There are several methods currently being used to diagnose tuberculosis in patients, such as smear, PCR, tuberculosis culture and X-ray. For a proper medical treatment, antimicrobial susceptibility test and rapid drug susceptibility testing have been operated. Tuberculosis bacilli usually need 3~8 weeks of culture period because of delay in RNA synthesis and require 15~22 hours for generation. After a germ raises in culture, we initiated antimicrobial susceptibility test for a proper treatment. It has some difficulties to give a proper prescription for a tuberculosis patient because antimicrobial susceptibility test requires 4 weeks. To supplement this, we are practicing drug susceptibility testing which allow us to know the sensibility of RMP and INH after 2 or 3 days. But this is only possible when more than 2 positive germ. Therefore, we should practice rapid drug susceptibility testing with culture test. But if media is contaminated by other germs except Mycobacterium tuberculosis, it's hard to interpret result about culture test and to practice antimicrobial susceptibility test and rapid drug susceptibility testing. Because we have to practice again smear, culture test after extracting specimen from the patient, time is consumed and proper patient treatment is postponed. To address these problems and quick patient treatment, rapid drug susceptibility testing is practiced by using GenoType$^{(R)}$ MTDRplus method. As a result of this method we detected sensibility 10 and 7 cases and resistance 0 and 3 cases using RIM and INH respectively with other 1 case toward medicals out of the total 11 test. In conclusion rapid drug susceptibility testing can be used from the contaminated specimen after elimination of contaminated source from culture and proved that it can be practiced for rapid examination of a tuberculosis patient.
A new method for antimicrobial susceptibility testing of vitro-cultured bacteria on an ordinary fluorescence spectrometer was developed. The viable bacteria reduced 3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) to produce insoluble particles that displayed intense resonance scattering light. The assay showed a linear relationship between the number of viable bacteria and the intensity of resonance scattering light. Dead bacteria were unable to reduce MTT. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus exposed to flavonoids from Marchantia convoluta showed a flavonoids concentration-dependent inhibition of the ability to reduce MTT. In the assay, less than 12 h was required to attain susceptibility results and fewer bacteria were utilized than in traditional methods. The RLS technique could, in combination with the MTT assay, be a rapid and sensitive measuring method to determine the in vitro activity of new antimicrobials.
In this study, we conducted to the development of a rapid antimicrobial susceptibility test method using WST-1 which is known to water-soluble tetrazolium salt, in order to rapidly response against bacterial diseases in fish. Eight of antibiotics which are permissioned for marine organism from government were used to rapid antimicrobial susceptibility testing using the WST-1. As a result, a similar tendency was verified compare to conventional antibiotic susceptibility test results. Generally, the antibiotic susceptibility test method required about 3 days (72 hours) for determine the effective antibiotics, however, we have confirmed that the our method using WST-1 was required at least 36 hours in this study. Consequentially, our method will contribute to development of rapid antimicrobial susceptibility testing for bacterial diseases in fish.
Acinetobacter baumannii is an aerobic, gram-negative and glucose-non-fermenting bacterium, which has emerged as a serious opportunistic pathogen. Many clinical microbiology laboratories use the Vitek 2 system for the routine antimicrobial susceptibility testing process, including testing on A. baumannii isolates. However, in case of amikacin, it is now recommended to perform additional antimicrobial susceptibility testing for A. baumannii strains due to the relatively lower minimum inhibitory concentration (MIC) in the Vitek 2 system compared to conventional reference methods. In our study, we assessed MIC for amikacin susceptibility testing of A. baumannii isolates in the Vitek 2 system, the agar dilution, Etest, and disk diffusion method. We collected 40 gentamicin-resistant, A. baumannii strains (amikacin MIC by Vitek 2:${\leq}2{\mu}g/mL$, 2 isolates; $4{\mu}g/mL$, 34 isolates; $8{\mu}g/mL$, 4 isolates) from a University hospital and compared the Vitek 2 system to other reference methods for testing susceptibility to amikacin. The Vitek 2 system showed major errors in all of the 40 isolates, yielding a low MIC. The results of our study strongly suggested that the Vitek 2 system was not a reliable method to test the MICs of gentamicin; ranging from ${\geq}16{\mu}g/mL$ for amikacin susceptibility. Other tests, such as agar dilution, Etest, or disk diffusion methods, should be paralleled to determine the MIC of amikacin in A. baumannii.
