벼의 생산에 있어 가장 큰 문제 요인 중 하나인 벼도열병의 발생 원인균인 벼도열병균은 다양한 기작에 의해 방제 약제에 대한 내성을 가지는 것으로 알려져 있다. 막 운반단백질인 ABC transporter의 경우 환경으로부터의 다양한 독성 물질들을 배출하는 것으로 알려져 있다. 이미 알려진 벼도열병균의 게놈 서열로부터 생물정보학적 분석을 통하여 ABC transporter 단백질의 도메인 특성을 보이는 33개의 유전자군 서열을 예측하였다. 이중 3개의 경우는 이미 알려진 유전자로 판명되었다. Southern Hybridization 분석에 적용한 20개의 유전자들이 모두 게놈상에 단일 copy로 존재함을 확인하였다. 새로 예측된 30개의 유전자중 11개는 RT-PCR을 통하여 전사단계에서의 유전자 발현이 확인되었다.
SINE-VNTR-Alu (SVA) elements are present in hominoid primates and are divided into 6 subfamilies (SVA-A to SVA-F) and active in the human population. Using a bioinformatic tool, 22 SVA element-associated genes are identified in the human genome. In an analysis of genomic structure, SVA elements are detected in the 5′ untranslated region (UTR) of HGSNAT (SVA-B), MRGPRX3 (SVA-D), HYAL1 (SVA-F), TCHH (SVA-F), and ATXN2L (SVA-F) genes, while some elements are observed in the 3′UTR of SPICE1 (SVA-B), TDRKH (SVA-C), GOSR1 (SVA-D), BBS5 (SVA-D), NEK5 (SVA-D), ABHD2 (SVA-F), C1QTNF7 (SVA-F), ORC6L (SVA-F), TMEM69 (SVA-F), and CCDC137 (SVA-F) genes. They could contribute to exon extension or supplying poly A signals. LEPR (SVA-C), ALOX5 (SVA-D), PDS5B (SVA-D), and ABCA10 (SVA-F) genes also showed alternative transcripts by SVA exonization events. Dominant expression of HYAL1_SVA appeared in lung tissues, while HYAL1_noSVA showed ubiquitous expression in various human tissues. Expression of both transcripts (TDRKH_SVA and TDRKH_noSVA) of the TDRKH gene appeared to be ubiquitous. Taken together, these data suggest that SVA elements cause transcript isoforms that contribute to modulation of gene regulation in various human tissues.
MicroRNAs (miRNAs) act as regulators of gene expression by binding to the 3' untranslated region (UTR) of target genes. They perform important biological functions in the various species. Among many miRNAs, miR-21-3p is known to serve vital functions in development and apoptosis in olive flounder. Using genomic and bioinformatic tools, evolutionary conservation of miR-21-3p was examined in various species, and expression pattern was analyzed in olive flounder. Conserved sequences (5'-CAGUCG-3') in numerous species were detected through the stem-loop structure of miR-21-3p. Thus, we analyzed target genes of miR-21-3p. Among them, 3' UTR region of PPIL2 gene indicated the highest binding affinity with miR-21-3p based on the minimum free energy value. The PPIL2 gene showed high expression levels in testis tissue of the olive flounder, whereas miR-21-3p showed rather ubiquitous expression patterns except in testis tissue, indicating that miR-21-3p seems to control the PPIL2 gene expression in a complementary repression manner in various tissues of olive flounder. Taken together, this current study contributes to infer the target gene candidates for the miR-21-3p using bioinformatics tools. Furthermore, our data offers important information on the relationship between miR-21-3p and target gene for further functional study.
Liu, Jin-Ge;Yao, Quan-Hong;Zhang, Zhen;Peng, Ri-He;Xiong, Ai-Sheng;Xu, Fang;Zhu, Hong
BMB Reports
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제38권5호
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pp.602-608
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2005
As a crucial transcription factor family, heat-shock factors were mainly analyzed and characterized in tomato and Arabidopsis. In this study, we isolated two putative heat shock factors OsHSF6 and OsHSF12 that interact specifically with heat-shock element (HSE) from Oryza sativa L by yeast one-hybrid method. The full-length cDNA of OsHSF6 and OsHSF12 have 1074bp and 920bp open reading frame (ORF), respectively. Analysis of the deduced amino acid sequences revealed that OsHSF6 was a class A heat shock factor (HSF) with all the conserved sequence elements characteristic of heat stress transcription factor, while OsHSF12 was a class B HSF with C-terminal domain (CTD) lacking of AHA motif. Bioinformatic analysis showed that the sequences and structures of two HSFs' DNA binding domain (DBD) had a high similarity with LpHSF24. The results of RT-PCR indicated OsHSF6 gene was expressed immediately after rice plants exposure to heat stress, and the transcription of OsHSF6 gene accumulated primarily in immature seeds, roots and leaves. However, we did not find the transcription of OsHSF12 gene in different organs and growth periods. Our results implied that OsHSF6 might be function as a HSF regulating early expression of stress genes in response to heat shock, and OsHSF12 might be act as a synergistic factor to regulate the expression of down-stream genes.
