식물생장 촉진 호르몬인 auxin을 생산하는 균주를 선발하기 위해 경산지역 경작지 토양에서 29종의 세균을 분리하였으며 Salkowsky test를 통해 auxin을 생산하는 14종을 선발하였다. 이 중 CAS(chrome azurol S) blue agar에서 siderophore의 생산을 확인 후 auxin과 siderohroe를 동시에 생산하는 AH18을 최종 선발하였다. AH18의 mung-bean adventitious root induction test를 통해 식물생장 촉진 능이 대조구에 비해 1.5배나 뛰어남을 알 수 있었고, 토마토 pot test에서 토마토 시들음병의 윈인균인 F. oxysporum에 대해서 길항력도 나타내었다. 선발된 AHl8 균주는 16S rDNA와 Biolog system을 통해 Bacillus subtilis 동정되었다. B. subtilis AH18은 Sucrose-asparagine-MgsO$_4$(SAM) medium (pH 6.0)에 접종하여 30$^{\circ}C$에서 3일간 배양 시 siderophore를 가장 많이 생산하는 것을 알 수 있었다.
박테리오신 BSCX1은 Bacillus subtilis cx1에 의해 생산되는 항균성 peptide이다. B. subtilis cx1의 박테리오신(BSCX1)은 Bacilius subtilis ATCC6633, Listeria monocytogenes KCTC3569를 포함한 그람양성균과 Salmonella typhi ATCC19430, Escherichia coli ATCC25922와 같은 그람음성균에 대해서도 비교적 넓은 항균활성 범위를 가진다. 박테리오신 생산균주인 B. subtilis cx1과 그것의 감수성 균주인 B. subtilis ATCC6633을 공동 배양한 결과, 박테리오신 BSCX1의 생산이 증가됨을 확인할 수 있다. 이 결과는 박테리오신 생산균주 B. subtilis cx1의 성장 배지내에 박테리오신 감수성 균주가 존재함이 BSCX1 생산을 촉진시키는 것을 의미한다. 감수성 균주의 박테리오신 유도 작용을 확인하였으므로 유도물질이 감수성 균주의 어느 위치에 존재하는지 밝히기 위해 B. subtilis ATCC6633을 분획하여 실험한 결과 세포내 분획과 세포파쇄물에 모두 유도물질이 존재함을 확인하였다. BSCX1 유도물질의 유도활성은 pH 2.5에서 pH 9.5에 걸쳐 전 구간에서 유지되었으며, $50^{\circ}C$이상에서는 3시간 이내에 불활성화 되었다. 유도물질에 단백분해효소인 proteinase K를 처리한 결과 유도활성이 사라져 단백질성 물질임을 알 수 있었다.
An attempt to produce more pigs in limited spaces inevitably generalized concentrated feeding operation (CFO). As concentrated pig production practice expanded, concerns on environmental issues grow concurrently. Since odor is the concerned most among those, we attempted to develop means to tackle odor emission from livestock operations. Previously, we excavated few microorganisms from pig manure and, one of them, Bacillus licheniformis was particularly useful to handle odor problem. In this study, we conducted our investigation to further characterize Bacillus licheniformis. Strain identification was conducted using Vitek 2 compact, and the optimal temperature and pH conditions to growth B. licheniformis were searched for by analyzing turbidity on O.D 600 nm. Results of this study can be summarized as these, (1) it was re-verified that the bacterial strain that purified from pig manure was, in fact, Bacillus licheniformis, (2) the bacterial growth was highest when the temperature was kept at $30^{\circ}C$, also (3) growth rate was dependent on media pH as it was high at neutral (6, 7 and 8) but dropped when it was diverged from neutral (4, 5, 9 and 10), and (4) regarding ammonia removal efficiency, B. licheniformis recorded 64% effectiveness after 48 h incubation and reached its highest (80%) at 72 h.
