Components I and II (CI&II) are major phosphoproteins in the frog rod outer segments (ROS) of retina, whose phosphorylation is light- and cyclic nucleotide-dependent. Although it was reported that CI & II could be chemically cross-linked to ${\beta}{\gamma}-subunit$ of transducin (${\beta}{\gamma}_t$), it was not clear whether CI&II physically interact with ${\beta}{\gamma}_t$, under native conditions. CI&II extracted by hypotonic washing fo ROS membranes showed an overlapped migration with ${\beta}{\gamma}_t$, in sucrose density gradient centrifugation. The elution profile of CI&II in the peripheral membrane fractions from gel filtration chromatography also overlapped that of ${\beta}{\gamma}_t$. These hydrodynamic parameters indicate that the native molecular state of CI&II in the peripheral membrane fraction appears to be within a complex, most likely with ${\beta}{\gamma}_t$. CI&II coeluted with ${\beta}{\gamma}_t$, showed no phosphorylation by endogenous kinase which phosphorylates a serine of CI&II in other fractions. The purified CI&II were not able to inhibit trypsin-activated cGMP-phosphodiesterase, and CI&II were not recognized by a monoclonal antibody against the ${\gamma}-subunit$ of transducin, indicating that CI&II are not y-subunit of PDE or transducin. Thus, it is likely that native CI&II, which undergo a light-dependent phosphorylation/dephosphorylation cycle, can associate with ${\beta}{\gamma}$, in frog photoreceptor membranes, and the complex formation has an inhibitory effect on the endogenous phosphorylation of CI&II.
D-Ribose is a five-carbon sugar used for the commercial synthesis of riboflavin, antiviral agents, and flavor enhancers. Batch fermentations with transketolase-deficient B. subtilis JY1 were carried out to optimize the production of D-ribose from xylose. The best results for the fermentation were obtained with a temperature of $37^{\circ}C$ and an initial pH of 7.0. Among various sugars and sugar alcohols tested, glucose and sucrose were found to be the most effective for both cell growth and D-ribose production. The addition of 15 g/l xylose and 15 g/l glucose improved the fermentation performance, presumably due to the adequate supply of ATP in the xylose metabolism from D-xylulose to D-xylulose-5-phosphate. A batch culture in a 3.7-1 jar fermentor with 14.9 g/l xylose and 13.1 g/l glucose resulted in 10.1 g/l D-ribose concentration with a yield of 0.62 g D-ribose/g sugar consumed, and 0.25 g/l-h of productivity. Furthermore, the sugar utilization profile, indicating the simultaneous consumption of xylose and glucose, and respiratory parameters for the glucose and sucrose media suggested that the transketolase-deficient B. subtilis JY1 lost the glucose-specific enzyme II of the phosphoenolpyruvate transferase system.
Acidovorax avenae subsp. avenae is the causal pathogen of several hosts including oats corn foxtail millet wheatgrass sugarcane and rice. The pathogen is a seedborne pathogen of rice and known to occur widely in rice growing countries. The pathogen cause inhibition of germination brown stripe on the leaf curling of the leaf sheath and abnormal elongation of the mesocotyl of irce. Bacterial colonies grow slowly and are convex circular and creamy with tan to brown center. The causal baterium is Gram-negative and rod shape with a single polar flagellum Nonfluorescence poly-$\beta$-hydroxybutyrate accumulation and precipitate formation around the colony on the medium are useful in the differentiation of this bacterium from other subspecies of A. avenae as well as nonfluorescent bacteria pathogenic to rice. This bacterium has belonged to the genus of Psdeudomonas but recently was transferred to the new genus Acidovorax on the basis of bacteriological and molecular biological data. However the difference of biochemical characteristics protein profile of the cell and host range among strains should be more clarified. To develop an effective control strategy for this disease understanding of detailed life cycle of the disease ritical environmental factors affecting disease development on each host and relationship to grain discoloration of rice are prerequisite. Although the affected area has been world-widely reported there is on recent progress on the understanding of the bacteriological and ecological characteristics of the causal bacterium and control means of the disease.
