Seo, Weon-Taek;Kim, Suk-Weon;Liu, Jang-Ryol;Kim, Ik-Hwan;Park, Young-Hoon;Choe, Tae-Boo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제6권3호
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pp.209-212
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1996
A two-step cooling technique has been developed for cryopreservation of suspension cultured Scutellaria baicalensis cells. Efficient regrowth of cryopreserved cells was obtained in cryoprotected cells with a mixture of 1.5 M glycerol and 0.4 M sucrose in Schenk and Hildebrandt medium without pretreatment in high osmotic medium. Optimum freezing conditions were found to be a cooling rate of $0.5^{\circ}C$ min from $4^{\circ}C$ to $-40^{\circ}C$, and then retaining samples at $-40^{\circ}C$ for 30 min prior to plunging into liquid nitrogen. A regrowth rate of approximately 95$%$ was obtained after three month storage in liquid nitrogen. Callus cultures established from the cryopreserved cells were found to produce the same patterns of flavonoid accumulation and retain their baicalin producing activity.
Optimal feeding strategies in bioreactor operation of Scutellaria baicalensis G. plant cell culture were investigated to maximize the production of flavone glycosides by using a structured kinetic model which can predict culture growth and flavone glycosides synthesis in a rigorous, quantitative manner. For the production of baicalin and wogonin-7-0-GA, the strategies for glucose feeding into Scutellaria baicalensis G. plant cell culture were proposed based on the model, which are a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability and of specific production rate respectively, and a perfusion operation with maintenance of specific production rate for baicalin and wogonin-7-0-GA. Simulation results showed that the highest volumetric concentration of flavone glycosides was obtained in a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability among all the suggested strategies. In the periodic fed-batch operations, the higher volumetric production of flavone glycosides was achieved compared with that in the perfusion operation. It can be concluded that a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability would be the optimal and practical operating strategy of Scutellaris baicalensis G. plant cell culture for the production of flavone glycosides.
Scutellaria Radix, the dried roots of Scutellaria baicalensis Georgi (Labiatae), has been used in oriental traditional medicine for treatment of fever urine disorder, diarrhea, inflammation. Present study was carried out for the gastroprotective effect of chrysin, baicalein, baicalin, wogonin from Scutellaria baicalensis. This reports evaluated antioxidant effect, antibacterial activity against Helicobacter pylori and HCI-ethanol-induced gastric lesion in rats and showed the significant effectiveness. It may be regarded that the antigastritic effects and antibacterial activity of baicalin, baicalein from Scutellaria baicalensis are originated from acid-neutralizing capacity, free radical scavenging effects and the antibacterial activity against Helicobacter pylori.
Scutellaria baicalensis $G_{EORGI}$ (Scutellariae Radix) has been used to clear heat and to dry dampness in the stomach or intestines, which manifests as diarrhea or dysenteric disorder. In this study, we investigated the effective preparation of active components in Scutellariae Radix using the methods of solvent extraction and absorption fractionation for the development of new functional food or pharmaceuticals. The marker substances, baicalin, baicalein, wogonoside, and wogonin were directly isolated from the Scutellariae Radix. There chemical structures were elucidated by spectroscopic analysis. The Scutellariae Radix was extracted with hot water. To enhance yield of flavonoids in Scutellariae Radix, the hot water extract was dissolved in ethanol with concentration dependent manner. The precipitates were separated using centrifugal techniques at 10,000 rpm. Supernatant liquid was applied to the HPLC for quantification of major compounds. Separately, the hot water extract was absorbed on Diaion HP-20 resin. And then, the absorbed fraction was eluted with methanol for HPLC. The contents of baicalin, baicalein, wogonoside and wogonin in different treatment methods were analyzed by HPLC. Total amount of four major components were 16.9% in 50% ethanol extract, 21.7% in 70% ethanol extract, 20.5% in 90% ethanol extract, and 39.3% in absorbed fraction of Diaion HP-20 resin. In these results, we found that resin absorption method is suitable for the extraction of enriched flavonoids from Scutellariae Radix.
Sosihotang is a herbal medicine traditionally used to treat chronic liver disease. This study was performed to investigate the effect of steaming Sosihotang at a $121^{\circ}C$ on its major compounds and neuroprotective activity. We evaluated quantitative changes of 6 major compounds in Soshihotang, saikosaponin A, homogentisic acid, baicalin, ginsenoside $Rg_3$, glycyrrhizin and 6-gingerol using HPLC-DAD. After steaming produce, saikosaponin A, homogentisic acid, baicalin, glycyrrhizin and 6-gingerol in Sosihotang were decreased and ginsenoside $Rg_3$ was increased. The neuroprotective activity of steamed Sosihotang was determined by MTT assay, comparing to Sosihotang. The steamed sosihotang showed a higher neuroprotective activity than Sosihotang. In conclusion, steam produce could improve neuroprotective activity of Soshihotang.
