• 한국초지조사료학회지
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• 제17권3호
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• pp.239-248
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• 1997

This study was conducted to investigate the effects of antagonistic microorganisms, Bacillus spp., on growth of alfalfa(Medicag0 sativa L.) in repeated cultivation soil(RCS) and unrepeated cultivation soil(URCS). Alfalfa was established by seeding into pots 12 cm in diameter and 9 cm in depth containing 1 : 1 mixture of soil and vermiculite with antagonistic bacteria and pathogenic fungi. The growth experiment of alfalfa was conducted in pots in a vinyl house. The bacteria used in this study were Bacillus subtilis and hsants. B. subtilis was isolated and identified 60m forage rhizosphere soil and hsants isolated through cell fusion fiom B. subtilis 101 and B. thuringiensis. B. subtilis was named B. subtilis 101 and hsants named F -3 and F -8. From dark culture experimenf alfalfa was longer lived in treated soil with antagonistic bacteria than that in non-treated soil, and longer lived in URCS than that in RCS. However, alfalfa was shorter lived in RCS and URCS than that in autoclaved RCS. The number of leaves of alfalfa were positively affected by the inoculation of the antagonistic bacteria in both RCS and URCS. Dry weight of shoot and root was increased by the inoculation of the antagonistic bacteria(P< 0.05). However, the growth of alfalfa was decreased by the inoculation of the pathogenic hngi both RCS apd URCS.

• Applied Biological Chemistry
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• 제19권2호
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• pp.82-92
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• 1976

재래식메주에 있어서 자연서식한 microflora의 상태에 따라 외부(外部) 내부(內部) 외부(外部)와 내부(內部)의 혼합으로 각각 3구의 재래식 고추장을 담가 숙성과정중의 제화학성분 및 미생물의 동태(動態)를 조사하고 숙성과정에 관여한 미생물을 순수분리하여 이들의 효소활성을 screening하여 우수균주를 선정 및 동정 하였으며 효소적 특성을 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 제화학 성분변화 (1) pH의 변화는 숙성 10일에 급격히 강하하였고 숙성 60일까지 점차 완만한 감소를 보이다가 그 이후는 약간 증가하였다. 메주외부고추장구(區)의 pH가 가장 낮았으며 메주내부고추장구(區)의 메주혼합고추장구(區)의 pH는 서로 비슷하였다. (2) 총산의 면화는 숙성 60일까지 3구(區) 공히 서서히 증가하다가 그 이후 점차 감소하였다. (3) 총질소의 변화는 숙성 60일까지 3구(區) 공히 점진 증가하다가 그후 약간 감소하였다. (4) Trichloroacetic acid에 가용(可容)인 질소의 변화는 숙성 10일에 3구(區) 공히 급격히 증가하였고 그후는 완만한 증가를 보였다. (5) amino태(態) 질소의 변화는 숙성 30일까지 3구(區) 공히 크게 증가하다가 그 이후는 완만하게 증가하였다. (6) 환원당의 변화는 숙성 50일까지 3구(區) 공히 증가하다가 그 이후는 서서히 감소하였다. 2. Microflora의 변화 (1) 호기성세균군(群), 혐기성세균군(群), mold군(群)의 변화는 숙성 $30{\sim}40$일까지 3구 공히 증가하였으나 그 이후는 감소하는 경향이었다. (2) Yeast군(群)의 변화는 3구 공히 숙성 20일까지는 보이지 않다가 pH가 5.4이하로 강하된 때부터 나타나기 시작하며 메주내부 고추장구(區)에서 처음에는 많이 나타났으나 점차로 감소하였고 메주 외부고추장구(區), 메주혼합고추장구(區)는 처음에는 적게 나타났으나 점차로 증가하였다. 3. 효소활성이 우수한 균주 및 그 효소특성 (1) amylase와 protease를 분비하는 우수균주는 Bacillus subtilis-P, Bacillus subtilis-G, Bacillus licheniformis-K, Aspergillus oryzae-B로 동정되었다. (2) amylase activity가 가장 강한 것은 Aspergillus oryzae-B였고 그 다음이 Bacillus subtilis-P Bacillus licheniformis-K, Bacillus subtilis-G의 순서였다. protease activity에 있어서는 Aspergillus oryzae-B와 Bacillus subtilis-P가 거의 비슷하게 우세하였고 Bacillus licheniformis-K, Bacillus subtilis-G의 순서였다. (3) 효소활성에 대한 식염농도 영향은 amylase가 protease보다 식염에 의한 저해를 많이 받고 있어서 고추장 식염농도인 15% NaCl에서 amylase activty는 $45{\sim}65%$, protease activity는 $40{\sim}46%$의 저해를 받았다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제20권1호
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• pp.21-26
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• 1991