Ding, Ning;Lu, Yanzhu;Cui, Hanmin;Ma, Qinyu;Qiu, Dongxia;Wei, Xueting;Dou, Ce;Cao, Ning
BMB Reports
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제53권3호
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pp.154-159
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2020
We investigated the effects of physalin A, B, D, and F on osteoclastogenesis induced by receptor activator of nuclear factor κB ligand (RANKL). The biological functions of different physalins were first predicted using an in silico bioinformatic tool (BATMAN-TCM). Afterwards, we tested cell viability and cell apoptosis rate to analyze the cytotoxicity of different physalins. We analyzed the inhibitory effects of physalins on RANKL-induced osteoclastogenesis from mouse bone-marrow macrophages (BMMs) using a tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) stain. We found that physalin D has the best selectivity index (SI) among all analyzed physalins. We then confirmed the inhibitory effects of physalin D on osteoclast maturation and function by immunostaining of F-actin and a pit-formation assay. On the molecular level, physalin D attenuated RANKL-evoked intracellular calcium ([Ca(2+)](i)) oscillation by inhibiting phosphorylation of phospholipase Cγ2 (PLCγ2) and thus blocked the downstream activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinases (CaMK)IV and cAMP-responsive element-binding protein (CREB). An animal study showed that physalin D treatment rescues bone microarchitecture, prevents bone loss, and restores bone strength in a model of rapid bone loss induced by soluble RANKL. Taken together, these results suggest that physalin D inhibits RANKL-induced osteoclastogenesis and bone loss via suppressing the PLCγ2-CaMK-CREB pathway.
Using bioinformatic tools for searching the massive genome databases, it is possible to Identify new genes in few minutes for initial discoveries based on evolutionary conservation, domain homology, and tissue expression patterns, followed by further verification and characterization using the bench-top works. The development of high-density two-dimensional arrays has allowed the analysis of the expression of thousands of genes simultaneously in the humans, mice, rats, yeast, and bacteria to elucidate the genes and pathways involved in physiological processes. In addition, rapid and automated protein identification is being achieved by searching protein and nucleotide sequence databases directly with data generated from mass spectrometry. Recently, analysis at the bio-chemical level such as biochemical screening and metabolic profiling (Biochemical genomics) has been introduced as an additional approach for categorical assignment of gene function. To make advantage of recent achievements in computational approaches for facilitated gene discoveries in the avian model, chicken expression sequence tags (ESTs) have been reported and deposited in the international databases. By searching EST databases, a chicken heparanase gene was identified and functionally confirmed by subsequent experiments. Using combination of sub-tractive hybridization assay and Genbank database searches, a chicken heme -binding protein family (cSOUL/HBP) was isolated in the retina and pineal gland of domestic chicken and verified by Northern blot analysis. Microarrays have identified several host genes whose expression levels are elevated following infection of chicken embryo fibroblasts (CEF) with Marek's disease virus (MDV). The ongoing process of chicken genome projects and new discoveries and breakthroughs in genomics and proteomics will no doubt reveal new and exciting information and advances in the avian research.
Background: Chronic myelocytic leukemia is a disease that threatens both adults and children. Great progress has been achieved in treatment but protein-protein interaction networks underlining chronic myelocytic leukemia are less known. Objective: To develop a protein-protein interaction network for chronic myelocytic leukemia based on gene expression and to predict biological pathways underlying molecular complexes in the network. Materials and Methods: Genes involved in chronic myelocytic leukemia were selected from OMIM database. Literature mining was performed by Agilent Literature Search plugin and a protein-protein interaction network of chronic myelocytic leukemia was established by Cytoscape. The molecular complexes in the network were detected by Clusterviz plugin and pathway enrichment of molecular complexes were performed by DAVID online. Results and Discussion: There are seventy-nine chronic myelocytic leukemia genes in the Mendelian Inheritance In Man Database. The protein-protein interaction network of chronic myelocytic leukemia contained 638 nodes, 1830 edges and perhaps 5 molecular complexes. Among them, complex 1 is involved in pathways that are related to cytokine secretion, cytokine-receptor binding, cytokine receptor signaling, while complex 3 is related to biological behavior of tumors which can provide the bioinformatic foundation for further understanding the mechanisms of chronic myelocytic leukemia.
