• 제목/요약/키워드: Binding Potential

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Production of Monoclonal Antibody Against Listeria monocytogenes and Its Application to Immunochromatography Strip Test

  • Shim, Won-Bo;Choi, Jin-Gil;Kim, Ji-Young;Yang, Zheng-You;Lee, Kyu-Ho;Kim, Min-Gon;Ha, Sang-Do;Kim, Keun-Sung;Kim, Kwang-Yup;Kim, Cheol-Ho;Ha, Kwang-Soo;Eremin, Sergei A.;Chung, Duck-Hwa
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권7호
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    • pp.1152-1161
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    • 2007
  • An immunochromatography (ICG) strip test based on a monoclonal antibody for the rapid detection of L. monocytogenes in meat and processed-meat samples was developed in this study. A monoclonal antibody (MAb) specific to L. monocytogenes was produced from cloned hybridoma cells (FKLM-3B12-37) and used to develop an ICG strip test. The antibody showed a stronger binding to L. monocytogenes than other Listeria species, and a weak cross-reaction to S. aureus based on an ELISA. The detection limit of the ICG strip test was $10^5\;cell/ml$. In total, 116 meat and processed-meat samples were collected and analyzed using both the ICG strip test and a PCR. The ICG strip test and PCR indicated L. monocytogenes contamination in 34 and 27 meat samples, respectively. The 7 meat samples not identified as L. monocytogenes positive by the PCR were also tested using an API kit and found to be contaminated by Listeria species. In conclusion, the ICG strip test results agreed well with those obtained using the PCR and API kit. Thus, the developed ICG has potential use as a primary screening tool for L. monocytogenes in various foods and agricultural products, generating results within 20 min without complicated steps.

고지방 식이로 유도된 비만 쥐에서 HPJ 추출물의 항비만 효과 (Anti-Obese Activity of HPJ Extract on High Fat Diet-Induced Obese Mice)

  • 원해단;권해연;장아;김성집;신대희;임방호;정성현
    • 약학회지
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    • 제53권5호
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    • pp.286-292
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    • 2009
  • In this study, we investigated the anti-obese activity of HPJ extract in C57BL/6J mice. The C57BL/6J mice were randomly divided into five groups: normal control group (Con), high fat diet control group (HFD), treatment groups with HPJ at 125 mg/kg (HPJ125), 250 mg/kg (HPJ250), or 500 mg/kg (HPJ500). To induce an obesity, mice were fed by a high fat diet for 6 weeks, and mice were administered with HPJ extract once a day for 8 weeks. At the end of treatment, we examined the effect of HPJ extract on body weight, plasma lipid, and lipogenic enzymes. HPJ extract was found to lower whole body and epididymal adipose tissue weights and lowered plasma levels of glucose, insulin, triglyceride (TG), total cholesterol (TC), non-esterified fatty acid (NEFA) and leptin, compared to those in HFD group. Histological analyses of the liver and fat tissues of mice treated with HPJ extract revealed significantly decreased number of lipid droplets and decreased size of adipocytes compared to the HFD group. In addition, HPJ extract preserved the morphological integrity of pancreatic islets. To elucidate an action mechanism of HPJ extract, Western blot and RT-PCR were performed using epididymal adipose tissues. HPJ extract up-regulated the levels of phosphorylated adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) and its substrate, acetyl-CoA carboxylasse (ACC). HPJ extract also attenuated lipogenic gene expressions of sterol regulatory element-binding protein $1{\alpha}$ (SREBP$1{\alpha}$), fatty acid synthase (FAS), sterol-CoA desaturase 1 (SCD1) and glycerol-3-phosphate acyltransferase (GPAT) in dose-dependent manners. In contrast, expressions of lipolytic genes such as peroxisome proliferator-activated receptor-$\alpha$ (PPAR-${\alpha}$) and CD36, and fatty acid $\beta$-oxidation gene, carnitine palmitoyltransferase-1 (CPT-1) were increased. These results suggest that HPJ extract ameliorates obesity through inhibiting synthesis of lipogenic enzymes as well as stimulating fatty acid oxidation resulting from activation of AMPK, and HPJ extract could be developed as a potential therapeutic agent for obese patients.