Keun Ju Kim;Seung-Hwan Oh;Doosoo Jeon;Chulhun L. Chang
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제86권1호
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pp.47-56
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2023
Background: There is a global increase in isolation of nontuberculous mycobacteria (NTM). The aim of the study was to analyze longitudinal trends of NTM identification and pattern of antimicrobial susceptibility testing. Methods: NTM recovery rates, distribution of NTM species identification, and antimicrobial susceptibility pattern of NTM at Pusan National University Yangsan Hospital between January 2016 and December 2020 were retrospectively analyzed. Results: A total of 52,456 specimens from 21,264 patients were submitted for mycobacterial culture, of which 2,521 from 1,410 patients were NTM positive over five years (January 2016 to December 2020). NTM isolation showed an increasing trend from 2016 to 2020 (p<0.001, test for trend) mainly caused by Mycobacterium avium complex. The vast majority of M. avium complex were susceptible to key agents clarithromycin and amikacin. For Mycobacterium kansasii, resistance to rifampin and clarithromycin is rare. Amikacin was the most effective drug against Mycobacterium abscessus subspecies abscessus and Mycobacterium subspecies massiliense. Most of M. subspecies massiliense were susceptible to clarithromycin, while the majority of M. abscessus subspecies abscessus were resistant to clarithromycin (p<0.001). Conclusion: There was an increasing trend of NTM isolation in our hospital. Resistance to key drugs was uncommon for most NTM species except for M. abscessus subspecies abscessus against clarithromycin.
Due to the uncultivable nature of Mycobacterium leprae in vitro, the fast, easy, and accurate measurement of the antimicrobial drug susceptibility of this microbe has been difficult. Conventional methods for such testing are subjective, cumbersome, and expensive in some cases. Here, the utility of a reverse transcriptase-PCR (RT-PCR)-based assay for testing was examined and compared with a Buddmeyer-type radiorespirometric assay. The susceptibility of M. leprae to rifampin was determined by probing the presence of M.leprae-specific 18 kDa gene mRNA in M. leprae-infected IC-21 macrophage cells after drug treatment. The results showed that, as the refampin concentration was increased, the 360-bp cDNA products generated by the RT-PCR-based assay decreased in a dose-dependent manner as in the drug susceptibility observed in the Buddmeyer-type assay. The drug susceptibility testing of M. leprae by the RT-PCR based assay was found to be not only faster but also nearly $10^4$-fold more sensitive than the Buddmeyer-type assay. Moreover, it was also found that, unlike the RT-PCR based assay, the same testing by a DNA-PCR resulted in no differences in the 360-bp signal, regardless of the rifampin concentrations used. Accordingly, these results demonstrated that the drug susceptibility of M. leprae can be determined effectively by an RT-PCR-based assay, thereby providing a new, fast, and sensitive testing method.
We compared the antimicrobial resistance and clonal relationships among the community-acquired (CA) and hospital-acquired (HA) methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains that were isolated from blood cultures in a university hospital over a 4-year period. A total of 131 MRSA isolates, including 28 CA-MRSA and 103 HA-MRSA strains, were identified; antimicrobial susceptibility testing indicated that the CA-MRSA isolates were more susceptible to erythromycin (21 % vs 6% ; P=0.02), clindamycin (46% vs 12%; P<0.01), ciprofloxacin (43% vs 11%; P<0.01), and gentamicin (43% vs 6%; P<0.01) than were the HA-MRSA isolates. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) typing and antimicrobial resistance profiles separated the 20 CA-MRSA isolates into 14 and 10 different patterns, respectively, and the 53 HA-MRSA isolates were separated into 24 and 7 different patterns, respectively. Twenty-one (40%) of the 53 HA-MRSA isolates belonged to two predominant PFGE types, and most of them showed multi-drug resistant patterns. Four (20%) of the 20 CA-MRSA and 10 (19%) of the 53 HA-MRSA isolates fell into two common PFGE patterns, and each of them showed the same multi-drug resistant pattern. This study suggests that, although the CA-MRSA blood isolates showed diverse PFGE and antimicrobial resistance patterns, some of these isolates may have originated from the HA-MRSA strains.