한국생물정보시스템생물학회 2000년도 International Symposium on Bioinformatics
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pp.74-82
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2000
Prostate cancer initially responds and regresses in response to androgen depletion therapy, but most human prostate cancers will eventually recur, and re-grow as an androgen independent tumor. Once these tumors become hormone refractory, they usually are incurable leading to death for the patient. Little is known about the molecular details of how prostate cancer cells regress following androgen ablation and which genes are involved in the androgen independent growth following the development of resistance to therapy. Such knowledge would reveal putative drug targets useful in the rational therapeutic design to prevent therapy resistance and control androgen independent growth. The application of genome scale technologies have permitted new insights into the molecular mechanisms associated with these processes. Specifically, we have applied functional genomics using high density cDNA microarray analysis for parallel gene expression analysis of prostate cancer in an experimental xenograft system during androgen withdrawal therapy, and following therapy resistance, The large amount of expression data generated posed a formidable bioinformatics challenge. A novel template based gene clustering algorithm was developed and applied to the data to discover the genes that respond to androgen ablation. The data show restoration of expression of androgen dependent genes in the recurrent tumors and other signaling genes. Together, the discovered genes appear to be involved in prostate cancer cell growth and therapy resistance in this system. We have also developed and applied tissue microarray (TMA) technology for high throughput molecular analysis of hundreds to thousands of clinical specimens simultaneously. TMA analysis was used for rapid clinical translation of candidate genes discovered by cDNA microarray analysis to determine their clinical utility as diagnostic, prognostic, and therapeutic targets. Finally, we have developed a bioinformatic approach to combine pharmacogenomic data on the efficacy and specificity of various drugs to target the discovered prostate cancer growth associated candidate genes in an attempt to improve current therapeutics.
Objective: Meat quality including muscle color in chickens is an important trait and continuous selective pressures for fast growth and high yield have negatively impacted this trait. This study was conducted to investigate genetic variations responsible for regulating muscle color. Methods: Whole genome re-sequencing analysis using Illumina HiSeq paired end read method was performed with pooled DNA samples isolated from two broiler chicken lines divergently selected for muscle color (high muscle color [HMC] and low muscle color [LMC]) along with their random bred control line (RAN). Sequencing read data was aligned to the chicken reference genome sequence for Red Jungle Fowl (Galgal4) using reference based genome alignment with NGen program of the Lasergene software package. The potential causal single nucleotide polymorphisms (SNPs) showing non-synonymous changes in coding DNA sequence regions were chosen in each line. Bioinformatic analyses to interpret functions of genes retaining SNPs were performed using the ingenuity pathways analysis (IPA). Results: Millions of SNPs were identified and totally 2,884 SNPs (1,307 for HMC and 1,577 for LMC) showing >75% SNP rates could induce non-synonymous mutations in amino acid sequences. Of those, SNPs showing over 10 read depths yielded 15 more reliable SNPs including 1 for HMC and 14 for LMC. The IPA analyses suggested that meat color in chickens appeared to be associated with chromosomal DNA stability, the functions of ubiquitylation (UBC) and quality and quantity of various subtypes of collagens. Conclusion: In this study, various potential genetic markers showing amino acid changes were identified in differential meat color lines, that can be used for further animal selection strategy.
The novel swine-origin influenza A/H1N1 virus (S-OIV) first detected in April 2009 has been identified to transmit from humans to humans directly and is the cause of the currently emerged pandemic. In this study, nucleotide and deduced amino acid sequences of the hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) of the S-OIV and other influenza A viruses were analyzed through bioinformatic tools for phylogenetic analysis, genetic recombination, and point mutation to investigate the emergence and adaptation of the S-OIV in humans. The phylogenetic analysis showed that the HA comes from triple reassortant influenza A/H1N2 and the NA from Eurasian swine influenza A/H1N1, indicating that HA and NA descend from different lineages during the genesis of the S-OIV. Recombination analysis ified the possibility of occurrence of recombination in HA and NA, denoting the role of reassortment in the outbreak. Several conservative mutations were observed in the amino acid sequences of the HA and NA, and these mutated residues were identical in the S-OIV. The results reported herein suggest the notion that the recent pandemic is the result of reassortment of different genes from different lineages of two envelope proteins, HA and NA, which are responsible for the antigenic activity of the virus. This study further suggests that the adaptive capability of the S-OIV in humans is acquired by the unique mutations generated during emergence.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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