Kim, Dong-Uk;Kim, Ju-Young;Cha, Chang-Jun;Kim, Wonyong;Kim, Myung Kyum
Journal of Species Research
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제7권1호
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pp.9-12
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2018
In 2016, as part of a larger effort to discover indigenous prokaryotic species in Korea, we isolated the family Deinococcaceae and Planctomycetaceae as unrecorded bacterial species. From the high 16S rRNA gene sequence similarity (>98.5%) and formation of a robust phylogenetic clade with known species, it was determined that each strain was a distinct bacterial species. There are no official reports that these two species have been described in Korea; therefore, the bacterial strains of Deinococcus and Blastopirellula are described for the first time in Korea. Gram reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, and isolation sources are also described in the species description section.
톱다리개미허리노린재(Riptortus clavatus)의 장내세균이 분리되었다. 형태학적 분석과 생화학적 분석을 통하여 세균이 Staphylococcus succinus와 가장 유사한 것으로 동정되었다. 16S rRNA 유전자의 염기서열은 이러한 동정 결과를 뒷받침했다. 페니실린G를 톱다리개미허리노린재 성충에게 경구투여 하였을 때 장내세균 밀도 감소와 치사 효과를 유발하였다. 동일한 방법으로 곤충병원세균(Xenorhabdus nematophila)의 세 가지 대사물질(benzylideneacetone, proline-tyrosine, and acetylated phenylalanine-glycine-valine)을 처리하였을 때, 톱다리개미허리노린재 장내세균의 밀도감소와 치사효과를 확인하였다. 이러한 결과는 톱다리개미허리노린재의 장내세균이 Staphylococcus sp.이며, 곤충병원세균 대사물질의 항균 활성이 장내세균과 궁극적으로 톱다리개미허리노린재의 생존에 영향을 미친다는 것을 제시하였다.
The animal gut is filled with highly diverse microbes associated with host metabolism, physiology, and pathology. However, numerous animal gut microbes have not been cultured or reported. We isolated various bacterial species using culture-dependent approaches during a comprehensive investigation of endangered endemic vertebrate species in the Republic of Korea. A total of 18 unrecorded bacterial species were isolated from the feces of an Oriental stork (Ciconia boyciana), and from the intestinal tracts of a cobitid fish (Kichulchoia multifasciata) and a Korean splendid dace (Coreoleuciscus splendidus). Based on a phylogenetic analysis of 16S rRNA gene sequences, we discovered species belonging to the phyla Actinobacteria (eight species), Firmicutes (seven species), Proteobacteria (two species), and Bacteroidetes (one species). Based on their high 16S rRNA gene sequence similarities (>98.7%) and formation of monophyletic clades with type species, each species was classified into an independent and predefined bacterial species. Gram-stain reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, isolation source, and NIBR IDs for each species are described in the species description section.
Kim, Minji;Lee, Ki-Eun;Cha, In-Tae;Lee, Byoung-Hee;Park, Soo-Je
Journal of Species Research
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제9권4호
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pp.339-345
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2020
The Earth contains billions of microbial species, although the vast majority cannot be cultured in laboratories and are thus considered unidentified and uncharacterized. Extremophiles are microorganisms that thrive in extreme conditions, including temperature, salinity, and pH. Extremophilic microorganisms have provided important insights for biological, metabolic, and evolutionary studies. Between 2017 and 2019, as part of a comprehensive investigation to identify bacterial species in Korea, eight bacterial strains were isolated from marine and non-marine environments in Jeju Island. These strains were cultured under extreme salinity or pH conditions. Phylogenetic analysis using 16S ribosomal RNA(rRNA) gene sequencing indicated that all eight strains belonged to the phyla Gammaproteobacteria, Bacilli, and Alphaproteobacteria. Based on their high 16S rRNA gene sequence similarities(>98.7%) and the formation of strong monophyletic clades with their closest related species, all isolated strains were considered as an unrecorded strain, previously unidentified species. Gram stain reaction, culture conditions, colony and cell morphology, biochemical characteristics, isolation source, and National Institute of Biological Resources(NIBR) IDs are described in this article. The characterization of these unrecorded strains provides information on microorganisms living in Korea.
