Main tobacco diseases were surveyed on major flue-cured leaf tobacco fields throughout South Korea in 2006. Mosaic caused by potato virus Y and bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum were most severe during harvest season. During last ten years, the damage by tobacco mosaic virus was reduced but the incidence of bacterial wilt increased. These changes of the disease incidences coincide with release time of the tobacco cultivar resistant to the tobacco mosaic virus but susceptible to bacterial wilt pathogen. Wild fire(Pseudomonas syringae pv. tabaci strain ungulate) occurred severely at Kangwon province, though the symptom of wild fire with yellow halo was not observed.
The release of nanoscale membrane-bound vesicles is common in all three domains of life. These vesicles are involved in a variety of biological processes such as cell-to-cell communication, horizontal gene transfer, and substrate transport. Prokaryotes including bacteria and archaea release membrane vesicles (MVs) (20 to 400 nm in diameter) into their extracellular milieu. In spite of structural differences in cell envelope, both Gram-positive and negative bacteria produce MVs that contain the cell membrane of each bacterial species. Archaeal MVs characteristically show surface-layer encircling the vesicles. Filamentous fungi and yeasts as eukaryotic microbes produce bilayered exosomes that have varying electron density. Microbes also form intracellular vesicles and minicells that are similar to MVs and exosomes in shape. Electron and fluorescence microscopy could reveal the presence of DNA in MVs and exosomes. Given the biogenesis of extracellular vesicles from the donor cell, in situ high-resolution microscopy can provide insights on the structural mechanisms underlying the formation and release of microbial extracellular vesicles.
The synergistic effect on phosphate solubilization of single- and co-inoculation of two phosphate solubilizing bacteria, Burkholderia cepacia (C1) and Alcaligenes aquatilis (H6), was assessed in liquid medium and maize plants. Co-inoculation of two strains was found to release the highest content of soluble phosphorus (309.66 ?g/mL) into the medium, followed by single inoculation of B. cepacia (305.49 ?g/mL) and A. aquatilis strain (282.38 ?g/mL). Based on a plant growth promotion bioassay, co-inoculated maize seedlings showed significant increases in shoot height (75%), shoot fresh weight (93.10%), shoot dry weight (84.99%), root maximum length (55.95%), root fresh weight (66.66%), root dry weight (275%), and maximum leaf length (81.53%), compared to the uninoculated control. In a field experiment, co-inoculated maize seedlings showed significant increases in cob length (136.92%), number of grain/cob (46.68%), and grain weight (67.46%) over control. In addition, single inoculation of maize seedlings also showed improved result over control. However, there was no significant difference between single inoculation of either bacterial strains and co-inoculation of these two bacterial strains in terms of phosphate solubilization index, phosphorous release, pH of the media, and plant growth parameters. Thus, single inoculation and co-inoculation of these bacteria could be used as biofertilizer for improving maize growth and yield.
The identification of bacteriophage proteins on the surface of Lactobacillus rhamnosus Pen was performed by LC-MS/MS analysis. Among the identified proteins, we found a phage-derived major tail protein, two major head proteins, a portal protein, and a host specificity protein. Electron microscopy of a cell surface extract revealed the presence of phage particles in the analyzed samples. The partial sequence of genes encoding the major tail protein for all tested L. rhamnosus strains was determined with specific primers designed in this study. Next, RT-PCR analysis allowed detection of the expression of the major tail protein gene in L. rhamnosus strain Pen at all stages of bacterial growth. The transcription of genes encoding the major tail protein was also proved for other L. rhamnosus strains used in this study. The present work demonstrates the spontanous release of prophage-encoded particles by a commercial probiotic L. rhamnosus strain, which did not significantly affect the bacterial growth of the analyzed strain.