the Bacillus subtilis LY-353 which secretes the protease isolated from seafoods. The opti-mum culture condition for production of protease from B. subtilis LY-353 was as follows ; tem-perature 35$^{\circ}C$ pH 7.5 salt concentration 1.0% The purification steps involved ammonium sulfate fractionation DEAE-Sephadex A-50 column chromatography and Sephadex G-100 gel filtration A 7.33 fold purification and 6.55 yield of protease was obtained from culture broth, The optimum pH and temperature for the enzyme action were pH7.5 and 55$^{\circ}C$ respecti-bely.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제24권2호
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• pp.188-196
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• 2014

Extracellular production of recombinant human bone morphogenetic protein-7 (rhBMP-7) was carried out through the fermentation of Bacillus subtilis. Three significant fermentation conditions and medium components were selected and optimized to enhance the rhBMP-7 production by using the response surface methodology (RSM). The optimum values of the three variables for the maximum extracellular production of rhBMP-7 were found to be 2.93 g/l starch, 5.18 g/l lactose, and a fermentation time of 34.57 h. The statistical optimization model was validated with a few fermentations of B. subtilis in shake flasks under optimized and unoptimized conditions. A 3-L jar fermenter using the shake-flask optimized conditions resulted in a higher production (413 pg/ml of culture medium) of rhBMP-7 than in a shake flask (289.1 pg/ml), which could be attributed to the pH being controlled at 6.0 and constant agitation of 400 rpm with aeration of 1 vvm.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제10권2호
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• pp.275-280
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• 2000

The inulin fructotransferse (depolymerizing) (IFTase, EC 2.4.1.93) gene of Arthrobacter sp. A-6 was cloned and expressed in Escherichia coli and Bacillus subtilis. The IFTase gene consisted of an ORF of 1.311 nucleotides encoding a polypeptide of 436 amino acids containing a signal peptide of 31 amino acids in the N-terminus. The molecular mass of the IFTase based on the nucleotide sequence was calculated to be 46.116 Da. The recombinant E. coli $DH5{\alpha}$ cells expressing the Arthrobacter sp. A-6 IFTase gene produced most of the IFTase intracelularly. In contrast, the recombinant B. subtilis DB 104 carrying the IFTas gene on a B. subtilis-E. Coli expression vector secreted the IFTase into the culture fluid efficiently.

• Journal of Microbiology
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• 제43권3호
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• pp.272-276
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• 2005

Bacillus subtilis ATCC 6633 was grown in BHIB medium supplemented with $Mn^{2+}$ for 96 h at $37^{\circ}C$ in a shaker incubator. After removing the microbial biomass, a lipopeptide biosurfactant was extracted from the supernatant. Its structure was established by chemical and spectroscopy methods. The structure was confirmed by physical properties, such as Hydrophile-Lipophile Balance (HLB), surface activity and erythrocyte hemolytic capacity. The critical micelle concentration (cmc) and erythrocyte hemolytic capacity of the biosurfactant were compared to those of surfactants such as SDS, BC (benzalkonium chloride), TTAB (tetradecyltrimethylammonium bromide) and HTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide). The maximum hemolytic effect for all surfactants mentioned was observed at concentrations above cmc. The maximum hemolytic effect of synthetic surfactants was more than that of the biosurfactant produced by B. subtilis ATCC 6633. Therefore, biosurfactant would be considered a suitable surface-active agent due to low toxicity to the membrane.