Lima, Bruna R. De;Silva, Felipe M.A. Da;Koolen, Hector H.F.;Almeida, Richardson A. De;Souza, Afonso D.L. De
Mass Spectrometry Letters
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v.5
no.4
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pp.115-119
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2014
The Brazil nut (Bertholletia excelsa - Lecythidaceae) is considered a product with high economic value, being a food widely appreciated for its nutritional qualities. Although previous studies have reported the biochemical composition of Brazil nut oil, the knowledge regarding the phospholipid composition exhibits a disagreement: the composition of fatty acids present in the structures of phospholipids is reported as being different from the composition of the free fatty acids present in the oil. In this work, solid phase extraction (SPE) was employed to provide a fast extraction of the phospholipids from Brazil nuts, in order to compare the phospholipid profile of the in nature nuts and their fatty acids precursor present in the oil. The major phospholipids were characterized by mass spectrometry approach. Their fragmentation pattern through direct infusion electrospray ionization ion-trap tandem mass spectrometry ($ESI-IT-MS^2$) proved to be useful to unequivocal characterization of these substances. High resolution (HR) experiments through ESI using a quadruple time of flight mass spectrometry (QTOF) system were performed to reinforce the identifications.
Salmonella enterica subsp. enterica serovar gallinarum (S. gallinarum) is the agent of fowl typhoid, and the 9R vaccine is a commercial live vaccine for the prevention of fowl typhoid. The aim of this study was to assess the safety and immunogenicity of different brands of S. gallinarum 9R vaccine used in commercial laying chickens in Korea. All 9R strains originated from three different brands showed the same pattern in the biochemical and serological properties, and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) profile. But, there was a difference in rhamnose fermentaion, agglutination with Salmonella group $D_1$ antiserum and PFGE pattern between 9R vaccine strain and field S. gallinarum isolates. In laboratory and field trials for assesment of safety and immunogenicity of 9R vaccine, all of the three 9R vaccines showed the same safety in commercial laying chickens. In addition, there was a significant difference between the vaccinated and unvaccinated control groups in mortality and the re-isolation rate of the challenge strain from the tissues (p < 0.05), and no difference by the brands of 9R vaccine. The results from this study indicated that all three different brands of S. gallinarum 9R vaccine showed highly protection against mortality and organ invasion in commercial laying chickens exposed to virulent strains of S. gallinarum.
A strain, KA/S2, isolated from Korean soil and morphologically assigned to Acanthcmoebc cQsteLlcnii, was characterized by isoenzyme analysis , and total proteins profile, End mitochondrial (Mt) DNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) , and compared with four reference strains assigned to the species (the authenitic Castellani, Neff, Ma, and Chang strains). It was found that four isoenzyme, total proteins, and Mt DNA RFLP patterns by eight restriction endonucleases of the strain KA/S2 were identical with those of the Neff strain, isolated from soil of California, USA. The Chang strain was unique in its morphology and total protein patterns. Interstrain polymorphisms of isoensyme profiles and Mt DNA RFLP patterns were observed among the Castellani, Neff, Ma, and Chang strains. Mt DNA RFLP was confirmed to be highly appropriate for the strain characterization and identification of Acnnthamoeba spry.
The ethanol extract of the Crotalaria juncea seeds, which showed promising antispermatogenic and antiandrogenic activities in albino mice, was taken up further for the isolation of the active fractions present in it. Two fractions that were obtained from thin layer chromatography were subjected for testing to know their antispermatogenic and antiandrogenic activities. After preliminary trials the fraction I showed maximum antifertility activity at the dose level of 200 mg/kg body weight when administered orally to the rats for 50 days. The fraction I was found to affect spermatogenesis as well as the endocrine functions of the testis as indicated by gravimetric, histopathological and biochemical changes. Further this fraction has caused degenerative changes in the seminiferous tubules and Leydig cells of the testis. The accessory reproductive organs like epididymis, seminal vesicles, vas deferens, prostrate, Cowper's gland and Levator Ani muscle showed significant malfunction. Cauda epididymal sperm count and sperm motility were reduced significantly. The treatment has also resulted in increase in the cholesterol level and alkaline phosphatase activity, and decrease in protein, glycogen, sialic acid contents and acid phosphatase activity in testis. It is noteworthy that RIA studies have shown significant reduction in serum FSH, LH and testosterone. Scanning electron microscopic observations revealed abnormalities in sperm structure.