ABA-type block copolymers composed of poly(L-leucine)(PLL) as the A component and poly(ethylene glycol)(PEG) as the B component were synthesized by ring-opening polymerization of L-leucine N-carboxyanhydride initiated by primary amino group located at both ends of PEG chain. A silver sulfadiazine(AgSD)-impregnated wound dressing of sponge-type was prepared by the lyophilization method. Morphological structure of this wound dressing obtained by scanning electron microscopy(SEM) was composed of a dense skin layer and a macroporous inner sponge layer. Equilibrium water content(EWC) of wound dressing was above 10%. It increased with an increased of PEO content in the block copolymer due to the hydrophilicity of PEO. AgSD release from AgSD- impregnated wound dressing in PBS buffer(pH=7.4) was dependent on PEG composition in the block copolymer. Therefore, EWC and release of AgSD can be control by PEG composition. Antibacterial capacity of AgSD-impregnated wound dressing was examined in agar plate against Pseudmonas aeruginosa and Stapplococus aruous. Cytotoxicity of the wound dressing was evaluated by studing mouse skin fibroblast(L929). From the behavior of antimicrobial releasing and the investigation of the suppression of bacterial proliferation, it was supposed that the wound dressing containing antibiotics could protect the wound surfaces from bacterial invasion to suppress the bacterial proliferation effectively. In cytotoxicity observation, cellular damage was reduced by the control led released of AgSD from the LEL sponge matrix of AgSD-medicated wound dressing. In vivo test, granulous tissue formation and wound contraction or the AgSD and DHEA impregnated wound dressing were aster than any other groups.
Sublethal dose of bacterial lipopolysaccharide (LPS) would induce protection against cardiac ischemic/reperfusion (I/R) injury. This study examines the following areas: 1) the temporal induction of the cardio-protection produced by LPS; and 2) the relations between a degree of protection and the myocardial prostacyclin ($PGI_2$) production. Rats were administered LPS (2 mg/kg, i.v.), and hearts were removed 1, 4, 8, 14, 24, 48, 72,and 96 h later. Using Langendorff apparatus, haemodynamic differences during 25 min of global ischemia/30 min reperfusion were investigated. The concentration of $PGI_2$ in aliquots of the coronary effluent was determined by radioimmunoassay as its stable hydrolysis product $6-keto-PGF1_{\alpha}$ and lactate dehydrogenase release were measured as an indicative of cellular injury. LPS-induced cardiac protection against I/R injury appeared 4 h after LPS treatment and remained until 96 h after treatment. $PGI_2$ release increased 2-3 fold at the beginning of reperfusion compared to basal level except in hearts treated with LPS for 48 and 72 h. In hearts removed 48 and 72 h after LPS treatment, basal $PGI_2$ was increased. To determine the enzymatic step in relation to LPS-induced basal $PGI_2$ production, we examined prostaglandin H synthase (PGHS) protein expression, a rate limiting enzyme of prostaglandin production, by using Western blot analysis. LPS increased PGHS protein expression in hearts at 24, 48, 72, 96 h after LPS treatment. Induction of PGHS expression appeared in both isotypes of PGHS, a constitutive PGHS-1 and an inducible PGHS-2. To identify the correlationship between $PGI_2$ production and the cardioprotective effect against I/R injury, indomethacin was administered in vivo or in vitro. Indomethacin did not inhibit LPS-induced cardioprotection, which was not affected by the duration of LPS treatment. Taken together, our results suggest that $PGI_2$ might not be the major endogenous mediator of LPS-induced cardioprotection.
Single or co-inoculation of phosphate solubilizing bacterial and fungal strains (Burkholderia anthina and Aspergillus awamori respectively) was performed separately to assess their synergistic and antagonistic interactions and the potential to be used as bio-inoculants. Co-inoculation was found to release the highest content of soluble phosphorus (1253 ${\mu}g\;ml^{-1}$) into the medium, followed by single inoculation of fungal strain (1214 ${\mu}g\;ml^{-1}$) and bacterial strain (997 ${\mu}g\;ml^{-1}$). However, there was no significant difference between single inoculation of fungal strain and co-inoculation of fungal and bacterial strain in terms of the phosphorous release. The highest pH reduction, organic acid production and glucose consumption were observed in the sole A. awamori inoculated culture medium. According to the plant growth promotion bioassays, co-inoculation of the microbial strains resulted in 21% and 43% higher shoot and root growth of the mung bean seedlings respectively as compared to the respective controls. Therefore, co-inoculation of B. anthina and A. awamori showed better performance in stimulating plant growth than that in inoculation of each strain alone. However, assessment period of the present study being short, we recommend in engaging further experimentation under field conditions in order to test the suitability of the strains to be used as bio-inoculants.
