Mycelial growth resistant isolates of Botryosphaeria dothidea to benomyl showed 99~79% spore germination on the PSA media supplemented with 200~2,100 $\mu\textrm{g}$/ml of carbendazim and thiophanate-methyl to manifest the high cross-resistance in spore germination. Mycelial growth, 23~9 mm in colony diameter, also manifested the high cross-resistance of mycelial growth together with similarity of spore forming cross-resistance. Benomyl resistant isolates BR1, BR2 and BR3, grew 23~10 mm in colony diameter at 330~3,000 $\mu\textrm{g}$/ml of captafol, captan and oxine-copper showing the high double resistance of mycelial growth and spore formation with minor difference. However, within concentration range of the 3 fungicides tested, germinations of all the tested isolates were completely suppressed to show no double-resistance in the fungal spore germination.
국내에 분포하는 벼 키다리병균의 benomyl에 대한 저항성 정도를 조사하기 위하여 연도별로 균주를 수집하고, 병원성을 검정하였으며, 한천희석법을 사용하여 각 균주의 benomyl에 대한 MIC값과 $EC_{50}$값을 조사하였다. 그 결과, 2006년부터 2007년에 분리한 균주의 MIC값은 1.5625~3.125 ug/mL인 균주가 가장 높은 빈도로 분포하였고, 2013년부터 2014년 분리균의 MIC값은 25 ug/mL 이상의 농도에서 분포비율이 가장 높았다. 또한 2006년부터 2007년 분리균의 평균 $EC_{50}$값은 1.6397 ug/mL이었으며, 2013년부터 2014년 분리균은 2.4892 ug/mL로 조사되었다. 국내 벼 키다리병균의 benomyl에 대한 저항성 기준은 MIC값이 25ug/mL 이상이고, $EC_{50}$값이 2.4 ug/mL 이하일 때는 중도저항성으로, $EC_{50}$값이 2.4 ug/mL 이상일 때는 저항성으로 하는 것이 타당할 것으로 생각된다. 이 기준에 의한 저항성 균주의 비율은2006년부터 2007년에 12.5%에서 2013년부터 2014년에는 36.4%로 증가하였다. 한편, prochloraz와 benomyl에 모두 저항성을 보이는 균주가 20.3%인 것으로 나타나 벼 키다리병균의 다중저항성이 증가하는 것으로 조사되었다.
Seed decay of soybean caused by Diaporthe phaseolorum, Colletotrichum truncatum and Cercospora kikuchii is a serious disease when soybean is harvested under warm and wet weather conditions. Benomyl has been used for controlling the disease, however, benomyl application may be limited due to common occurrence of resistance. The efficacy of 21 fungicides against the pathogens was evaluated in vitro. Among the fungicides tested, benomyl, carbendazim, fluazinam, iprodione+propineb, thiophanate-methyl, and triflumizole were found effective and were evaluated for their ability to control the seed pathogens. Fluazinam completely inhibited mycelial growth at a concentration of 100 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{m}{\ell}$ for D. phaseolorum; and at a concentration of 500 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{m}{\ell}$ for C. truncatum and C. kikuchii. $EC_90$ values of fluazinam were similar to that of benomyl. Because fluazinam, iprodione+propineb, and triflumizole were found effective against the seed pathogens, these were subjected for field-testing. Suppression of pod and seed infection by fluazinam and iprodione+propineb was as high as that of benomyl without any reduction in agronomic characters of soybean. This study shows that fluazinam and iprodione+propineb may be used in combination with benomyl to control seed pathogens, manage resistance, and ensure production of high quality soybean seeds.
Monilina fructicola, the brown rot fungus of stone fruits, was isolated from overwintering mummies and peduncles on peach trees from February to March, 1998. The resistant population of these isolates to benzimidazole (benomyl, carbendazim and thiophanate-methyl) and dicarboximide (iprodione, vinclozolin and procymidone) was examined. Among 417 isolates, the incidence of isolates resistant to benomyl, carbendazim, and thiophanate-methyl were 45 (10.8%), 47 (11.3%), and 46 (11.0%), respectively. Forty two (10.0%) isolates showed cross-resistance to benzimidazole fungicides. On the other hand, the resistant isolates against iprodione, vinclozolin and procymidone were 186 (44.6%), 1 (0.2%) and 150 (36.0%), respectively. Among the isolates, 116 (27.8%) showed cross-resistance to iprodione and procymidone. Moreover, 27 (6.5%) of 417 isolates showed double-resistance to both benzimidazole (benomyl) and dicarboximide (iprodione).
2006년부터 2009년 까지 우리나라의 벼 재배지역에서 키다리 증상을 보이는 시료를 채집하여 벼 키다리병균 118균주를 분리하였다. 분리 후 공시된 균주는 한전희석법을 이용하여 prochloraz, tebuconazole, 및 benomyl의 세 약제에 대한 저항성 정도를 검정 하였고, 각 균주의 균사 생장율을 조사하여 살균제별 $EC_{50}$ 값을 구한 결과, prochloraz 에서 0.207, tebuconazole에서 2.508, 그리고 benomyl에서 $2.752{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$으로 조사되었다. 이들을 토대로 각 약제에 대한 F. fujikuroi 분리균의 저항성 판단 기준 농도는 prochloraz와 benomyl의 경우 각 각 0.5와 $2.5{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$의 낮은 농도 값이 지정된 반면, tebuconazole에 대한 저항성 기준 농도는 $5.0{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$으로 다소 높은 값이 지정되었다. 설정한 저항성 기준농도를 적용하여 저항성 균주를 조사한 결과 prochloraz와 tebuconazole 약제에 대해 17개와 19개 균주로 조사되었고, 오랜 기간 사용되어온 benomyl에 대해 저항성을 보이는 균주는 43개로 더 많이 나타났다. Prochloraz와 tebuconazole, proch1oraz와 benomyl, 및 tebuconazole과 benomyl 별로 접종원의 $EC_{50}$ 값을 비교해 본 결과, 이중저항성을 보이는 균주는 각각 4, 11, 6균주였으며, 이 3가지 약제에 모두 저항성을 보이는 균주는 CF366 와 LF3 35 2균주로 이들은 모두 경북 지역에서 분리된 균주였다. 각각의 약제에 저항성인 균주들과 이중저항성을 보인 균주, 그리고 세 가지 약제에 대해 모두 저항성인 균주와 감수성인 균주를 선발하여 균사 생장 억제율을 비교해본 결과 해당 약제에 저항성을 보이는 균주는 다른 균주에 비해 약제의 농도가 증가됨에 따라 억제 곡선이 완만하게 나타남을 알 수 있었다.