ATRP를 이용한 Lysine 말단기를 가진 펩타이드-고분자 하이브리드 합성 (Solid Phase Synthesis of Lysine-exposed Peptide-Polymer Hybrids by Atom Transfer Radical Polymerization)

  • 하은주;김미진;김진구;안성수;백현종
    • 폴리머
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    • 제38권4호
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    • pp.550-556
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    • 2014
  • 펩타이드-고분자 하이브리드 소재(PPs)들은 선택적 용매에서 나노구조 형성을 위한 잠재적 구성 요소로서 많은 연구분야에 이용되고 있다. PPs는 잘 정의된 펩타이드-고분자로 이루어진 바이오콘주게이트의 손쉬운 제조방법과 다양한 응용분야에서 이들의 고유활성도에 대한 연구는 중요한 이슈이다. 본 연구에서는 atom transfer radical polymerization(ATRP)와 고체상 펩타이드 합성법을 이용하여 펩타이드-고분자 하이브리드 소재를 제조하였다. PYGK(proline-tyrosine-glycine-lysine) 펩타이드를 제조하기 위하여 일반적인 고체상 펩타이드 합성법을 이용하였다. PYGK 펩타이드는 섬유소용해(fibrinolysis) 과정에서 플라스미노젠과 반응하는 PFGK(proline-phenylalanine-glycine-lysine)와 유사한 펩타이드이다. 펩타이드와 펩타이드 개시제는 MALDI-TOF와 $^1H$ NMR을 이용하여 분석하였다. 펩타이드-고분자인 pSt-PYGK는 GPC, IR, $^1H$ NMR 분석법, 그리고 TLC를 이용하여 분석하였다. 구형 마이셀 집합체는 TEM과 SEM으로 측정하였다. 본 합성방법은 고유결합 활성도를 가진 잘 정의된 펩타이드-고분자 하이브리드 소재를 합성할 수 있는 기회를 제공한다.

주민주도형 안전 공동체 조성에 있어 서비스디자인의 역할 탐색 (A Study on the Role of Service Design in Creating Resident-driven Safe Community)

  • 전영옥
    • 디지털융복합연구
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    • 제15권6호
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    • pp.407-414
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    • 2017
  • 본 연구는 다양한 유형으로 발생하는 도시범죄에 있어 차별화된 사고 패러다임과 문제 접근법으로 범죄위험의 새로운 극복모델을 제시한 서비스디자인의 실효성을 탐구한다. 실증사례는 대구시 달서구 두류동의 '서비스디자인을 통한 주민주도형 안전 공동체 조성사업'으로 선제적 주민밀착형 프로세스를 통해 예방 위주의 지역안전시스템을 마련했다고 평가받는다. 이 사업은 지역범죄의 사전예방을 위한 '자연적 감시능력배양 프로그램', 지역안전에 대한 주민의 '사회적 역할 확장 프로그램', 주민안전의 종합적 해결안을 제공하는 '범죄예방 환경디자인 설계' 영역으로 추진되었다. 이 사업에서 서비스디자이너는 주민 주도가 가능한 과업 플랫폼을 설계하고 주민 간 교류의 기회를 확대시켜 지역 환경생태계를 재구성하는 전문가로 활동한다. 이 과정에서 주민들은 지역 연대감을 강화하고 그들 스스로 안전한 삶의 공간을 유지하는 잠재역량을 배양한다. 본 사례분석을 바탕으로 안전 공동체 조성에 있어 서비스디자인의 실효성은 지역주민 간의 관계개선, 범죄예방활동에 있어 주민참여의 활성화, 지역안전에 대한 주민인식환기로 규명한다.

향어에서의 oxolinic acid 흡수와 배설속도 (The absorption and excretion times of carp, Cyprinus carpio, treatment with oxolinic acid)

  • 정현도;하재이;허민도;정준기
    • 한국어병학회지
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    • 제5권2호
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    • pp.135-142
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    • 1992
  • 새로운 수산용 항생제로서 사용이 증가되고 있는 OX의 흡수 및 배설속도를 측정하고 수온, 급이등의 외적 환경이 이들 속도에 미치는 영향을 평가하였다. 동시에 OTC에 대비한 OX의 항균성 그리고 어류 혈장내 단백질과의 결합도 비교검토하였다. OX는 조사된 13균주중 11균주에 대해 OTC보다 10배이하의 낮은 MIC치를 보였고 향어나 틸라피아의 혈장내 단백질과의 complex 형성에 의한 역가 감소도 OTC에 비교해서 나타나지 않아 일반적인 세균성어병의 치료제로서 OTC 보다 우수한 것으로 나타났다. 향어에의 OX 투여를 경구, 근육주사, 정맥주사, 약욕등의 방법으로 실시하여 혈중 농도를 비교 측정하였을 때, i.v와 약욕법은 높은 초기 혈중 농도와 빠른 배설 속도를 보였다. 경구 투여와 근육 주사시는 24~28시간 후 최고 혈중 농도에 도달하고 이후 천천히 배설되었으며, 특히 i.m 투여에서의 OX bioavailability는 경구 투여보다 높게 나타났다. 이러한 약동력학적인 특성은 수온이 $30^{\circ}C$$20^{\circ}C$에서 차이를 보이지 않았으나 2주일 절식을 시킨 향어에 약욕방법으로 항생제 투여를 하면 절식어에서의 초기 혈중 농도가 정상급이어에 비해 훨씬 낮게 나타나 어류 표피나 아가미의 생리 활성도에 따른 항생제의 흡수율 변화를 추정케 해 주었다.