Live bacterial vector vaccines are one of the most promising vaccine types and have the advantages of low cost, flexibility, and good safety. Meanwhile, protein secretion systems have been reported as useful tools to facilitate the release of heterologous antigen proteins from bacterial vectors. The twin-arginine translocation (Tat) system is an important protein export system that transports fully folded proteins in a signal peptide-dependent manner. In this study, we constructed a live vector vaccine using an engineered commensal Escherichia coli strain in which amiA and amiC genes were deleted, resulting in a leaky outer membrane that allows the release of periplasmic proteins to the extracellular environment. The protective antigen proteins SLY, enolase, and Sbp against Streptococcus suis were targeted to the Tat pathway by fusing a Tat signal peptide. Our results showed that by exploiting the Tat pathway and the outer membrane-defective E. coli strain, the antigen proteins were successfully secreted. The strains secreting the antigen proteins were used to vaccinate mice. After S. suis challenge, the vaccinated group showed significantly higher survival and milder clinical symptoms compared with the vector group. Further analysis showed that the mice in the vaccinated group had lower burdens of bacteria load and slighter pathological changes. Our study reports a novel live bacterial vector vaccine that uses the Tat system and provides a new alternative for developing S. suis vaccine.
An experiment was conducted to study the effect of ionophore enriched cold processed mineral block supplemented with urea molasses on microbial growth and rumen fermentation. Twelve adult male crossbred cattle were divided into four groups on body weight basis. Animals were given wheat straw as a basal diet. The animals of group I and II were supplemented with concentrate mixture and animals of group III and IV were supplemented with cold processed urea molasses mineral block (UMMB). Thirty mg monensin/day/animal were supplemented to the animals of group II and 35 ppm monensin were incorporated in the UMMB supplemented to the animals of group IV. Dry matter (DM) intake did not differ significantly among groups. Mean rumen pH was higher in UMMB fed animals. Total volatile fatty acids (TVFA) concentration (mmole/L strained rumen liquor (SRL) in group III (113.19) was significantly (p<0.05) higher than those of group I (105.83) and II (108.74) but similar to group IV (109.34). TVFA production (mole/day) was similar in all the groups. The molar proportion of acetate was significantly (p<0.01) higher in the group I (59.56) than those of group II (51.73) and IV (55.91) but similar to group III (57.12). The molar proportion of propionate was significantly (p<0.01) higher in the monensin treated groups i.e. group II (38.38) and IV (36.26) than those of group I (27.78) and III (33.06). Butyrate molar percent was significantly (p<0.01) higher in group I (12.65) than those of group II (10.19), group III (9.83) and IV (7.84). The reduction of acetate and butyrate was due to UMMB and monensin resulted in lower A:P ratio. Average bacterial pool and bacterial production rate did not differ significantly among groups. Total N concentration (mg/100 ml SRL) was significantly (p<0.01) higher in the group I (55.30) and III (57.70) as compared to the group II (47.97) and IV (47.59). Ammonia-N concentration (mg/100 ml SRL) of group III (34.99) was significantly (p<0.01) higher than that of the group I (25.76) which was again significantly (p<0.01) higher than that of the group II (20.79) and IV (19.83) indicating slower release of ammonia due to monensin in diet. Total bacterial, cellulolytic, proteolytic bacterial and fungal count at 4 h post feeding did not differ significantly (p<0.05) among treatment groups. However, methanogenic bacterial count was significantly (p<0.01) higher in the group I (11.80) compared to the group II (8.43) which was significantly (p<0.01) higher than that of the group III (4.70) and IV (2.90). Average protozoal population was affected by both treatments. Thus feeding of UMMB and monensin in diet affected the rumen fermentation pattern towards propionate production, slower release of ammonia and reduction in methanogenic bacteria in the rumen.
A rapid spectrophotometric method for detecting the mucinase complex was developed. Bovine submaxillary mucin is cleaved by commercial mucinase between the oligosaccharide chain and the side chain of peptide linkage, thereby liberating the N-acetyl neuraminic acid (NANA). The release of NANA resulted in an increase of absorbance at 280 nm. The susceptibility to NANA by the new method was found to be at least 10-fold more sensitive than the thiobarbituric acid method. Moreover, the quantification of NANA released from mucin by commercial neuraminidase and partially purified Vibrio parahaemolyticus mucinase showed a good linear correlation in proportion to the concentration of the enzyme used. These results demonstrate that the rapid identification of mucin degradation can be determined by a spectrophotometric assay, thereby providing a new, fast, and sensitive method for assaying the bacterial mucinase complex.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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