Whether there exists a sympathetic neural mechanism regulating the expression of aquaporin (AQP) water channels in the kidney was investigated. Male Sprague-Dawley rats were treated with reserpine (1 mg/kg, IP), and the expression of AQP1-4 proteins was determined in the kidney one day thereafter. Following the treatment with reserpine, the systolic blood pressure measured in a conscious state was significantly decreased in the experimental group compared with that in the control $(83{\pm}8\;vs\;124{\pm}6\;mmHg;\;n=6\;each,\;P<0.05)$. The expression of AQP2 proteins was decreased in the cortex, outer medulla, and inner medulla. The decrease of AQP2 proteins was in parallel in the membrane and the cytoplasmic fractions, suggesting a preserved AQP2 targeting. No significant changes were observed in the expression of AQP1, AQP3, or AQP4. Neither basal nor AVP-stimulated formation of cAMP was significantly altered. These results suggest that the sympathetic nervous system has a tonic stimulatory effect specifically on the expression of AQP2 water channels in the kidney.
Alcohol intake is known to affect various organs in the human body, causing reduction of salivation in the oral cavity. Hypo-salivation effect of alcohol is a common feature, but the mechanism in salivary glands is still poorly studied. Therefore, in this study, the changes in salivary secretion and water channel protein (aquaporin5, AQP5) in salivary glands of mice were investigated after ethanol administration. Animals were divided in to 4 groups with the control, 4 g/kg ethanol, 8 g/kg ethanol and 16 g/kg ethanol administration groups. One hour after ethanol administration, saliva was collected from the oral cavity, and the animals were killed and parotid and submandibular glands were extracted to analyze the histopathology, AQP5 immunihistochemistry and AQP5 protein level. According to the results, the salivation rate decreased irrespective of the ethanol dose in mice, and viscosities increased with increase in ethanol dose. However, there were no pathological changes in parotid and submandibular glands due to ethanol administration. Expression of AQP5 in parotid and submandibular glands decreased with increase ethanol administration These results indicate that the reduction of salivary secretion due to acute alcohol intake is closely related to decrease of the water channel protein such as AQP5 in parotid glands and submandibular glands, rather than the damage of salivary glands.
Kim, Hyun-Mi;Hwang, Hyun-Sik;Lee, Suk-Chan;Jo, Su-Hyun;Kim, Beom-Gi
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.53
no.4
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pp.189-194
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2010
We confirmed the hypo-osmotic shock strengths and duration, different type of vectors, and subcelluar localization to identify the optimum analysis condition of plant aquaporin activity in Xenopus ooctye using Arabidopsis thaliana AtPIP2-1 gene. Six minutes and 1/5ND buffer hypoosmotic shock treatment was the best condition to show the maximum swelling of Xenopus oocytes where AtPIP2-1 was expressed using pcDNA3.1 vector. AtPIP2-1 protein was expressed more efficiently in pGEMHE vector which has 5' and 3' UTR (untranslation region) of Xenopus ${\beta}$-GLOBIN gene in multiple cloning site than in pcDNA3.1 vector. Also green fluorescence of GFP fused to AtPIP2-1 was detected onto oocyte plasmamembrane where is the proper subcellular localization target of AtPIP2-1.
Follicular cystic ovary (FCO) is one of the major causes of reproductive failure in cattle. Genetic alterations affect the function of diverse cells and/or tissues, which could be present in cystic ovaries. A microarray analysis was performed to screen differential gene expressions in follicular cystic follicles of cattle. In this study, we hypothesized that follicular cysts may be induced by changes in ion- and transporter-related gene expression. Microarray data showed that fibrinogen-gamma (FGG) and low density lipoprotein receptor-related protein 8 (LRP8) were up-regulated, while choline transporter-like protein 4 (SLC44A4), very long-chain acyl-CoA synthetase homolog 2 (SLC27A5), annexin 8 (ANXA8), and aquaporin 4 were down-regulated in follicular cystic follicles. A semi-quantitative RT-PCR was carried out to validate DEGs altered in follicular cystic follicles. Of six DEGs, three DEGs (FGG, SLC44A4, and aquaporin 4) showed a positive correlation between microarray and semi-quantitative PCR data. We focused on FGG, among three DEGs, which was highly up-regulated in follicular cystic follicles. The FGG mRNA was upregulated by 8.4-fold and by 1.7-fold in the bovine follicular cystic follicles as judged by microarray and RT-PCR analysis, respectively. However, there was no significant changes in the expression level of FGG protein in both follicular cystic follicles and granulosa cells isolated from follicular cystic follicles by Western blot analysis. Although this study does not reveal a positive correlation between the mRNA and protein level, FGG appears to be an important biomarker in the discrimination of follicular cyst from normal ovary.
