A $2{\times}2{\times}4$ factorial study was conducted to examine the possibility of improving estimates of in vitro digestibility, using untreated (UBS) and ammonia-treated (ABS) barley straw, through homogenization of rumen fluid (RF) and by additions of urea (U) and casein (C) as N sources and Xylose + Glucose (XG) as energy sources into artificial saliva. Digestibiltiy of ABS was significantly greater than that of UBS (p < 0.001). There was a significant decrease in digestibility when additions (U, UC, UCXG) were compared with the control (p < 0.001). A 2-way interaction between RF and straw type was significant (p < 0.05) for dry matter digestibility (DMD). Homogenization of RF increased DMD of ABS (p < 0.05) whereas it decreased DMD of UBS (p > 0.05). The study showed that addition of N alone or in combination with energy sources was not better than control, rather the reverse, digestion was inhibited by a combination of U and casein (UC). It was concluded that sufficient N and branched chain fatty acids were supplied in the inoculum from sheep fed high protein grass cubes to support the growth of cellulolytic microbes during in vitro incubation. Further studies are, however, required to explore the potential of homogenization in improving the in vitro method to estimate digestibility of cereal straws.
A study was conducted to estimate nutritive value of forage sources used in deer diets. Bags containing feedstuffs were incubated four times for periods up to 72 hours in two chemostats filled with ruminal fluid from deer or cattle. Parameters estimated were water-soluble and $65{\mu}m$ filterable plus insoluble digestible fractions(No. = 4) and extent of disappearance(No. = 8) of feed neutral detergent fiber(NDF). Among tested feeds, the ranking of values of these parameters were soybean hulls > alfalfa pellets > corn cobs or rice straw > cottonseed hulls or rice hulls > sawdust, indicating that soybean hulls and alfalfa pellets were more fermentable than other agricultural residues. It is possible to utilize variability among tested feeds of fraction, disappearance rate and (or) extent of DM and NDF when these feeds are used as roughage sources in deer diets.
An in vitro trial was conducted to examine the effects of total mixed rations (TMR) on fermentation characteristics and effective degradability (ED) by rumen microbes. Three TMR diets were growing period TMR (GR-TMR, 67% TDN), early fattening period TMR (EF-TMR, 75.4% TDN) and late fattening TMR (LF-TMR, 80% TDN). Three TMR diets (3 g of TMRs in each incubation bottles) was added to the mixed culture solution of stained rumen fluid with artificial saliva (1:1, v/v) and incubated anaerobically for 48 hours at $39^{\circ}C$. The pH in all incubation solutions tended to decrease up to 48h, but the opposite results were found in concentration of total gas production, ammonia-N and total VFA in all incubations.The total gas production (p<0.05) in LF-TMR was highest compared with those of other diets. Also, concentration of total VFA was tended to increase in LF-TMR compared with other TMR diets in all incubations. The EDDM in both EF-TMR and LF-TMR was tended to high compared with GR-TMR (p=0.100). In this in vitro trials, concentration of propionate in all incubation solution was not affected by increased concentration of TDN. The results of the present in vitro study indicate that TMR may provide more favorable condition for nutrient digestion both in the rumen.
This study was conducted to determine the effects of the artificial culture medium of wild-ginsengs on in vitro fermentation characteristics. NH$_3$-N concentration was showed the highest in 3% WGM treatment among all treatments and control. In addition, microbial protein synthesis was significantly different in all treatments throughout the incubation time, and WGM 3% treatment was the highest at the 9 h incubation(P〈0.05). Protozoa numbers within rumen were decreased in all WGM treatments at 9 h incubation time, whereas WGM 3% treatment was always decreased throughout the incubation(P〈0.05). NDF and ADF digestibility were proportionally increased as the incubation time in both control and treatments. NDF digestibility showed no significantly difference between control and the 3% treatment, and ADF digestibility was similar in all. Total volatile fatty acid(VFA) concentrations of WGM treatments without 5% were significantly higher than control (P〈0.05). No differences were observed in total VFA, acetate, propionate and butyrate concentration among the WGM treatments. Acetate/Propionate ratio of WGM treatments was higher than control after 12 h incubation(P〈0.05). As a result of the artificial culture medium of wild-ginseng on rumen fermentation characteristics in vitro, microbial protein synthesis of WGM treatment was higher than control, and WGM 3% was the highest in all treatments(P〈0.05). The effect of saponin in artificial culture medium of wild-ginseng tended to decrease NH$_3$-N concentration, while it increases the microbial synthesis in early incubation. Therefore, artificial cultures medium of wild-ginseng can increase utilization of feed by microbial and anti-protozoal effects of saponin, which may enhance microbial synthesis capacity in early fermentation period in rumen.
An in vitro study was conducted to examine the effect of monensin or fish oil addition on bio-hydrogenation of $C_{18^-} unsaturated fatty acids and CLA production by mixed ruminal bacteria when incubated with safflower oil. Commercially manufactured concentrate (1%, w/v) with safflower oil (0.2%, w/v) were added to mixed solution (600 ml) of strained rumen fluid and McDougalls artificial saliva (control). Monensin $Rumensin^{(R)}$, 10 ppm, w/v, MO), mixed fish oil (0.02%, w/v, absorbed to 0.2 g alfalfa hay, FO) or similar amounts of monensin and fish oil (MO+FO) to MO and FO was also added into the control solution. All the culture solutions prepared were incubated in the culture jar anaerobically at $39^{\circ}C$ up to 12 h. Higher pH (p<0.047) and ammonia concentration (p<0.042) were observed from the culture solution containing MO at 12 h incubation than those from the culture solutions of control or FO. The MO supplementation increased (p<0.0001-0.007) propionate proportion of culture solution but reduced butyrate proportion at 6 h (p<0.018) and 12 h (p<0.001) of incubations. Supplementation of MO or MO+FO increased (p<0.001) the proportions of $C_{18:2}$. The MO alone reduced (p<0.022-0.025) the proportion of c9,t11-CLA compared to FO in all incubation times. The FO supplementation increased the proportion of c9,t11-CLA. An additive effect of MO to FO in the production of c9,t11-CLA was observed at 6 h incubation. In vitro supplementation of monensin reduced hydrogenation of $C_{18^-}$UFAs while fish oil supplementation increased the production of CLA.