• 농약과학회지
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• 제20권4호
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• pp.375-379
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• 2016

내장산 토양에서 분리한 미생물들의 젤라틴 및 고구마뿌리혹선충의 난낭 분해활성을 평가하였다. 활성이 우수한 3종의 균주는 16S rRNA 염기서열을 이용하여 분석하였으며, Bacillus subtilis KRB-5와 Bacillus amyloliquefaciens KRB-9, 10이 분리동정되었다. 고구마뿌리혹선충에 20일간 노출시킨 고추모종에 분리동정된 3종의 미생물을 90일동안 처리하고 난낭과 고추모종의 지상부 생육에 미치는 영향을 조사하였다. 실험결과 B. subtilis KRB-5을 처리한 군에서는 미생물 무처리 군 및 다른 미생물 처리 군과 비교하여 고구마뿌리혹선충의 난낭 수가 현저하게 감소하였으며, 고추의 지상부 생육도 개선되는 것을 확인하였다. 따라서 B. subtilis KRB-5 균주를 이용한 박과 작물에 대한 확대 효능 평가와 시설 재배지 현장 시험 등의 추가적인 연구는 활용할 필요할 것으로 사료된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제30권9호
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• pp.1332-1339
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• 2017

Objective: This study investigated the effects of Bacillus subtilis CSL2 (B. subtilis CSL2) administration before Salmonella challenge on the fecal microbiota and microbial functionality of Hy-line Brown (HLB) laying hens. Methods: Fecal samples were collected from control (CON), Salmonella-infected (SAL) and Salmonella-infected, probiotic-treated (PRO) groups before and after Salmonella challenge for microbiome analysis using 16S rRNA gene pyrosequencing. Results: Infection with Salmonella led to decreased microbial diversity in hen feces; diversity was recovered with Bacillus administration. In addition, Salmonella infection triggered significant alterations in the composition of the fecal microbiota. The abundance of the phylum Firmicutes decreased while that of Proteobacteria, which includes a wide variety of pathogens, increased significantly. Bacillus administration resulted in normal levels of abundance of Firmicutes and Proteobacteria. Analysis of bacterial genera showed that Salmonella challenge decreased the population of Lactobacillus, the most abundant genus, and increased populations of Pseudomonas and Flavobacterium genera by a factor of 3 to 5. On the other hand, Bacillus administration caused the abundance of the Lactobacillus genus to recover to control levels and decreased the population of Pseudomonas significantly. Further analysis of operational taxonomic units revealed a high abundance of genes associated with two-component systems and secretion systems in the SAL group, whereas the PRO group had more genes associated with ribosomes. Conclusion: The results of this study indicate that B. subtilis CSL2 administration can modulate the microbiota in HLB laying hens, potentially acting as a probiotic to protect against Salmonella Gallinarum infection.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권2호
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• pp.160-164
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• 1989

알카리성 Bacillus sp. AL-8의 알카리성 amylase 유전자를 포함하는 5.7Kb의 EcoRI 단편을 pUB 110을 vector로 하여 amylase를 생산하지 못하는 B. subtilis sta-1에서 발현시켰다. 재조합 plasmid pMB802와 pMB809는 숙주세포인 B. subtilis에서 매우 안정하게 유지되었으며 amylase 생산이 공여균 주에서 보다 1.8배 증가하였다. 형질전환주에서 생산된 amylase는 공여균주와 같은 효소적 성질을 나타내었다. 5.7Kb 단편을 E. coli에 subcloning한 결과 3.7Kb의 EcoRI 단편에 알카리성 amylase 유전자가 존재하였다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제15권2호
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• pp.122-127
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• 2000

아플라톡신 생성균의 생육을 억제할 수 있는 미생물을 분리동정하고 진공동결 건조한 대사산물로부터 길항물질을 분리하였다. 대두로부터 아플라톡신 생육을 저해하는 길항균을 분리하였으며, 그 균은 Bacillus subtilis로 동정되었다. Bacillus subtilis는 아플라톡신 생성균에 대한 길항물질을 생산하였으며 MeOH추출, 실리카겔 흡착 크로마토그래피법, Sephadex LH-20 크로마토그래피법으로 길항물질을 분리하였다. 아플라톡신 생성균인 Asp. flavus와 Asp. parasiticus의 생육은 길항미생물인 Bacillus subtilis가 생산하는 길항물질에 의해 강하게 저해되었으며 이는 아플라톡신 오염방지를 위하여 효과적인 생물학적 방법일 것이라 기대된다.