본 연구의 목적은 대나무 줄기표면에서 처음 발견 하였으나, 아직까지는 연구가 미흡한 신 균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1의 생리활성 효과를 알아보기 위하여 청국장 전통 발효 균주인 Bacillus subtilis NG24를 대조군으로 하여 항산화효과에 대한 비교분석을 실시하였다. 청국장 추출물의 항산화 실험 결과에서 Total Polyphenol 추출물 함량의 측정 결과는 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서 유의하게 증가하였다(p=0.032). SOD 유사활성과 DPPH radical 소거능 및 NO radical 소거능에서 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1을 포함한 시료에서 농도가 증가함에 따라 유의하게 증가하였다(p<.05). 추가적으로, 각 항산화 실험의 $IC_{50}$은 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서 SOD 유사활성(p=0.045), DPPH radical 소거능(p=0.041), NO radical 소거능(p=0.019)과 같이 유의한 차이로 감소하였다.
A soil microorganism producing ${\alpha}$- and ${\beta}$-glucosidase inhibitors was identified as Bacillus lentimorbus, based on the fatty acid and morphological analyses, along with biochemical and physiological tests. The ${\alpha}$-glucosidase inhibitor was highly produced by this strain in a culture medium containing $0.25\%$ of sodium glutamate and $0.5\%$ of glucose, pH 8.0 at $30^{\circ}C$ for 2 days. The ${\alpha}$-glucosidase inhibitor from culture filtrate of his strain was identified as water soluble, organic solvent nonextractable, and heat stable. In addition to ${\alpha}$-glucosidase inhibitor, this strain also produced ${\beta}$-glucosidase inhibitor in he same culture medium and this inhibitor showed an antifugal activity against Botrytis cinerea. While the production of ${\alpha}$- glucosidase inhibitor was decreased by a glucose concentration higher than $1\%$, the production of ${\beta}$-glucosidase inhibitor was lot Influenced by a glucose concentration higher than $20\%$. The ${\alpha}$-glucosidase inhibitor from culture filtrate of this strain was separated from the ${\beta}$-glucosidase inhibitor through Sephadex G-100 column chromatography.
Among 116 bacterial strains isolated from Korean fermented foods, one strain (SS-76) was selected for producing new oligosaccharides in a basal medium containing maltose as the sole source of carbon. Upon morphological characterization using scanning electron microscopy, the cells of strain SS-76 appeared rod-shaped; subsequent 16S rRNA gene sequence analysis revealed that strain SS-76 was phylogenetically close to Bacillus subtilis. The main oligosaccharide fraction B extracted from the culture supernatant of B. subtilis SS-76 was purified by high performance liquid chromatography. Subsequent structural analysis revealed that this oligosaccharide consisted only of glucose, and methylation analysis indicated similar proportions of glucopyranosides in the 6-linkage, 4-linkage, and non-reducing terminal positions. Matrix-assisted laser-induced/ionization time-of-flight/mass spectrometry and electrospray ionization-based liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry analyses suggested that this oligosaccharide consisted of a trisaccharide unit with 1,6- and 1,4-glycosidic linkages. The anomeric signals in the $^1H$-nuclear magnetic resonance spectrum corresponded to ${\alpha}$-anomeric configurations, and the trisaccharide was finally identified as panose (${\alpha}$-D-glucopyranosyl-1,6-${\alpha}$-D-glucopyranosyl-1,4-D-glucose). These results suggest that B. subtilis SS-76 converts maltose into panose; strain SS-76 may thus find industrial application in the production of panose.