In order to develop a high cellulolytic direct-fed microorganism (DFM) for ruminant productivity improvement, this study isolated cellulolytic bacteria from the rumen of Holstein dairy cows, and compared their cellulolytic abilities via DM degradability, gas production and cellulolytic enzyme activities. Twenty six bacteria were isolated from colonies grown in Dehority's artificial (DA) medium with 2% agar and cultured in DA medium containing filter paper at $39^{\circ}C$ for 24h. 16s rDNA gene sequencing of four strains from isolated bacteria showed that H8, H20 and H25 strains identified as Ruminococcus flavefaciens, and H23 strain identified as Fibrobacter succinogenes. H20 strain had higher degradability of filter paper compared with others during the incubation. H8 (R. flavefaciens), H20 (R. flavefaciens), H23 (F. succinogenes), H25 (R. flavefaciens) and RF (R. flavefaciens sijpesteijn, ATCC 19208) were cultured in DA medium with filter paper as a single carbon source for 0, 1, 2, 3, 4 and 6 days without shaking at $39^{\circ}C$, respectively. Dry matter degradability rates of H20, H23 and H25 were relatively higher than those of H8 and RF since 2 d incubation. The cumulative gas production of isolated cellulolytic bacteria increased with incubation time. At every incubation time, the gas production was highest in H20 strain. The activities of carboxymethylcellulase (CMCase) and Avicelase in the culture supernatant were significantly higher in H20 strain compared with others at every incubation time (p<0.05). Therefore, although further researches are required, the present results suggest that H20 strain could be a candidate of DFM in animal feed due to high cellulolytic ability.
This experiment was conducted to investigate effects of non-ionic or zwitterionic (+/-) surfactants on digestibility of rice straw, and changes of growth of rumen mixed microbes, pH, and gas production during in vitro fermentation. Also, during in vitro ruminal fermentation, microbial attachment on rice straw was investigated using scanning electron microscopy (SEM). Tween 80 or SOLFA-850 for non-ionic surfactant (NIS), and 3-(Dodecyldimethylammonio) propanesulfanate (DDAP) for zwitterionic surfactant (ZIS) was supplemented by 0.05% and 0.1% in Dehority's artificial medium containing Holtein rumen fluid, respectively, and the substrate for fermentation was rice straw passed through 1 mm screen. The experiment was composed of 7 treatments (two levels of two NISs, two levels of a ZIS) including the control, and 6, 12, 24, 48 and 72 hr of fermentation time with 3 replications per treatment. Treatment of Tween 80 increased in vitro DM digestibilities during 48 hr and 72 h post fermentations compared to the other treatments, whereas treatment of DDAP as a ZIS resulted in decreased DM digestibility than that of the control from 24 hr post fermentation (P<0.05). Gas production in vitro was greater (P<0.05) with addition of NIS than the control or ZIS, and increased as fermentation time elapsed. Rumen mixed microbial growth was greatest with addition of Tween 80 as NIS, and lowest when DDAP as ZIS was supplemented to the fermentation tube (P<0.05). In SEM observation, rumen microbial population attached on rice straw particle was greater with addition of NIS, but was less with addition ZIS compared with the control. In conclusion we could not found any positive effects of ZIS surfactants on rumunal fermentation characteristics and rumen microbial growth rates.
The present study was conducted to investigate effective starter culture to improve biological activity of Asarum sieboldii. Antibacterial activity, antioxidant activity and reduction of enteric rumen methane production were used as criterions for biological activity. Ground A. sieboldii was added in MRS broth at 10% (w/v) and fermented by different starter cultures. Weissella confusa NJ28, Weissella cibaria NJ33, Lactobacillus curvatus NJ40, Lactobacillus brevis NJ42, Lactobacillus plantarum NJ45 and Lactobacillus sakei NJ48 were used for starter culture strains. Each starter culture was inoculated with 1% (v/v) ratio and fermentation was performed at $30^{\circ}C$ with agitation (150 rpm) for 48 h. MRS broth for the control was employed without starter culture. Then the fermentation growth was dried and extracted using ethyl alcohol. The growth of starter culture was detected at NJ40, NJ42, NJ45 and NJ48. And the highest cell growth was found in NJ40. Antibacterial activity against to Staphylococcus aureus, Listeria monocytogens, Mannheimia haemolytica and Salmonella gallinarum were observed in the extract fermented by NJ40 and NJ45. All treatments showed antioxidant activities, however, there were no significant differences (p>0.05). In in vitro rumen fermentation, negative control (NC) and positive control (PC) were assigned to without extract and with non-fermented A. sieboldii extract. Significant suppression of gas productions were detected in positive control and treatments compared to negative control (p<0.05). However, total volatile fatty acid production was not suppressed. Significant methane reduction per total volatile fatty acid productions were found in positive control and NJ45 treatment (p<0.05). The present study suggested a fermentation of A. sieboldii using NJ45 strain could improve its biological activity and make possible for its use in bio additive for enteric rumen methane mitigation without suppression of animal productivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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