The relationship between bioluminescence of immobilized Photobacterium phosphoreum and toxic substances was investigated to monitor toxic substances in aqueous solution. The sodium alginate was used as an immobilization matrix. A bioluminescence intensity was maximum when OD660 for cell concentration were between 1.0 and 1.2 and the biolumescence was stable at the pH range of between 6.0 and 8.0. The optimum concentration of alginate for immobilization was found to be 5.0%(w/v) in which dilution was carried out with 2.5%(w/v) NaCl solution that is an optimum environmental condition for the growth of P. phosphoreum. The bioluminescence intensity responded against the toxic substances was proportional to the concentration and a regression curve were established with linearity by using specific bioluminescence reduction rate and Gamma values. It was also found that the response was very rapid and sensitive. The response with such rapidity and sensitivity is a very important factor for the real time monitoring. The immobilized cells showed higher sensitive response to the toxic substances than free cells.
Sang Ah Park;Hae Jin Jeong;Jin Hee Ok;Hee Chang Kang;Ji Hyun You;Se Hee Eom;Yeong Du Yoo;Moo Joon Lee
ALGAE
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v.39
no.1
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pp.1-16
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2024
Many dinoflagellates produce bioluminescence. To estimate the intensity of bioluminescence produced by populations of the heterotrophic dinoflagellates Noctiluca scintillans and Polykrikos kofoidii and autotrophic dinoflagellate Alexandrium mediterraneum in Korean waters, we measured cellular bioluminescence intensity as a function of water temperature and calculated population bioluminescence intensity with cell abundances and water temperature. The mean 200-second-integrated bioluminescence intensity per cell (BLcell) of N. scintillans satiated with the chlorophyte Dunaliella salina decreased continuously with increasing water temperature from 5 to 25℃. However, the BLcell of P. kofoidii satiated with the mixotrophic dinoflagellate Alexandrium minutum continuously increased from 5 to 15℃ but decreased at temperatures exceeding this (to 30℃). Similarly, the BLcell of A. mediterraneum continuously increased from 10 to 20℃ but decreased between 20 and 30℃. The difference between highest and lowest BLcell of N. scintillans, P. kofoidii, and A. mediterraneum at the tested water temperatures was 3.5, 11.8, and 21.0 times, respectively, indicating that water temperature clearly affected BLcell. The highest estimated population bioluminescence intensity (BLpopul) of N. scintillans in Korean waters in 1998-2022 was 4.22 × 1013 relative light unit per liter (RLU L-1), which was 1,850 and 554,000 times greater than that of P. kofoidii and A. mediterraneum, respectively. This indicates that N. scintillans populations produced much brighter bioluminescence in Korean waters than the populations of P. kofoidii or A. mediterraneum.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.30
no.1
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pp.79-84
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2008
This paper describes the application of bioluminescence stimulating agents on a genetically engineered microorganism, Pseudomonas putida mt-2 KG1206, to monitor toluene analogs using in groundwater samples from petroleum hydrocarbon contaminated sites. The maximum bioluminescent response with pure chemicals followed in the order: m-methyl benzyl alchohol > m-toluate > toluene > m-xylene > benzoate > p-xylene > o-xylene. Generally, the bioluminescence production of strain mixed with groundwater samples was dependent on the contaminated total inducer concentrations. However, few samples showed opposite results, where these phenomena may be caused by the complexicity of environmental samples. Two chemicals, SL(sodium lactate) and KNO$_3$, were tested to determine a better bioluminescence stimulant. Both chemicals stimulate the bioluminescence activity of strain KG1206, however, a slightly high bioluminescence was observed with nitrogen chemical. This selected stimulant was then tested on samples collected from contaminated groundwater samples. The bioluminescence activity of all samples mixed with the strain was stimulated with KNO$_3$ amendment. This suggests that the low bioluminescence activity exhibited by the environmental groundwater samples can be stimulated by amending the culture with a proper agent, such as nitrogen compound. These findings would be useful, especially, when strain was used to monitor the groundwater samples contaminated with low inducer contaminants. Overall, the results of this study found the ability of bioluminescence producing bacteria to biosensor a specific group of environmental contaminants, and suggest the potential for more efficient preliminary application of this engineered strain in a field-ready bioassay.
Bioluminescence of Photobacterium phosphoreum has been used for the detection of pollutants in the environment. Immobilization method was used to maintain the stability of bioluminescence of P. phosphoreum. The carboxymethylcellulose was investigated to find out whether it was suitable for the immobilization of P. phosphoreum as a matrix without disturbing the bioluminescence emission. A maintenance of bioluminescence was determined from the P. phosphoreum immobilized on the various concentrations of carboxymethylcellulose. A relatively high bioluminescence intensity was shown with immobilized cells on 1%(w/v) carboxymethylcellulose. The effect of carboxymethylcellulose concentrations on the sensitivity of Crcompounds including $Na_{2}CrO_{4}$, $K_{2}CrO_{4}$, $CrO_{3}$, CrK$(SO_4)_{2}$ and $CrCl_{3}$ to the bioluminescence intensity. The calculated $EC_{50}$ showed that the linear relations between such substances and bioluminesence intensity were established.
