Callus culture was initiated from explants of mature root tissues of ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) on MS medium enriched with 2, 4-D. The aging callus produced numerious embryoids in the same medium. Reculture of these embryoids in the media (1/2 MS or B5) supplemented with benzyladenine and gibberellic acid resulted in profuse plantlet regeneration.
An efficient, rapid and large-scale in vitro clonal propagation of agronomically important Indian cereal crop genotypes (NSH27 & K5) of Sorghum bicolor (L.) Moench. by enhanced shoot proliferation in shoot tip segments was designed. MS medium fortified with plant growth regulators and coconut water markedly influenced in vitro propagation of Sorghum bicolor. In vitro plantlet production system has been investigated on Murashige and Skoog (MS) medium with the synergistic combination of 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), 5% coconut water and 3% sucrose which promoted the maximum number of shoots as well as beneficial shoot length. Subculturing of shoot tip segments on a similar medium enabled continuous production of more than 100 healthy shoots with similar frequency. When the healthy shoot clumps were cultured on MS medium fortified with 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($2.7\;{\mu}M$), ascorbic acid ($30.0\;{\mu}M$) and 5% coconut water, a rapid production of axillary and adventitious buds was developed after 8 wk culture. More than 300 shoots were produced 10 wk after culture. Rooting was highest (100%) on half strength MS medium containing 22.8 mM IAA. Micropropagated plants established in garden soil, farmyard soil and sand (2:1:1) were uniform and identical to the donor plant with respect to growth characteristics. These plants grew normally without showing any traits.
마늘의 바이러스 무감염주 생산과 종자 비용절감을 위한 기초적연구를 행하고저 마늘인편의 보통엽조직의 callus배양을 행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 마늘 callus의 유도 Linsmaier & Skoog는 기본배지에 Benzyladenine $10^{-5}M$과 $2,4-D\;10^{-5}M$에서 가장 양호한 결과를 얻었다. 2. callus생장은 Linsmaier & Skoog 기본배지에 kinetin $10^{-6}M$과, $2,4D\;10^{-6}M$을 함유한 것이 가장 양호하였다. 3. callus조직내의 바이러스 소장을 조사한 결과 투명하고 부드러운 callus조직을 8대 계대배양을 하였을 때 바이러스는 제거되었다. 4. 바이러스무감염이 확인된 마늘 callus조직을 Murashing & Skoog 기본배지에 kinetin $10^{-5}M$와 $NAA\;5\times10^{-6}M$을 함유한 배지에 다식하였을 때 재분화 되어 소식물체를 형성하였다.
Hovius, Marilyn H. Y.;Saxena, Praveen K.;Proctor, John T. A.
Journal of Ginseng Research
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제31권1호
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pp.14-22
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2007
As the zygotic embryo of North American ginseng (Panax quinquefolius L.) matured during stratification over 203 days it grew from 0.75 to 5.2 mm. Embryo excision and culturing on media containing different concentrations of two growth regulators, gibberellic acid ($GA_3$, 1 to 10 ${\mu}M$) and benzyladenine (BA, 1 to 5 ${\mu}M$), during stratification, showed that shoot and root number and the shoot, root and cotyledon length increased with increased stratification time. Gibberellic acid was the more effective growth regulator for increasing shoot and root number and shoot, root and cotyledon lengths. Immature embryos (stratified for up to 63 days) needed growth regulators for further development. Cultures on $GA_3$ at the last culture date (stratified for 203 days) when embryos were mature, produced multiple shoots but there was no effect of $GA_3$ concentration. Benzyladenine inhibited shoot and root growth regardless of embryo stratification. Growth regulators had little effect on cotyledon length of mature embryos. Embryos cultured on $GA_3$ combined with BA were green on all culture dates whereas greening in the control and BA treatments increased with culture date. The BA treatments induced 100% swelling of the embryos on the final culture date while in the control and $GA_3$ treatments there was no swelling. There was little or no curling in the control and BA treatments and a linear decrease in curling with culture date in the $GA_3$ and $GA_3$ + BA treatments.
This study was carried out to reveal optimum conditions for in vitro propagation of 3 Korean native azalea species, Rhododendron mucronulatum, R. yedonese var. poukhanense, and R. shlippenbachii, which are useful for landscape proposes. Seeds and meristems from three azalea species were cultured on 1/2MS, Hyponex, and Anderson media containing growth of regulators benzyladenine(BA) and 2-isopentenyadenosine(2ip). The results were as follows. 1. In the culture of R. schlippenbachii and R. mucronulatum seeds, in vitro seedlings germinated and grew well on he 1/2MS and Anderson media, while R. yedoense var. poukhanense on Hyponex media containing 6.0mg/$\ell$ 2ip. 2. When the meristems of R. mucronulatum were cultured on Andeson media containing 9.0mg/$\ell$ 2ip, the survival rate of meristems was 23.0% in 6 weeks after culture, and the survival rate of R. schlippenbachii was 46.0% o nthe same media containing 12.0mg/$\ell$ 2ip. The survial rate of R. yedoense var. poukhanense was 92.0% onHyponex media containing 0.5mg/$\ell$ BA and 9.0mg/$\ell$ 2ip. When the meristems of R. mucronulatum and R. yedoense var. poukhanense were cultured on Hyponex media containing 12.0mg/$\ell$ 2ip, they showed the most excellent growth. R. schlippenbachii grew well on Anderson media containing 9.0mg/$\ell$ 2ip. When in vitro shoots of R. yedoense var. poukhanense were subcultured to solid medium, they grew well in shoot growth on Hyponex media containing 6.0mg/$\ell$ 2ip.
