Objectives : This study was performed to choose more effective neuro-protective acupuncture point and to verify the effect of acupuncture in promoting neurogenesis and angiogenesis as a result of its neuro-vasculo-regenerative effect in middle cerebral artery occlusion model in rats. Methods : By TTc staining we chose the most effective acupuncture point with neuro-protection. We randomly divided into four groups: Such as (1) sham group(with sham-operation), (2) sham+acupuncture group(with sham-operation), (3) middle cerebral artery occlusion group, (4) MCAO+AT group. Acupuncture procedure was performed for four days. Total RNA was extracted using TRIzol reagent, according to the manufacturer's instructions, and was purified using an RNAeasy mini kit. Immuno-histochemistry was performed using primary antibody mouse anti-BrdU, NeuN, Dcx, and VEGF. Results : We found that $ST_{36}$ had the more neuroprotective effect than $LI_{11}$ and $SP_3$. The microarray analysis revealed that 54 genes were more expressed neurogenesis pathway in MCAO+AT group compared with MCAO group(fold changes greater than or equal to twofold change). 11 genes were more expressed angiogenesis pathway. And 7 genes were more expressed VEGF pathway. Immuno-histochemistry revealed that cell proliferation, cell migration and cell maturation were increased. Conclusions : This study demonstrated that acupuncture on $ST_{36}$ had neuro-protective and neuro-restorative effect in ischemic brain injuries. And its mechanism might be related to promote neurogenesis and angiogenesis. These results suggest that acupuncture have potential benefits for the treatment of ischemic stroke.
본 연구의 목표는 일반적으로 사람들이 일상에서의 추위 노출 시간을 고려하여 단기간 추위노출과 지속적인 장기간의 추위 노출이 인지기능과 뇌의 신경세포생성과 신경전달물질에 미치는 영향을 규명하고자 하였다. 실험 방법으로 인지행동검사(Behavior test)와 면역조직화학법(Immunohistochemistry Method)을 실시하였다. 본 연구에서는 7주령(평균체중 $250{\pm}10g$) Sprague-Dawley 계열의 수컷 흰쥐(n=40)를 사용하여, 무선배치 방식으로 상온 대조군(n=10), 저온 3일군(n=10), 저온 5주군(n=10)으로 분류 하였다. $22^{\circ}C$(상대습도 40%)의 온도는 상온으로 설정 하였고, $4^{\circ}C$(상대습도 40%)는 추위 스트레스 환경으로 설정 하였다. 수동회피실험의 결과에 의하면, 추위 스트레스는 기억력의 감소를 가져왔다. 그러나 추위 스트레스에 의한 기억력 감소의 보상작용으로 신경전달 물질인 5-HT와 TPH의 증가가 나타나는 것을 면역조직화학법을 통해 해부시경학적으로 확인할 수 있었다. 그러나 보상작용에 의한 새로운 신경세포생성 증가가 기억력을 정상상태로 회복시키지는 못하였다.
구면과 비구면 RGP렌즈 장용시 효과를 비교하기 위하여 3주간 실험토끼 눈의 각막에 콘택트렌즈를 착용 시켜 조사하였다. 8마리의 흰 실험토끼 눈 중 4마리의 우안은 구면 RGP렌즈, 4마리의 우안은 비구면 RGP렌즈를 착용 하였다. 왼눈은 대조군으로 사용하였다. 콘택트렌즈착용 3주 후 안구를 적출하여 형태변화를 주사전자현미경으로 관찰하였으며 RGP렌즈를 착용시 각막 상피 세포증식률을 조사하였다. 구면 RGP렌즈를 착용 후, 상피층은 비구면에 비하여 손상을 받았고 상피층은 심하게 벗겨져 나갔으며 세포 크기는 비정상으로 변하였다. 구면과 비구면 렌즈 두 군 모두 많은 박테리아가 보였으며 렌즈의 후면은 양치류 모양의 형태를 발견하였다. 비구면 렌즈의 원재료는 구면렌즈보다는 다소 정형적으로 보였다. 이러한 형태는 대기로부터 산소 전달을 방해함으로 인하여 구면렌즈를 착용한 군에서 각막을 변화시킨 것으로 생각된다. 이 논문은 구면 렌즈보다는 비구면 렌즈가 생리적으로 각막 세포에 덜 영향을 미쳐 더 적합한 것을 제시한다.