Background and objectives: Salivary hypofunction is one of the common side effects after radioiodine therapy, and its pathophysiology is salivary ductal stenosis resulting from ductal cell injury. This study aimed to develop the functional culture environment of human parotid gland ductal cells in in vitro three-dimensional perfusion culture system. Materials and Methods: We compared plastic dish culture method and three-dimensional culture system containing Matrigel and nanofiber. Morphogenesis of reconstituted salivary structures was assessed by histomorphometry. Functional characteristics were assessed by immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction (aquaporin 5, CK7, CK18, connexin 43, and p21). In addition, we designed the media perfusion culture system and identified higher rate of cell proliferation and expression of connexin 43 in perfusion system comparing to dish. Results: Human parotid ductal cells were well proliferated with the ductal cell characters under environment with Matrigel. In the presence of Matrigel, aquaporin 5, CK18 and connexin 43 were more expressed than 2D dish and 3D nanofiber setting. In the media perfusion culture system, ductal cells in 3D culture media showed higher cells count and connexin 43 expression compared to 2D dish. Conclusion: This in vitro ductal cell perfusion culture system using Matrigel could be used to study for radioiodine induced sialadenitis model in vivo.
Objectives : This study aimed at evaluation of the effects of Gastrodiae Rhizoma on brain edema and aquaporin water channel expressions in the brain. Methods : Brain edema following intracerebral hemorrhage (ICH) was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type VII in Sprague-Dawley rats. Then ethanol extract of Gastrodiae rhizoma was treated once a day for 3 days. Brain edema % and water contents, and cell size of neurons in the cerebral cortex were examined. Immuno-histochemistry was processed for AQP4, AQP1, and AQP9 expressions in the brain sections and area % of immuno-labeling was analyzed with image analysis. Results : 1. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced brain edema of ICH induced rats significantly. 2. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced excessive brain tissue water contents of ICH induced rats significantly. 3. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced cellular edema of neurons in cerebral cortex of ICH induced rats significantly. 4. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP4 immuno-positive area % in cerebral cortex and external capsule of ICH induced rat brain significantly. 5. Ethanol extract of Gastrodiae Rhizoma reduced AQP9 immuno-positive area % in glia limitans externa of ICH induced rat brain significantly. Conclusions : These results suggest that Gastrodiae Rhizoma reveals protective effects against brain edema and cytotoxic edema of neurons by means of down-regulation of AQP4 expression in the brain.