This study was conducted to investigate the application of ATP bioluminescence to measure the degree of microbial contamination from raw meat, meat processing and milk processing lines. Samples collected from slaughter house, meat and milk processing plants were tested for estimation of bacterial number by using ATP bioluminescence and conventional method. The former result was transffered to R-mATP value(log RLU/ml), and the latter transffered to CFU(log/ml). Correlation coefficient(r) between aerobic counts(CFU, log/ml) and R-mATP(log RLU/ml) value was 0.93(n=408). R-mATP of aerobic counts from beef, pork, chicken was 0.93(n=220), and that was 0.93(n=187) between meat processing and dairy processing plants. In addition, Correlation coefficient(r) between aerobic counts and R-mATP was 0.87(n=252) under 1$\times$10${^5}$/ml of bacterial count and 0.74(n=152) over 10${^5}$ respectively.
Kim Eun-Young;Jang Seok-Tae;Choung Soung-Oun;Hong Tae-Won
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.30
no.4
s.48
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pp.549-553
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2004
ATP bioluminescence system and impedance system were evaluated with the objective of reducing the time for microbial analysis of cosmetics formulations from 72 to 24 h. The meaningful correlation (at least $95\%$) was achieved when emulsion were artificially contaminated with low levels of different organisms, including Pseudomonas aeruinosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Ralstonia mannitolilytica. The standard agar plate method, ATP bioluminescence and impedance method were used for in this study. Successful evaluation and validation of automated systems has enabled the introduction of ATP bioluminescence and impedance method into routine use within the microbiology laboratory. This has provided a rapid assessment of product quality, resulting in faster throughput and resource maximization.
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.7
no.3
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pp.335-342
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2021
In this study, we identify the suitability of monitoring the hygiene control of meals using ATP bioluminescence assay in children's foodservice facilities. Most ATP measured value by measurement area in childcare centers were lower in the second round than in the first round, and most hygiene control suitable rate by measurement area in childcare centers and kindergartens was higher in the second round. Also, in childcare centers, there was a positive correlation between the number of ATP measurement and the average score. In conclusion, ATP bioluminescence assay could be available as a monitoring tool for meal hygiene control in children's foodservice facilities, especially in childcare centers.
Park, Sang Ah;Jeong, Hae Jin;Ok, Jin Hee;Kang, Hee Chang;You, Ji Hyun;Eom, Se Hee;Yoo, Yeong Du;Lee, Moo Joon
ALGAE
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v.36
no.4
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pp.299-314
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2021
Some species in the dinoflagellate genus Alexandrium are bioluminescent. Of the 33 formally described Alexandrium species, the bioluminescence capability of only nine species have been tested, and eight have been reported to be bioluminescent. The present study investigated the bioluminescence capability of seven Alexandrium species that had not been tested. Alexandrium mediterraneum, A. pohangense, and A. tamutum were bioluminescent, but A. andersonii, A. hiranoi, A. insuetum, and A. pseudogonyaulax were not. We also measured the bioluminescent intensity of A. affine, A. fraterculus, A. mediterraneum, A. ostenfeldii, A. pacificum, A. pohangense, A. tamarense, and A. tamutum. The mean 200-second-integrated bioluminescence intensity per cell ranged from 0.02 to 32.2 × 104 relative luminescence unit per cell (RLU cell-1), and the mean maximum bioluminescence intensity per cell per second (BLMax) ranged from 0.01 to 10.3 × 104 RLU cell-1 s-1. BLMax was significantly correlated with the maximum growth rates of Alexandrium species, except for A. tamarense. A phylogenetic tree based on large subunit ribosomal DNA (LSU rDNA) showed that the bioluminescent species A. affine, A. catenella, A. fraterculus, A. mediterraneum, A. pacificum, and A. tamarense formed a large clade. However, the toxicity or mixotrophic capability of these species was split. Thus, their bioluminescence capability in this clade was more consistent than their toxicity or mixotrophic capability. Phylogenetic trees based on LSU rDNA and the luciferase gene of Alexandrium were consistent except for A. pohangense. The results of the present study can provide a basis for understanding the interspecific diversity in bioluminescence of Alexandrium.
Two recombinant bacteria containing luxAB showed an increased tolerance to stresses associated with lyophilization, when the cells were freeze-dried in the presence of trehalose. In the case of a recombinant, UV2, only $2.5\%$ of the original bioluminescence and $2.7\%$ of the cell viability were restored after 4 h of freeze-drying without trehalose, which implies that the cells were heavily damaged during the dehydration. To improve these losses, trehalose was added before freeze-drying using different modes. Trehalose increased the bioluminescence and the viability of freeze-dried UV2 under all conditions tested, and it was also observed that the addition of trehalose to the cultures (final concentration of 0.08 M) for 15 min before the freeze-drying resulted in the restoration of $45\%$ of the original bioluminescence and $50\%$ of the cell viability. Trehalose also showed a similar efficacy with the other luminescent recombinant, YH9. Therefore, it was tentatively concluded that trehalose played a role as a protective agent in the freeze-drying of bacterial cells.
The term molecular imaging can be broadly defined as the in vivo characterization and measurement of biologic processes at the cellular and molecular level. Optical imaging that has highly reproducibility and repetition used in molecular imaging research. In the bioluminescence imaging, animals carrying the luciferase gene are imaged with a cooled CCD(Charge-Coupled Device) camera to pick up the small number of photons transmitted through tissues. Molecular imaging analysis will allow us to observe the incipience and progression of the disease. But hardware device for molecular imaging and software for molecular image analysis were dependent on imports. In this paper, we suggest image processing methods and designed software for bioluminescence signal analysis. And we demonstrated high correlation(r=0.99) between our software's photon counts and commercial software's photon counts. ROI function and processing functions were accomplished without error. This study have the importance of the development software for bioluminescence image processing and analysis. And this study built the foundations for creative development of analysis methods. We expected this study lead the development of image technology.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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