Owing to a distinct environmental regime and anthropogenic effects, freshwater bacterial communities of urban streams are considered to be different from those of large freshwater lakes and rivers. To obtain unrecorded, freshwater bacterial species in Korea, water and sediment samples were collected from various urban streams of the Han River watershed in 2018. After plating the freshwater samples on R2A agar, approximately 1000 bacterial strains were isolated from the samples as single colonies and identified using 16S rRNA gene sequence analyses. A total of 26 strains, with >98.7% 16S rRNA gene sequence similarity with validly published bacterial species but not reported in Korea, were determined to be unrecorded bacterial species in Korea. The unrecorded bacterial strains were phylogenetically diverse and belonged to four phyla, six classes, 12 orders, 16 families, and 21 genera. At the generic level, the unreported species were assigned to Nocardioides, Streptomyces, Microbacterium, Kitasatospora, Herbiconiux, Corynebacterium, and Microbacterium of the class Actinobacteria; Paenibacillus and Bacillus of the class Bacilli; Caulobacter, Methylobacterium, Novosphingobium, and Porphyrobacter of the class Alphaproteobacteria; Aquabacterium, Comamonas, Hydrogenophaga, Laribacter, Rivicola, Polynucleobacter, and Vogesella of the class Betaproteobacteria; Arcobacter of the class Epsilonproteobacteria; and Flavobacterium of the class Flavobacteriia. The details of the 26 unreported species, including Gram reaction, colony and cell morphology, biochemical properties, and phylogenetic position are also provided in the strain descriptions.
16S rRNA gene PCR법은 환자 검체로부터 병원성 미생물을 검출 및 동정에 사용되어진다. 본 연구는 대량의 임상미생물 진단을 위해 bacterial 16S rRNA 부위 유전자 서열을 이용하여 광대한 범위와 높은 특이도를 가지는 primer을 포함한 PCR법을 개발하였다. 10개 표준 균주 16S rRNA 보존 부위의 유전자 서열을 기반으로 primer set를 구축하였다. 98명 환자 검체에서 임상 미생물을 분리하였다. 98개 균주는 phenotypic 방법을 이용하여 확인하고, 개발된 primer set와 universal primer set를 이용한 PCR법으로 확인하였다. 획득한 PCR 산물은 forward primer, reverse primer, 그리고 자동화 DNA 분석기를 이용하여 각 균주의 16S rRNA 유전자 서열을 분석 및 확인하였다. 본 연구에서 개발된 primer set와 universal primer set의 임상미생물 검출에 대한 효율성을 평가하였고, 또한 phenotypic 방법과 분자생물학적 방법을 비교했다. 분리된 98개 균주를 대상으로 개발된 primer set로 16S rRNA PCR을 진행하여 778 bp 크기의 단일밴드로 증폭 되었음을 확인했다. 총 98개중 94개 균주(95.9%)는 phenotypic 결과와 동일함을 확인했다. 새로 개발된 primer set를 이용한 결과는 universal primer set를 이용한 98개 균주(100%)의 결과와 동일함을 확인하였다. 개발된 16S rRNA gene PCR법은 임상미생물 검출 및 동정에서 신속성, 정확성, 그리고 검사 비용 절감의 장점을 가진다. 개발된 primer set는 병원성 미생물 동정에서 효율성을 확인했다.
Kim, Dong-Uk;Kang, Myung-Suk;Kim, Ju-Young;Kim, Myung Kyum
Journal of Species Research
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제6권3호
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pp.214-223
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2017
As part of a larger study with the aim to discover indigenous prokaryotic species in Korea, nine bacterial strains were isolated and assigned to the phylum Proteobacteria in 2016. High 16S rRNA gene sequence similarity (>98.5%) and formation of a robust phylogenetic clades with known species indicated that each strain belongs to an independent and predefined bacterial species. This is the first report of these nine species in Korea: two strains of the Methylobacterium, two strains of the Microvirga, one strain of the Pantoea, and four strains of the Psychrobacter, all within the Proteobacteria. Gram reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, and isolation sources are also described in the species description section.