Colletotrichum species is known as the major causal pathogen of red pepper anthracnose in Korea and various groups of fungicides are registered for the management of the disease. However, the consistent use of fungicides has resulted in the development of resistance in many red pepper-growing areas of Korea. Effective management of the occurrence of fungicide resistance depends on constant monitoring and early detection. Thus, in this study, various methods such as agar dilution method (ADM), gene sequencing, allele-specific polymerase chain reaction (PCR), and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) were applied for the detection of benzimidazole resistance among 24 isolates of Colletotrichum acutatum s. lat. and Colletotrichum gloeosporioides s. lat. The result of the ADM showed that C. gloeosporioides s. lat. was classified into sensitive and resistant isolates to benomyl while C. acutatum s. lat. was insensitive at ≥1 ㎍/ml of benomyl. The sequence analysis of the β-tubulin gene showed the presence of a single nucleotide mutation at the 198th amino acid position of five isolates (16CACY14, 16CAYY19, 15HN5, 15KJ1, and 16CAYY7) of C. gloeosporioides s. lat. Allele-specific PCR and PCR-RFLP were used to detect point mutation at 198th amino acid position and this was done within a day unlike ADM which usually takes more than one week and thus saving time and resources that are essential in the fungicide resistance management in the field. Therefore, the molecular techniques established in this study can warrant early detection of benzimidazole fungicide resistance for the adoption of management strategies that can prevent yield losses among farmers.
Fungicide resistance of 48 isolates of Botrytis cinerea collected from citrus in Cheju was investigated and genetic diversity was analyzed with random amplified polymorphic DNA(RAPD). High levels of resistance to benzimidazole fungicides benomyl and thiophanate-methyl and N-phenylcarbamate fungicide diethofencarb were observed. Negative cross resistance was clear between benzimidazole and N-phenylcarbamate fungicides, and multiple resistance to the fungicides was also observed. There was cross resistance among the dicarboximide fungicides procymidione, vinclozolin and iprodione as it was observed between the benzimidazole fungicides benomyl and thiophanate-methyl. The lowest levels of resistance were to the dicarboximide fungicides, but no sensitive isolate to polyoxin B was observed. The isolates showed genetically diverse RAPD profiles according to the geographic origin collected, but there was no significant correaltion between RAPD profiles of genomic DNA and the levels of fungicide resistance of the isolates. The isolates showed genetically diverse RAPD profiles, indicating that genetic differentiation had already occurred in the populations of B. cinerea distributed in Cheju.
1980년경부터 Botryosphaeria dothidea에 의한 사과겹무늬썩음병이 전국적으로 만연하였는데 그 동안 화학적 방제를 하였으나 병해는 감소되지 않고 현재도 그 피해손실이 극심하다. 본 병의 주요 방제제인 benomyl에 대한 본 병원균의 저항성을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 감수성균은 $150\;{\mu}g/ml$에서 균사생장을 할 수 없었으나, 저항성균은 $300\;{\mu}g/ml$에서 7-l3mm, $2,400\;{\mu}g/ml$에서도 균총직경 6-8mm의 균사생장을 보였다. 후자의 고농도에서 저항성균은 5-9%의 포자발아를 보였으나 감수성균은 포자발아가 없었다. 2. $20-2,400\;{\mu}g/ml$의 모든 공시농도에서 감수성균은 병자각을 형성할 수 없었는데 반하여 저항성균은 저농도에서는 많은 병자각을 형성하였으나 약제농도가 높아질수록 적게 형성하였다.
Kim, Yun-Sik;Min, Ji-Young;Kang, Beum-Kwan;Bach, Ngyeun-Van;Choi, Woo-Bong;Park, Eun-Woo;Kim, Heung-Tae
The Plant Pathology Journal
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제23권3호
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pp.187-192
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2007
The anthracnose disease on pepper fruits in Korea was caused by Colletotrichum acutatum as well as C. gloeosporioides. Since C. acutatum showed less sensitivity to benomyl, it was analyzed whether the less sensitivity was given by the same mechanism for the fungicide resistance of C. gloeosporioides. The isolates of C. acutatum were less sensitive to the three benzimidazole fungicides tested, benomyl, carbendazim, and thiophanate-methyl. However, the of C. acutatum isolates were different from the resistant isolates of C. gloeosporioides in their response to diethofencarb, one of N-phenyl-carbamates; the former was still less sensitive to diethofencarb than the latter. The differences in the resistance mechanisms in two species were conspicuous in sequence analysis of the tub2 genes. The genes from C. acutatum did not show any non-synonymous base substitutions at the regions known to be correlated with the benzimidazole-resistance. All of these data may indicate that the less sensitivity of C. acutatum to benomyl is based on different mechanism(s) from that of C. gloeosporioides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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