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Optimized Internal Control and Gene Expression Analysis in Epstein-Barr Virus-Transformed Lymphoblastoid Cell Lines

  • Nam, Hye-Young;Kim, Hye-Ryun;Shim, Sung-Mi;Lee, Jae-Eun;Kim, Jun-Woo;Park, Hye-Kyung;Han, Bok-Ghee;Jeon, Jae-Pil
    • Genomics & Informatics
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    • 제9권3호
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    • pp.127-133
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    • 2011
  • The Epstein-Barr virus-transformed lymphoblastoid cell line (LCL) is one of the major genomic resources for human genetics and immunological studies. Use of LCLs is currently extended to pharmacogenetic studies to investigate variations in human gene expression as well as drug responses between individuals. We evaluated four common internal controls for gene expression analysis of selected hematopoietic transcriptional regulatory genes between B cells and LCLs. In this study, the expression pattern analyses showed that TBP (TATA box-binding protein) is a suitable internal control for normalization, whereas GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) is not a good internal control for gene expression analyses of hematopoiesis-related genes between B cells and LCLs at different subculture passages. Using the TBP normalizer, we found significant gene expression changes in selected hematopoietic transcriptional regulatory genes (downregulation of RUNX1, RUNX3, CBFB, TLE1, and NOTCH2 ; upregulation of MSC and PLAGL2) between B cells and LCLs at different passage numbers. These results suggest that these hematopoietic transcriptional regulatory genes are potential cellular targets of EBV infection, contributing to EBV-mediated B-cell transformation and LCL immortalization.

Levels of common salivary protein 1 in healthy subjects and periodontal patients

  • Heo, Seok-Mo;Lee, Sol;Wang, HongTao;Jeong, Jeong Hyeok;Oh, Sang Wook
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제46권5호
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    • pp.320-328
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    • 2016
  • Purpose: Human saliva, as a vital part of the immune defense system, contains a number of distinct proteins and peptides. Recently human common salivary protein 1 (CSP1) has been identified as an abundant salivary protein and may play a role in promoting the binding of cariogenic bacteria to salivary pellicles. However, nothing else is known regarding the role of CSP1 in periodontology. The aim of this study was to quantify and compare CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients. Methods: This controlled clinical study was conducted in periodontally healthy individuals and patients with chronic periodontitis Chonbuk National University Hospital, with Institutional Review Board approval. Whole saliva samples were collected from 36 healthy subjects and 33 chronic periodontitis patients and analyzed. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and immune blotting were conducted to ensure that anti-CSP1 monoclonal antibody (mAb) binds to CSP1 in human saliva. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system was house-fabricated using mAb-hCSP1#14 and mAb-hCSP1#4 as a capture and a detector mAb, respectively. The CSP1 concentrations in saliva from 36 healthy subjects and 33 periodontal patients were quantified using the CSP1 sandwich ELISA system, and the results were analyzed using the Student's t-test. Results: Immunoblot analysis using mAb-hCSP1 as a probe confirmed that CSP1 in human saliva existed as a single band with a molecular weight of approximately 27-kDa. The quantification of CSP1 concentrations by CSP1 ELISA showed that the median values (25th to 75th percentiles) of periodontal patients and healthy subjects were 9,474 ng/mL (range, 8,434.10,139 ng/mL) and 8,598 ng/mL (range, 7,421.9,877 ng/mL), respectively. The Student's t-test indicated the presence of a statistically significant difference between the 2 groups (P=0.024). Conclusions: The presence of a significant difference in CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients suggests that CSP1 may be a potential biomarker for the detection or screening of periodontitis patients.