Lack of hygiene and puerperal mastitis are common causes of bacterial diseases in nursing neonates. The aim of this study was to isolate microorganisms from milk samples of healthy female Jindo dogs with suckling puppies and to investigate antimicrobial susceptibility against the isolated bacteria. Milk samples were collected from 120 udders of 12 lactating Jindo dogs that were 2~4 years old without any clinical diseases including mastitis. Bacteria were isolated from 64 milk samples (53.3%), either singly (76.6%) or in combination (23.4%). Staphylococcus (S.) spp. was the most common microorganisms (74.7%) isolated from canine milk, followed by Haemophillus spp. (10.9%), Streptococcus spp. (9.6%), Gardnerella spp. (2.4%) and Moraxella spp. (2.4%). The most frequently isolated organism was S. warneri (31.3%). Antimicrobial susceptibility of these bacteria was tested with 17 antimicrobial agents by Kirbyand Bauer standardized disc diffusion method. Results indicated that bacteria isolated from healthy canine milk were mostly susceptible to amoxicillin-clavulanic acid, cephalothin and ceftiofur, but were resistant to erythromycin, neomycin and tetracycline.
The aim of this study was to investigate the antimicrobial resistance among Pseudomonas (P.) aeruginosa isolated from dogs and cats. A total of 45 (6.2%) P. aeruginosa was isolated from 710 dogs and 21 cats with clinical signs. Resistance to one or more of the antimicrobials tested was observed in 26 (57.8%) P. aeruginosa. Resistance to cefepime was the most frequent (44.4%), followed by ofloxacin (22.2%), levofloxacin (17.8%), norfloxacin (8.9%), ciprofloxacin (6.7%), ceftazidime, aztreonam, colistin, polymixin B and gentamicin (4.4%, respectively), while resistance to piperacillin/tazobactam, imipenem, tobramycin and amikacin was 2.2%, respectively. All isolates were susceptibility to doripenem and meropenem. Antimicrobial susceptibility testing should be a crucial step in selection of appropriate antimicrobial therapy in veterinary medicine. Also, the prudent use of antimicrobials and continuous monitoring for companion animals are required.
진단검사의학은 신속하고 정확한 체외검사 결과를 제공함으로써 임상의사가 환자를 진료하는 데 도움을 주는 전문 분야이다. 정확한 검사 결과를 제공하기 위해서는 검사에 관련된 모든 요소의 표준화가 필요하다. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)는 1968년에 표준화를 하는 데에 모두가 동의할 수 있는 공식적인 절차를 마련하기 위해 만들어졌고, 현재까지 임상검사실, 연구용 검사실을 포함한 많은 종류의 검사실 전 분야에 대해서 표준과 지침을 출판하여, 전 세계의 많은 검사실들이 표준화를 위해 이를 이용하고 있다. CLSI의 항생제 감수성 검사 소위원회(AST SC)는 6개의 상설 부서와 필요에 따라 만들어지는 많은 특설 부서로 구성되어 있다. AST SC의 구성원들은 소위원회에 제안된 내용을 검토하여 연 2차례 열리는 회의에서 제안 내용을 반영할지 여부를 결정함으로써 문서의 개정이 이루어진다. 이 회의는 등록한 사람은 누구나 참여할 수 있으므로, 우리 학회원들도 회의에 참여하여 표준 혹은 지침 문서의 생산에 능동적인 역할을 하기를 기대한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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