[ ${\alpha}-Naphthylisothiocyanate$ ] (ANIT) induces intrahepatic cholestasis, involving damage to biliary epitheial cells. This study investigates hepatic gene expression and histopathological alterations in response to ANIT treatment in order to elucidate early time response of ANIT-induced hepatotoxicity. ANIT was treated with single dose (3, 6, and 60 mg/kg) in corn oil by oral gavage. Serum biochemical and histopathological observation were performed for evaluation of hepatotoxicity level. Affymetrix oligo DNA chips were used for gene expression profile by ANIT-induced hetpatoxicity. Hepatic enzyme levels (ALT, AST, and ALP) were increased in 24 hr high dose group. In microscopic observations, moderate hepatocellular necrosis, were confirmed 24 hr high dose groups. We found that gene expression patterns were dependent on time and dose. Our selected genes were related inflammation and immunomodulation. In this study, ANIT-induced hepatotoxicity was involved in acute phase responses and provides evidence for role of neutrophil could be mechanism associated with ANIT-mediated hepatotoxicity.
A lactic acid bacterium LAB3113, isolated from traditionally fermented Kimchi was found to produce bacteriocin whose activity was very specific toward lactobacilli and not effective against any other bacteria. Lactobacilli affected by the inhibitory substance included Lactobacillus delbrueckii-lactis, L. johnsonii, L. gsseri, and L. curvatus. Based upon biochemical and physiological characteristics, LAB3113 was classified as Lactococcus lactis, and its bacteriocin was named as lactococcin K3113. Lactococcus lactis. LAB3113 produced bacteriocin at th early stage of growth and the concentration of the bacteriocin did not decrease even after alt stationalry phase. Optimal temperature of bacteriocin production was $25^{\circ}C$ at the initial pH 7.0. Partially purified lactococcin K3113 was completely inactivated by protease, but not affected by lipase, lysozyme and RNase. The bacteriocin was very heat-stable even after autoclaving for 20 min. It was also stable in pH changes, an was not affected by th presence of solvents. lacotococcin K3113 appeared to act in bactericidal mode against L. delbrueckii-lactis ATCC4797. Molecular weight of lactococcin K3113 was calibrated as 10,500 dal by SDS-PAGE an activity staining. Lactococcus lactis LAB3113 had four residential plasmids of 3.7kb, 11.2kb, 15.5kb, and 48kh in molecular sizes. Plasmid profile analysis of mutant strain revealed that 15.5 kb plasmid was re-sponsible for the production of lactococcin K3113 and its immunity to the bacteriocin.
Objectives : Previously, we reported that compound K isolated from fermented ginseng by Aspillus oryzae has a wide biochemical and pharmacological effect, including anti-cancer activity in prostate cancer PC-3 cells. Despite these findings, its signaling pathway and gene expression pattern are not clearly understood. Methods : To confirm the gene expression study of treated with compound K in PC-3 cells, a cDNA microarray chip composed of 44K human cDNA probes was used. MTT assay, western blot analysis, propidium iodide staining, and annexin V/propidium iodide staining were analyzed. Results : We confirmed the differences of gene expression profiles. Then, we analyzed with the cell cycle arrest, cell death and cell proliferation related genes using DAVID database. Conclusions : Our finding should be useful for understanding genome-wide expression patterns of compound K-mediated cell cycle arrest toward induction of cell death and be helpful for finding future cancer therapeutic targets for prostate cancer cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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