연구 목적: 난소에서 분비되는 스테로이드 호르몬인 에스트로젠과 프로게스테론은 포유동물의 생식기관 발달과 정상적인 생식 기능, 수정과 배아의 착상에 중요한 역할을 한다. 특히 에스트로젠은 자궁내액을 내강으로 분비하여 자궁부종 기작에 중요한 역할을 한다. 자궁내액은 정자의 수정능력 획득과 착상전 배아의 발달에 매우 중요하다. Aquaporin (AQP)은 막관통 물수송 단백질로서 여러 조직에 넓게 분포되어 있으며, 세포간 또는 상피세포간 물의 이동에 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 생쥐 자궁에서 스테로이드 호르몬에 의해 조절되는 자궁내액의 이동에 AQP 유전자가 관여하는지를 알아보았다. 연구 재료 및 방법: 난소 절제술을 시행한 생쥐에 스테로이드 호르몬을 피하주사하고 6, 12, 24시간 간격으로 자궁조직을 적출하였다. 대조군은 sesame oil만을 주사한 후 6시간째에 수획한 자궁조직을 사용하였으며, 실험군은 시간대별과 스테로이드 처리별로 채취한 자궁조직에서 역전사중합효소반응을 수행하였다. 역전사중합효소반응을 통해 막관통 단백질인 AQP-4, -5, -8 mRNA의 발현양상을 살펴보았다. 또한 mRNA의 위치를 살펴보기 위해 laser microdissection을 이용하여 RT-PCR을 수행하였다. 마지막으로 자궁조직내에서의 단백질 발현 부위를 관찰하기 위해 면역조직화학염색을 실시하였다. 결 과: AQP-4, -5, -8 mRNA은 프로게스테론을 처리한 군보다 에스트로젠을 처리한 군에서 많이 발현되었으며, 에스트로젠을 주사한 지 6시간째 발현정도를 대조군과 비교할 때 AQP-4, -5, -8 mRNA가 각각 7.9배, 2.8배, 3.8배로 나타났다. AQP-4, -5, -8 mRNA는 간충조직보다 자궁내 상피조직에서 스테로이드 호르몬의 영향을 받아 발현양상의 차이가 나타났으며, 주로 에스트로젠의 영향을 받아 발현이 증가하였다. AQP-4 단백질은 에스트로젠을 24시간 처리한 후 프로게스테론을 처리한 군의 자궁내 상피조직에서 많이 발현되었으며, AQP-5와 -8 단백질은 에스트로젠을 처리한 군의 자궁내 상피조직에서 발현이 증가하였다. 결 론: 이상의 결과를 통해 AQP-4, -5, -8은 주로 에스트로젠에 의해 자궁내 상피세포에서 발현이 증가되는 것으로 보아 에스트로젠의 영향하에 일어나는 자궁내액의 이동으로 인한 자궁부종기작에 이동통로로서 관여하는 것으로 사료된다.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.32
no.1
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pp.1-7
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2006
The present study was aimed to explore the role of sympathetic and parasympathetic nerves in the regulation of sodium transporters and water channels in the salivary gland. Rats were denervated of their sympathetic and parasympathetic nerves to the submandibular gland, and the glandular expression of sodium transporters and water channels was determined by Western blot analysis. The expression of either ${\alpha}1$ or ${\beta}1$ subunit of Na, K-ATPase was not significantly affected either by the sympathetic or by the parasympathetic denervation. The expression of subunits of epithelial sodium channels was significantly increased both in the denervated and contralateral glands either by the sympathetic or by the parasympathetic denervation. Neither the sympathetic nor the parasympathetic denervation significantly altered the expression of aquaporin-1 (AQP1). Nor was the expression of AQP4 affected significantly by the parasympathetic or the sympathetic denervation. On the contrary, the expression of AQP5 was significantly increased not only by the parasympathetic but also by the sympathetic denervation. These results suggest that sympathetic and parasympathetic nerves have tonic regulatory effects on the regulation of certain sodium transporters and AQP water channels in the salivary gland.
This study was undertaken to collect basic knowledge of Jatropha which is one of bio-energy crops, based on the understanding of physiological and molecular aspects under salt and drought conditions. The treatments were followed as: 100, 200 and 300 mM NaCl for salt stress and 5, 10, 20 and 30% PEG for drought stress for 8 days, respectively. Leaf growth, stomatal conductance, chlorophyll fluorescence and gene expression of aquaporin (JcPIP2) of Jatropha were investigated. From 2 days after treatments, plants treated with higher than 100 mM NaCl and 10% PEG respectively were significantly suppressed in leaf length, width, and stomatal conductance, but 5% PEG treatment showed that plant growth was improved more than control plant. Semi-quantitative RT-PCR analyses revealed that the JcPIP2 gene was expressed in root, stem, cotyledon and leaves. It was not detected in leaves at 200 and 300 mM NaCl treatments. However, transcripts of JcPIP2 were induced in roots and stems under salt and drought conditions compared to those of healthy plants. Therefore, it was concluded that JcPIP2 plays an important role in improving drought tolerance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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