. SDS-PAGE revealed an approximate size of 30 kDa for N1N2. Dot blot and transmission electron microscopy analyses revealed that the protein bound to the host V. cholerae but not to non-host E. coli K-12 cells. Next, we used amine-coupling to develop a novel recombinant N1N2 (rN1N2)-functionalized SPR biosensor by immobilizing rN1N2 proteins on gold substrates and using SPR to monitor the binding kinetics of the proteins with target bacteria. We observed rapid detection of V. cholerae in the range of approximately 103 to 109 CFU/ml but not of E. coli at any tested concentration, thereby confirming that the biosensor exhibited differential recognition and binding. The results indicate that the novel biosensor can rapidly monitor a target pathogenic microorganism in the environment and is very useful for monitoring food safety and facilitating early disease prevention.
바이오센서의 구조와 기능 그리고 종류에 대해 소개하였다. 이 분야의 연구가 과거 15년간 각국에서 경쟁적으로 연 구하였으나 glucose sensor가 상품화되 었을 뿐 연구결과를 상 품화한 것은 극히 적은 수였다. 그러나 최근 몇 년간 특히 포켓용 i-STAT point-of-care system의 도입 그리고 surface plasmon resonance와 evanescent wave 측정 장치 의 출현으로 상품화된 바이오샌서의 수가 크게 증가하는 추세에 었다. 이들 중 의료임상과 생물공정 그리고 환경오염 측정용으로 응 용되고 있는 몇 가지 상품에 대하여 약술하였다.
Park, Dae Keun;Kim, Soohyun;Yun, Kum-Hee;Pyo, Hanna;Kang, Aeyeon;Kim, Daehee;Lee, Cho Yeon;Yun, Wan Soo
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2016년도 제50회 동계 정기학술대회 초록집
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pp.353.2-353.2
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2016
We studied electrochemical detection of Botulinum neurotoxin, Vaccinia virus, and Streptococcus Pneumoniae based on nanogap device. Target bio substances were employed as representative targets of protein, virus, and bacteria, respectively. Redox current generated by ferri/ferrocyanide as an electroactive probe was enhanced according to gap distance which was controlled by surface-catalyzed chemical deposition. We found that enhanced electrochemical signal leads more sensitive signal changes according to selective interaction of target and its complementary elements on the electrode or gap area. In case of Botulinum neurotoxin, the redox signal showed a time-dependent increase due to cleavage of the immobilized peptide which blocked redox cycling. Redox cycling was also hindered by Vaccinia virus and Streptococcus Pneumoniae which were selectively immobilized in the gap area.
The transfer of nano-science accomplishments into technology is severely hindered by a lack of understanding of barriers to nanoscale manufacturing. The NSF Center for High-rate Nanomanufacturing (CHN) is developing tools and processes to conduct fast massive directed assembly of nanoscale elements by controlling the forces required to assemble, detach, and transfer nanoelements at high rates and over large areas. The center has developed templates with nanofeatures to direct the assembly of carbon nanotubes and nanoparticles (down to 10 nm) into nanoscale trenches in a short time (in seconds) and over a large area (measured in inches). The center has demonstrated that nanotemplates can be used to pattern conducting polymers and that the patterned polymer can be transferred onto a second polymer substrate. Recently, a fast and highly scalable process for fabricating interconnects from CMOS and other types of interconnects has been developed using metallic nanoparticles. The particles are precisely assembled into the vias from the suspension and then fused in a room temperature process creating nanoscale interconnect. The center has many applications where the technology has been demonstrated. For example, the nonvolatile memory switches using (SWNTs) or molecules assembled on a wafer level. A new biosensor chip (0.02 $mm^2$) capable of detecting multiple biomarkers simultaneously and can be in vitro and in vivo with a detection limit that's 200 times lower than current technology. The center has developed the fundamental science and engineering platform necessary to manufacture a wide array of applications ranging from electronics, energy, and materials to biotechnology.
In recent years, Anodic aluminum oxide(AAO) has become popular and attractive materials. It can be easily fabricated and self-organized pore structures. It has been widely used as a biosensor membrane, photonic crystal for optical circuit and template for nanotube growth etc. In previous papers, the theory was developed that AAO shows anisotropic optical properties, since it has anisotropic structure with numerous cylindrical pores. It gives rise to the anisotropy of the refractive index called as birefringence. It can be used as conventional polarizing elements with high efficiency and low cost. Therefore, we would like to compare the theory and experimental results in this study. One method which can measure effective refractive index of thin film is the prism coupling technique. It can give accurate results fast and simply. Furthermore, we can also measure separately the refractive index with different polarization using polarization of the laser (TE mode and TM mode). We calculated the effective refractive index with effective medium approximations (EMAs) by pore size in the SEM image. EMAs are physical models that describe the macroscopic system as the homogeneous and typical method of all mean field theories.
Graziani, Ana Claudia;Stets, Maria Isabel;Lopes, Ana Luisa Kalb;Schluga, Pedro Henrique Caires;Marton, Soledad;Ferreira, Ieda Mendes;de Andrade, Antero Silva Ribeiro;Krieger, Marco Aurelio;Cardoso, Josiane
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권4호
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pp.838-843
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2017
Sepsis is a major health problem worldwide, with an extremely high rate of morbidity and mortality, partly due to delayed diagnosis during early disease. Currently, sepsis diagnosis requires bacterial culturing of blood samples over several days, whereas PCR-based molecular diagnosis methods are faster but lack sensitivity. The use of biosensors containing nucleic acid aptamers that bind targets with high affinity and specificity could accelerate sepsis diagnosis. Previously, we used the systematic evolution of ligands by exponential enrichment technique to develop the aptamers Antibac1 and Antibac2, targeting the ubiquitous bacterial peptidoglycan. Here, we show that these aptamers bind to four gram-positive and seven gram-negative bacterial sepsis agents with high binding efficiency. Thus, these aptamers could be used in combination as biological recognition elements in the development of biosensors that are an alternative to rapid bacteria detection, since they could provide culture and amplification-free tests for rapid clinical sepsis diagnosis.
이 총설에서는 개별인식 태그와 바이오센서 등에 사용가능성이 높은 실리콘 기반의 캐패시터와 유기 박막트랜지스터 소자의 제작과 차이점이 논하여 진다. 금속이나 혹은 비금속의 나노입자는 화학물질이나 혹은 바이오분자, 즉, 단백질과 올리고 DNA 등에 표면이 싸여질 수 있으며, 상응하는 목표 바이오분자가 결합되어져 있는 절연체에 자기조립 단일층을 형성할 수 있다. 단일층으로 형성된 나노입자는 정전하 기본단위로서 유기 메모리 소자의 나노 플로팅 게이트로서 역할을 하는 것이다. 특히, 바이오분자의 선택적이고 강한 결합 메카니즘을 통하여도, 메모리 캐패시터나 유기 메모리 박막트랜지스터가 성공적으로 시연되었다. 더불어, 이러한 유기 메모리 소자는 차후 유연기판의 유기전자소자 영역의 발전을 촉진할 것으로 기대된다. 또한, 유기 메모리 박막트랜지스터는 앞으로 새로운 개념의 소자로의 적용이 가능하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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