Sunflower (Helianthus annuus L.) protoplasts were isolated from seven-day-old etiolated hypocotyls of 10 A line and four-week-old fully expanded young leaves of PI 441983 line in vitro seedlings using an enzymatic method. Purified protoplasts were collected by filtration and floatation in sucrose solution. Semi-solid protoplast culture was performed using the L4 regeneration protocol with various culture media and plating densities to achieve the highest efficiencies for protoplast culture of hypocotyl and mesophyll protoplasts of 10 A and PI 441983 lines, respectively. The concentrations in liquid L'4M medium and different plating densities were evaluated in two types of cytokinins, the adenine-type 6-benzyladenine (BA) and the phenylurea-type thidiazuron (TDZ). The highest colony formation was achieved in both sunflower lines when 0.5 mgL-1 BA and 0.5 mgL-1 TDZ were applied with a high plating density (3 × 105 protoplasts mL-1). These conditions led to 38.45% and 39.40% colony formation for hypocotyl protoplasts of the 10 A line and mesophyll protoplasts of the PI 441983 line, respectively. Moreover, many hypocotyl protoplast-derived colonies developed into micro-calli. In addition, superior development of both sunflower protoplasts was observed with all plating densities when BA was used in combination with TDZ. This finding will be applicable to future sunflower hybrid production via somatic hybridization.
본 연구는 $H_2O_2$ 축적이 수반되는 잎의 노쇠현상과 관련하여 세포질내 ascorbate-glutathione 회로의 역할 가능성과 이때 benzyladenine(BA)의 효과를 밝히기 위하여 노쇠중인 밀 잎에서 시토졸 ascorbate peroxidase(APX) isozyme 분리 및 발달양상과 ascorbate-glutathione 회로 구성효소들의 활성도 변화를 조사하였다. 성숙한 밀 제1엽 절편을 4일간 암배양하는 동안 증가된 엽록소 분해 및 $H_2O_2$ 축적으로 규정되는 잎의 노쇠발달중 대조구 잎에서는 시토졸 APX 활성도의 유의성 있는 증가가 관찰되지 않았으며 dehydroascorbate reductase(DHAR)의 활성도는 급격히 감소되었고, glutathione reductase(GR) 활성도는 완만하게 증가하였다. 그러나 BA로 처리된 잎에서는 시토졸 APX 활성도가 현저하게 증가하였으며 DHAR 활성도의 감소가 지연되어 나타났고 GR 활성도의 증가는 대조구에 비해 증진되었으며 내재성 ascorbate 함량의 감소율과 H2O2 축적이 억제되었다. 3개의 시토졸 APX isozyme이 native-PAGE법에 의해 노쇠중인 밀 잎에서 발견되었으며 그 중 2개 isozyme은 높은 활성도를 보였다. 시토졸 APX isozyme의 발달양상의 경우 4일간의 암배양 동안 대조구 잎에서는 단지 2개의 isozyme band("a"와 "b")가 거의 같은 활성도를 지닌 채 출현하였으나 BA로 처리된 잎에서는 추가로 1개의 약한 isozyme band("c")가 더 나타났으며 "b" isozyme의 활성도가 약간 촉진되었다 그러나 "a" isozyme 활성도는 대조구 잎에 비해 암배양시간 경과에 따라 현저하게 발달하였다. 대조구 잎과 비교시 BA로 처리된 잎에서는 시토졸 APX isozyme의 발달 및 APX, DHAR, GR의 전체 활성도가 함께 증진되어 그 결과 $H_2O_2$ 제거능력이 증대된 본 실험의 결과는 ascorbate-glutathione 회로가 밀 잎의 노쇠과정에 중요하게 작용하고 있음을 제시하였다.
An Efficient in vitro regeneration system and an optimized Agrobacterium mediated transformation protocol are described, based on the use of young seedling cotyledons of Capsicum annuum L. Optimal regeneration efficiency can be obtained by cultivating cotyledon explants on media containing 4 mg/L benzyladenine and 0.1 mg/L indolacetic acid. The effect of antibiotics used to eliminate Agrobacteria, as well as the toxic level of some generally used selection agents (kanamycin, geneticin, hygromycin, phosphinotricin and methotrexate) in regenerating pepper tissues were determined. To enable the comparison of different selection markers in identical vector background, a set of binary vectors containing the marker genes for NPTII, HPT, DHFR and BAR respectively, as well as the CaMV 35S promoter/enhancer-GUS chimaeric gene was constructed and introduced into four different Agrobacterium host strains.
A method for plant regeneration via organogenesis from Pelagonium inquinans leaf disc has been developed. Mature leaf explants were collected from field-grown plants and used for the induction of adventitious shoot regeneration on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3% (w/v) sucrose plus plant growth regulators. Maximum shoot organogenesis, with $11.8{\pm}1.5$ shoots (98.6%) per leaf disc, was obtained with $2\;mg/l$$N^6-benzyladenine$ (BA) and $0.5\;mg/l$${\alpha}-naphthyleneacetic$ acid (NAA) in 30 days. For rooting, the in vitro proliferated and elongated shoots were excised into 1.5-2 cm in length microcutting, which were plated individually on an half-strength MS (1/2MS) medium supplemented with 2% (w/v) sucrose plus various concentrations of indole-3-butyric acid (IBA). Shoots rooted with a frequency of 100% following culture on 1/2MS medium containing $0.5\;mg/l$ IBA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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