To obtain unrecorded freshwater bacterial species in Korea, water and sediment samples were collected from streams, lakes, and wetland of the Han River watershed in 2020. Approximately 800 bacterial strains were isolated on R2A agar after aerobic or anaerobic incubation, and identified using 16S rRNA gene sequences. A total of 28 strains, with ≥98.7% 16S rRNA gene sequence similarity with validly published bacterial species but not reported in Korea, were determined to be unrecorded bacterial species in Korea. The unrecorded bacterial strains were phylogenetically diverse and belonged to four phyla, eight classes, 13 orders, 19 families, and 25 genera. The unreported species were assigned to Acetobacter, Alsobacter, Mesorhizobium, Prosthecomicrobium, and Microvirga of the class Alphaproteobacteria; Vogesella, Formosimonas, Aquincola, Massilia, Acidovorax, and Brachymonas of the class Betaproteobacteria; Pseudoxanthomonas, Thermomonas, Lysobacter, Enterobacter, Kosakonia, and Acinetobacter of the class Gammaproteobacteria; Sulfuricurvum of the class Epsilonproteobacteria; Mycolicibacterium, Agromyces, Phycicoccus, and Microbacterium of the class Actinobacteria; Paenibacillus of the class Bacilli; Clostridium of the class Clostridia; and Flavobacterium of the class Flavobacteriia. The details of the unreported species, including Gram reaction, colony and cell morphology, biochemical characteristics, and phylogenetic position are also provided in the description of the strains.
서로 다른 처리공정으로 운영되는 4개의 하수시설을 대상으로 16S rRNA 유전자 기반의 pyrosequencing을 이용해 활성슬러지 하수처리 생물반응기의 세균군집구조를 분석하였다. 활성 슬러지에는 Rhodocyclales, Burkholderiales, Sphingobacteriales, Myxococcales, Xanthomonadales, Acidobacteria group 4, Anaerolineales, Methylococcales, Nitrospirales, Planctomycetales 목에 속하는 염기서열이 전체의 54-68%를 차지해, 소수의 세균 분류군이 활성슬러지 세균군집의 대부분을 차지하고 있었다. 이들 소수 세균 분류군의 조성은 처리장별로 차이가 있었으며, 하수처리장의 운전조건 및 환경조건에 영향을 받는 것으로 추측되었다. 또한, 활성슬러지는 매우 다양한 세균 종을 가지는 것으로 관찰되었는데(Chao1 richness estimate: 1,374-2,902 operational taxonomic units), 대부분의 다양성은 희귀 종에 기인한 것으로 나타났다. 특히, 분리막으로 운영되는 하수처리시설에서 높은 다양성을 나타내었는데, 처리공정이 매우 긴 고형물체류시간으로 운영되어 느리게 성장하는 다양한 세균이 서식하는데 용이하기 때문인 것으로 판단되었다. High-throughput pyrosequencing 기술을 이용하여 활성슬러지 세균군집을 처리장별로 비교 분석한 본 연구는 향후 활성슬러지 미생물의 생태학적 특성을 보다 잘 이해하고 하수처리공정을 개선하는데 도움이 될 것이다.
16S rRNA 유전자를 대상으로 454 파이로서열 분석법을 이용하여 해삼(Apostichopus japonicus)과 새우(Litopenaeus vannamei)의 장내 세균의 다양성을 분석하였다. 해삼의 경우, 대부분의 서열은 두 개의 속과 연관성이 있는 것으로 나타났다. 하나는 Fusobacteria 문의 Propionigenium 속이며, 다른 하나는 Bacteroidetes 문의 Flavobacteriaceae 과에 속하는 미분류 속이었다. 새우는 해삼에 비해 다양한 속들을 포함하고 있었으며 Lactococcus, Leuconostoc, Prochlorococcus, Vibrio 속들과 Flavobacteriaceae, Rhodobacteraceae, Desulfobulbaceae, Helicobacteraceae 과와 Mycoplasmatales 목에 속하는 미분류 속들을 포함하고 있었다. 해삼과 새우의 속들의 절반 이상이 환경에서 비배양적으로 얻어진 서열만 존재하는 미분류된 속인 것으로 확인되었다. 대용량 454 파이로서열 분석법을 통하여 해삼과 새우의 장내 세균의 다양성을 밝힐 수 있었으며, 그 결과 해삼과 새우는 아직까지 밝혀지지 않는 새로운 미생물을 많이 포함하고 있는 것을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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