BRI3 associates with SCG10 and attenuates NGF-induced neurite outgrowth in PC12 cells

  • Gong, Yanhua;Wu, Jing;Qiang, Hua;Liu, Ben;Chi, Zhikai;Chen, Tao;Yin, Bin;Peng, Xiaozhong;Yuan, Jiangang
    • BMB Reports
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    • 제41권4호
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    • pp.287-293
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    • 2008
  • In a yeast two-hybrid screen, we identified the microtubule-destabilizing protein SCG10 as a potential effector protein of $BRI_3$. The association was verified using GST pull-down, Co-IP, and their perinuclear co-localization. The analysis of in vitro microtubule polymerization/depolymerization showed that the binding of $BRI_3$ to SCG10 effectively blocked the ability of SCG10 to induce microtubule disassembly, as determined by turbidimetric assays. In intact PC12 cells, $BRI_3$ exhibited the ability to stabilize the microtubule network and attenuate the microtubule-destabilizing activity of SCG10. Furthermore, co-expression of $BRI_3$ with SCG10 attenuated SCG10-mediated PC12 cell neurite outgrowth induced by NGF. These results identify a novel connection between a neuron-specific BRI protein and the cytoskeletal network, suggesting possible roles of BRI3 in the process of neuronal differentiation.

암 치료 표적으로써 OTUB1 (Deubiquitinase Otubain 1 as a Cancer Therapeutic Target)

  • 김동은;우선민;권택규
    • 생명과학회지
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    • 제30권5호
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    • pp.483-490
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    • 2020
  • 유비퀴틴 시스템은 ubiquitin ligases와 deubiquitinases (DUBs)에 의해 타겟 기질의 ubiquitination 유무에 따라 안정화, 활성화, 국소화 및 상호작용을 변화시키고 암 발병의 관여하는 다양한 생물학적 과정을 조절한다. DUBs는 촉매 domain에 따라 6그룹으로 나뉘어지는데, 그 중에서 OTU 그룹 내 대부분의 DUB는 세포의 연속적 신호반응(cell signaling cascade)을 조절할 수 있다. 특이하게도 OTU 그룹에 속하는 otubain 1 (OTUB1)은 정규적(canonical) 활성과 비정규적(non-canonical) 활성을 모두 가지고 있다. 본 보고에서는 OTUB1의 canonical, non-canonical 활성 조절에 있어서 다양한 신호전달경로 및 OTUB1의 역할에 대해 기술하였다. OTUB1은 이 두 종류의 활성 경로를 통하여, OTUB1은 암 관련 신호 전달 체계에 중요한 FOXM1, ERα, KRAS 및 EMT를 조절하고 암세포 증식 및 전이 능력 향상 및 항암제에 대한 내성을 나타낸다. 또한 임상적으로 전이성 및 종양 분화도가 높은 암 조직에서 OTUB1의 발현이 높으며, 이에 따라 환자의 생존율이 감소하는 등 나쁜 예후를 나타낸다. 따라서, 임상적으로 적용할 수 있는 OTUB1 억제제의 개발이 이루어진다면 OTUB1은 종양 치료에 있어 중요한 진단마커이자 치료적인 타겟이 될 수 있다.

후박나무에서 분리한 Meso-dihydroguaiaretic acid의 tyrosinase 저해활성 (Tyrosinase Inhibitory Activities of Meso-dihydroguaiaretic Acid from Machilus thunbergii)

  • 권현숙;이경동;김수철;조수정
    • 생명과학회지
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    • 제25권11호
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    • pp.1298-1303
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    • 2015
  • 후박나무(녹나무과)는 한국과 일본 등지에 서식하는 상록 교목으로 한국, 중국, 일본에서 부종, 복통, 복부 팽만 등의 질병 치료를 위해 오랫동안 사용되어오고 있다. 본 연구에서는 후박나무 껍질을 메탄올에 추출하고 메탄올 추출물을 헥산, 클로로포름, 부탄올에 순차적으로 분획하였다. 클로로포름 분획물로부터 2종의 화합물을 분리하였으며 분리된 화합물1과 2의 구조는 1H-, 13C-NMR과 참고 문헌 데이터에 의해 dibenzylbutane lignin 화합물인 macelignan (1)과 meso-dihydroguaiaretic acid (2)로 동정되었다. 분리된 화합물들의 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과, 화합물 2는 tyrosinase 저해 활성 중 monophenolase (IC50 = 10.2 μM)에 대해 높은 저해활성을 나타내는 경쟁적 저해제였으며 효소에 결합하는 화합물 2의 저해 상수(Ki 값)는 4.8 μM였다. 따라서 meso-dihydroguaiaretic acid (2)는 멜라닌 생합성과 관련된 피부 질환 치료를 위한 잠재적 후보가 될 수 있을 것으로 판단된다.