본 연구의 결과, TPA 종양촉진 시작과 함께 실험식이를 급여하였을 때, 장뇌삼은 대조군과 인삼군보다 낮은 피부종양발생수를 나타내었으며 종양발생률에서도 대조군과 인삼군에 비해 장뇌삼군에서 종양의 발생이 지연되는 것으로 나타났다. 반면, DMBA 종양개시 한 달 전부터 실험 종료 시까지 실험식이를 급여하였을 때는 대조군과 장뇌삼군에 비해 인삼군의 종양발생수가 감소된 것으로 나타나 인삼은 암 예방효능이 장뇌삼보다 더 높은 것으로 나타났다. 장뇌삼과 인삼은 마우스 피부암이 아닌 다른 상피세포성 암에 대해서도 각각 이러한 효능을 보일 것인지에 대해서 후속연구가 요구되며 또한 앞으로 인삼과 장뇌삼의 유효성분을 발굴하고 이를 더욱 효과적으로 섭취할 수 있는 방법이 개발되어야 할 것으로 생각된다. 아울러 질적으로 우수한 우리나라 장뇌삼과 인삼이 건강기능식품으로서 뿐만 아니라 암 예방과 암치료에 사용될 수 있는 대체의약품으로 개발되기 위해서는 실질적인 임상치료 연구와 더불어 보다 구체적인 과학적 기능 규명연구가 필요하다고 생각된다.
It has been reported that CLA decreases fat deposition in vivo and in vitro experiments. Among CLA isomers, c9t11 and t10c12 have been shown to exert active biological activities. For example, t10c12 reduces body weight and increases lean body mass, whereas, c9t11 has little effect on body fattness. However, the underlying molecular mechanism for the anti-obesity action of CLA isomers are not well understood. The purpose of this study was to examine the effects of t10c12 and c9t11 on lipid accumulation, cell proliferation, cell death and the expression levels of Ucp genes which are proposed as targets for anti-obesity in 3T3-L1 preadipocytes. Isomers of CLA at 50$\mu$M were added into preadipocyte differentiation medium for 3, 6 and 9days. Control cells received only the vehicle in the differentiation medium. Cytochemical analyses for lipid accumulation, cell proliferation and apotosis were carried out to compare lipidogenesis and cellular activity. RT-PCR analysis of GAPDH, Ucp 2,3 and 4 were also performed to find any modulatory effects of CLA isomers on the metabolic genes. Lipid accumulation indicated by Oil Red-O staining was inhibited in CLA isomers as compared to the control. T10c12 isomer showed less lipidogenesis than c9t11 did. A decrease occurred in CLA isomers as shown by BrdU incorporation. Apotosis has occured at higher level in t10c12 when compared to that of t9c11. Ucp 2, 3 and 4 genes were also upregulated in CLA isomers. T10c12 showed higher level of Ucp gene expressions than the c9t11 did. The biological activities of CLA isomers were also found to be different during differentiation of 3T3-L1 preadipocytes, suggesting that different isomers may be active in certain stage of lipidogenesis. The results indicate that both c9t11 and t10c12 CLA isomers decrease lipidogenesis, inhibit cell proliferation, increase cell death and upregulate in Ucp gene expressions during 3T3-L1 preadipocyte differentiation. T10c12 isomer was more effective than c9t11 in overall anti-obesity activity.