SOHN, CHEON-BAE;MYUNG-HEE KIM;JUNG-SURL, BAE;CHEORL-HO KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제2권3호
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pp.183-188
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1992
A soil bacterium which produces raw starch-digesting $\beta$-amylase in culture medium, has been screened from soils. One strain, isolated and identified as Bacillus polymyxa No. 26, was selected as a $\beta$-amylase producing bacterium. Morphological and biological characteristics of the strain were found to be similar to those of a strain belonging to B. polymyxa. The electron microscopic observations of the bacterial vegetative cells and sporulated cells were extensively done to know the corelation between the enzyme synthesis and sporulation. When the bacterium was cultured on the appropriate media (3% dextrin, 0.3% beef extract, 0.5% polypeptone, 1% yeast extract and 0.3% NaCl at pH 7.0 for 4 days) raw starch-digestible $\beta$-amylase was produced extracellularly. This strain produced 130 units of $\beta$-amylase per ml in a culture medium containing 3% dextrin at $30^\circ{C}$. This value is compared to those of other $\beta$-amylase-producing strains. The optimum pH and temperature for crude enzymes were pH 6.5 to 7.0 and $50^\circ{C}$, respectively. The enzymes were stable between pH 5.5 and 9.0 for 30 min at $45^\circ{C}$.
For the treatment of Korean food-wastes, three mesophilic and one thermophilic bacteria were isolated from soil and fermented fertilizers. The thermophilic Streptomyces sp. strain WF021 produced two enzymes which were a protease and a lipase at 55$^{\circ}C$. The mesophilic Bacillus sp. strain WF024 produced four enzymes which were a protease, a lipase, a amylase and a cellulase when the strain was grown both at 3$0^{\circ}C$ and 55$^{\circ}C$. The Bacillus sp. PY123 had produced three enzymes which were a protease, a cellulase and a lipase at 3$0^{\circ}C$. The Bacillus sp. strain CM1 produced three enzymes which were a protease, a amylase, and a cellulase at 3$0^{\circ}C$. The bacteria were grown in media containing 6% NaCl at least and did not have antagonism each other. The four isolates treated much more food-wastes than referance strains did. In a flask without aeration, three reference strains treated 15.4% of food-wastes, while four isolates treated 23.7% of food-wastes. In a flask with aeration, food-wastes were treated 67.3% by four isolates, and 64.3% by three reference strains, but 53.9% without bacteria. However, food-wastes were treated about 78% in a 200$\ell$-reactor made by Siwon Co., while 65.8% in a 20$\ell$-reactor made by Sanyo Co.
미생물을 이용한 유용물질 생산연구의 일환으로 토양으로부터 생물고분자 생산균주를 분리하고, 이 분리균에 대한 균학적 성질 및 생성 생물고분자의 이화학적 성상을 검토하였다. 분리균주는 Bacillus속의 한 균종으로 동정 하였으며, 알칼리 내성균주의 특징을 나타내었다. 이 균주로부터 생성된 생물고분자는 성분분석, 정색반응 및 I.R. spectrum 분석결과 단백질 함량이 높고, 일부 amino sugar가 존재하나 uronic acid는 함유하지 않았다. 그러나 cetyl pyridinium chloride에는 침전되어 산성의 생물고분자인 것으로 추정되었다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제2권2호
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pp.185-189
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2001
Wild type Bacilus thuringiensis subsp. israelensis and B. sphaericus toxins have been used separately as active in ingredients for bacterial insecticides to control mosquito larvae due to their comparable toxicity to chemical insecticides. Cry11B, recently cloned from B. thuringiensis subsp. jegathesan, shows higher toxicity against three major species of mosquito larvae than Cry11A, one of the major component of B. thuringiensis subsp. israelensis inclusion body. To determine whether the combination of cry11B and B. sphaericus binary toxins is as toxic as B. thuringiensis subsp. israelensis parental strain, cry11B and B. sphaericus binary toxins genes were co-expressed as an operon using cytlA promoters/STAB-SD hybrid expression system in B. thuringiensis subsp. israelensis acrystalliferous strain 4Q7. However, unexpectedly, B. sphaericus binary toxins were barely produced, whereas relatively large amount of Cry11B was produced. When this strain was grown in four different media, NB+G and Peptonized Milk produced more toxin proteins and spores per unit of media than GYS and G-Tris. Toxicity of this strain against fourth instar Culex quinquefasciatus was ranged from of 8.3 to 45.7 ng/ml, with NB+G culture being the highest, and GYS culture was the lowest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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