체내 면역시스템은 내부의 돌연변이 세포에 의하여 발생된 암 뿐만 아니라 세균감염에 의하여 기인된 여러질환으로 부터 우리의 몸을 보호한다. 하지만 노화됨에 따라 비정상적인 면역시스템은 류머티스 관절염과 같은 만성염증을 유발시킨다. 그러므로, 본 연구의 목적은 효능성분으로 바이칼린을 함유한 황금의 항염증 효과를 조사한 것이다. 먼저 HPLC 분석에서 SBWE는 42.2 mg/g의 바이칼린을 함유하고 있는 것으로 관찰되었다. Raw264.7 세포에서 황금열수추출물(SBWE)의 세포독성을 평가하기 위하여 MTT assay를 수행하였다. SBWE는 160 ${\mu}g/ml$ 이하의 농도에서 세포에 대한 독성이 없는 것으로 나타났다. 또한 lipopolysaccharide로 자극된 대식세포에서 발생하는 nitric oxide 소거능 효과를 조사해 본 결과 40 ${\mu}g/ml$의 농도에서 SBWE는 40%의 억제효과를 나타내었다. 뿐만 아니라 SBWE는 zymosan으로 자극된 대식세포의 식세포작용도 억제 하였다. 더욱이 SBWE는 농도에 비례하여 대식세포에서 생성되는 $TNF{\alpha}$함량을 감소시켰다. SBWE는 또한 시간경과 실험에서 인터류킨 베타($IL-1{\beta}$)의 생성을 억제하였다. 더욱이 cyclooxynase-2의 발현수준은 20 ${\mu}g/ml$의 SBWE 처리에 의하여 현저하게 감소되었다. 그러므로 이상의 연구결과는 황금 열수 추출물이 면역조절을 통해 항염증을 효능을 발휘할 수 있다는 하나의 증거를 제공한다.
황금(Scutellariae baicalensis)은 항염 작용이 뛰어나 예로부터 사용되어온 약재로, 본 연구는 인삼에서 분리한 유산균 Leuconostoc mesenteroides (L. mesenteroides)을 이용해 황금 발효물을 제조하고 항산화와 미백 효과를 조사하였다. 황금 발효물은 황금을 70% 에탄올로 추출한 후에 L. mesenteroides를 접종하여 발효제조하였다. 발효 전 황금과 황금 발효물에서 2가지 지표 성분 baicalin과 baicalein을 high-performance liquid chromatography (HPLC)을 이용하여 retention times ($t_R$)과 UV spectra를 확인함으로써 정성 및 정량 분석하였다. 세포 생존율 실험 결과, 발효 전후 황금 모두 독성이 확인되지 않았고 DPPH 라디칼 소거능 실험은 발효물의 $SC_{50}$ 값이 $34.43{\mu}g/mL$ 로 발효 전보다 우수한 효능을 나타내었으며, 세포 독성을 나타내지 않는 농도에서 흑색종 세포인 B16F10을 이용한 melanin 생성 억제 활성 실험 결과, 황금 발효물은 우수한 melanin 생성 억제 효과를 나타내었다($IC_{50}=68.17{\mu}g/mL$). 이상의 결과들로부터 황금 발효물이 항산화 효능뿐만 아니라 미백 효능을 갖는 화장품 원료로서 개발 가능성이 있음이 시사되었다.
Objectives : Chungsimyeonja-eum (CSYJE; Qingxinlianzi-yin in Chinese; Seishinrenshi-in in Japanese), a traditional herbal medicine, has been used for treating mouth dryness, hyperuresis. This study was designed to determine preservation period of CSYJE. We investigated the stability and biological activity of CSYJE depending on the preservation temperature and periods. Methods : CSYJE decoction was preserved for 0-6 or 12 months at room temperature (RT, $23{\pm}1^{\circ}C$) or refrigeration ($4^{\circ}C$). To evaluate the stability of CSYJE decoction, pH and dissolved solids content were measured. High-performance liquid chromatography (HPLC) analysis was performed to determine marker compounds-liquiritin apioside, liquiritin, baicalin, wogonoside, and glycyrrhizin-in CSYJE. To determine anti-inflammatory effect of CSYJE, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) was measured in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. Results : Both at RT and $4^{\circ}C$, pH was decreased depending on the preservation periods. There was no changes in dissolved solids content depending on the preservation temperature and periods. Both at RT and $4^{\circ}C$, the contents of liquiritin apioside and liquiritin were slightly increased at 1 month of storage. The level of baicalin was decreased time-dependently and the disappearance rate at RT is larger than at $4^{\circ}C$. CSYJE inhibited $PGE_2$ production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells and maintained inhibitory effect by 12 months both at RT and $4^{\circ}C$. Conclusions : Based on the disappearance rate of the baicalin in CSYJE, the preservation period is recommended within 8 months for RT and 12 months for $4^{\circ}C$.
The roots of Scutellaria baicalensis Georgi have been used in the chinese medicine for the treatment of inflammation, fever and headache. Recent studies had shown that baicalin and baicalein showed a detoxifying effect and could inhibit peripheral capillary permeability, and Wogonin was found to inhibit the proliferation of tumor cells. Wogonin has been synthesized as shown in schem. Compound 2 was prepared from 2,6-dimethoxy-1,4-benzoquinone(1) followed by acylation to give compound 3. The base treatment of 3 gave cyclized product which was carried by deprotection of methyl group chemoselectively. Overall step included relatively simple ten steps.
In order to study the reproducibility and effeciency of the manu-pacture system Hwanggum(黃芩) aqua-acupuncuture was prepared. The filtra-tion and dilution have been mainly employed in the study of the manupacture step. These methods were showed possibility of standardization and variety for aqua-acupuncture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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