Shiquandabutang is very famous prescription for tonifying vital energy. We examined the anti-metatstastic effect of Shiquandabutang with in vitro invasion assay model. We performed the following experiments and the results are listed below:Cell viability assay was carried to determine the dose of Shiquandabutang. At lower dose under 200 ${\mu}g/m{\ell}$ (89.6%) viability was very high. But, viability downed as dose grows. At the dose of 600 ${\mu}g/m{\ell}$ (54.2%) viability was almost half of that of control. And at high dose of 1000 ${\mu}g/m{\ell}$ (15.8%) viability was very pure. In BrdU incorporation assay, Shiquandabutang treated groups showed the decreased DNA synthesis rate compared with control group.(200 ${\mu}g/m{\ell}$ (64.4%), 400 ${\mu}g/m{\ell}$ (7.3%)) The results of gelatinase assay showed that Shiquandabutang decreases the gelatinolytic activity of MMP-9. We examined tube formation assay and the result was that Shiquandabutang ihhibits the tube formation at the dose of 200 ${\mu}g/m{\ell}$ and 400 ${\mu}g/m{\ell}$. We examined rat aortic ring assay and the result was that Shiquandabutang ihhibits the angiogenesis of the rat aortic ring at the dose of 400 ${\mu}g/m{\ell}$. From our research, part of the mechanism underlying anti-metastastic effect of Shiquandabutang was proven in vitro. Moreover, we knew that Shiquandabutang is more effectively inhibits the angiogenesis at high dose.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제33권2호
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pp.124-130
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2007
In the present study, I investigated the effects of N-methyl-D-aspartate (NMDA), arachidonic acid (AA), and Nitric Oxide Synthase Inhibitor (NOSI), alone or in combination, on the proliferation of cultured primary normal human oral keratinocytes (NHOK). The purpose of this study was therefore the preliminary study for the examination of the interaction between these agents and NHOK in order to elucidate the mechanisms by which epithelial growth and regeneration are regulated. NHOK were obtained from gingival tissue of 20 individuals aged 20 to 29, and third passage (P3) cells were used for this study. The DNA synthesis was measured by the BrdU assay. Addition of low concentration of AA ($1{\mu}M$) and high concentration of AA with NMDA group (NMDA+AA $10{\mu}M$) made DNA synthesis rate increase significantly at the early stage. Adding NNA ($10{\mu}M$) affected DNA synthesis rate to increase significantly in 4 hours. At the early stage, DNA synthesis was significantly active in the NOS-I with NMDA groups than in the control and the NMDA-only group, while it didn't become statistically meaningful in 24 hours. AA $1{\mu}M$ and NNA $10{\mu}M$ may induce the proliferation of the NHOK independently and NOS-I may induce the proliferation of the NHOK with NMDA. These reactions might be related to the NMDA receptor in the cell and the change of the intracellular calcium ion concentration.
목 적 : 폐섬유아세포는 예전에는 기도의 구조적 세포로만 알려져 왔으나, 최근에는 천식에서 기관지 운동의 톤을 조절할 뿐만 아니라 기도의 면역조절과 기도 개형에서 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀지고 있다. VEGF는 혈관 내피세포에서 강력한 작용을 하는 다기능적 사이토카인으로서, 상피내 세포의 세포분열을 유도하고, 상피세포의 투과도를 증가시키며, 상피세포의 이동을 향상시키는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. TARC는 Th2 세포의 선택적 이동을 유도하는 케모카인으로 알려져 있다. 본 연구에서는 PDGF와 TGF-${\beta}$로 자극시킨 인간 폐섬유아세포에서 VEGF와 TARC가 생성되는지와 dexamethasone이 폐섬유아세포에서 VEGF의 분비를 억제하는지를 알아보고자 하였다. 또한 폐섬유아세포와 기관지 평활근 세포와 함께 배양했을 때 VEGF 생성에 미치는 효과를 단독배양 시와 비교하였다. 방 법 : 폐섬유아세포와 인간 기관지 평활근세포를 각각 혹은 함께 배양한 뒤 48시간동안 무혈청 배지에서 성장을 정지시킨 후 TGF-${\beta}$ (10 ng/mL)와 PDGF (20 ng/mL)로 자극하였다. 자극 후의 세포 증식 반응과 배양액 상층액의 VEGF, TARC 농도를 측정하여 dexamethasone ($10^{-6}M$)으로 전처치 후 자극한 것과 비교하였다. 결 과 : PDGF와 TGF-${\beta}$로 자극하였을 경우 폐섬유아세포에서 VEGF 분비가 의미있게 증가하였고, 특히 PDGF와 TGF-${\beta}$로 함께 자극하였을 경우 더욱 의미있는 상승을 보였다. Dexamethasone은 폐섬유아세포의 VEGF 분비를 PDGF로 자극한 경우와 PDGF, TGF-${\beta}$ 같이 자극한 경우 모두에서 억제하였다. 인간 기관지 평활근 세포와 폐섬유아세포를 혼합 배양했을 때 VEGF 분비에는 상승적인 효과가 없었다. Dexamethasone은 폐섬유아세포 증식을 억제시키지 않았다. 폐섬유아세포를 PDGF와 TGF-${\beta}$로 자극했을 때 TARC는 분비되지 않았다. 결 론 : 폐섬유아세포는 VEGF 분비를 통해 기도 개형에 관여하며, 기관지 평활근 세포와 함께 배양해도 VEGF 분비에 상승 효과는 없다. Dexamethasone은 VEGF 분비를 억제하였으나 폐섬유아세포의 증식을 억제하지는 못하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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