This experiment was to investigate the Leptospiral antibody in the pigs with the serological test by the microscopic-agglutination-test (MAT) from November 1991. to Januaury 1992. Antigen(living antigen) was used L. icterohemorrhagiae, L. pomona, L. canicola, L. hardjo, L. ballum, L. australis, L. autumnalis, L. grippotyphosa, L. tarassovi, L. pyrogenes, L. bataviae, L. hebdomadis for the serolgical test in the pigs. The result obtained are summarized as follows of the total 202 serum samples examined, 1. Among the serum samples of 202 heads, 19 heads of the pigs(9.4%) were positive. 2. Among the positive samples of 19 heads, The detected were L. icterohemorhagiae 10 heads(5.0%), L. pomona 3 heads(1.5%), L. canicola 6 heads(3.0%). 3. Antibody titers of positive sera were ranging from 1:100 to 1 : 400. Serotiters appeared to be very low, 4. The seroprevalence of Leptospira in Chechon was higher than that other districts (5. 4% -5.8%), but the lower than Chung-nam, Kyonggi(13.7-15.9%)
Total 51 calves born from both 28 seropositive and 23 seronegative dams were subjected to study both prenatal and postnatal infections of bovine leukemia virus (BLV), and the duration of passive colostral antibody by means of immunodiffusion (ID) test. All calves were tested for precolostral and postcolostral periods by 16 months of age. The results were as follows: 1. Of 28 precolostral sera of the calves born from infected dams, one appeared positive, indicating in utero BLV infection from the dam. 2. BLV-antibody test for the postcolostral sera of the calves born from seropositive or seronegative dams showed that the colostral antibody of the calves disappeared from 2 to 6 months of age, and the increase of the number of seropositive calves initiated from 3 to 4 months of age indicated postnatal infection.
These experiments were undertaken as a basic study to develop immunocontraceptive vaccine and to understand the role of zona pellucidae in early fertilization process by identifying the monoclonal and polyclonal antibody to porcine zona pellucidae and polyclonal antibody to mouse zona pellucidae by indirect ELISA and indirect immunofluorescence test. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. The titer of the antibodies to zona was determined by indirect ELISA using solubilized porcine zona coated plates. Both monoclonal and rabbit polyclonal antibodies showed very high titers ; O.D at 1 : 12,800 dilution of antibodies was still significantly higher than that of non-immunized control serum. Rabbit anti-mouse zona pellucidae sera also reacted with porcine zona pellucidae. 2. By indirect immunofluorescence test strong fluorescences were observed on the egg treated with homologous and heterologous rabbit polyclonal antibodies and FITC lablled 2nd antibodies and found to crossreact strongly with the eggs from the pig and mouse. While weaken fluorescences were observed on the eggs treated with monoclonal antibodies.
A serological survey for antibody to chicken anemia agent(CAA) was carried out by virus neutralization test. Antibody to CAA was detected in broilers and layers at different age groups. The results obtained were summarized as follows ; 1. Of a total of 1,035 chicken sera from 1.16 flocks 617 samples of sera were detected as positive(59.6%) and 95 flocks of a total flocks as positive(81.9%). 2. Proportion of positive sera by age were 92.3 %(88.9~100%) at 1 to 2 weeks of age, 56.4%(16.7~77.8%) at 3 to 9 weeks of age, 85.0%(50.0~100%) at 10 to 14 weeks of age and all tested sera were positive at over the 15 weeks age. 3. In each broiler and layer chicken 63.6% and 68.4% chicks possessed positive sera respectively. 4. Neutralizing antibody titer in age group was various from 1:10 to 1:6,400 and mean titer was 1:400 to 1:800.
Phage antibody 생산방법은 유전자 조작에 의하여 phage coat에 항체를 발현시키는 방법이며 그 library를 이용하여 일반 hybridoma 방법에 의해 항체를 생산하기 어려운 성분 (예: 독성물질, 면역화가 잘 안되는 물질 등) 에 대해 적용할 수 있는 장점을 제공한다. 본 연구진은 Griffin.1 antibody library의 positive control을 통해 phage 표면에 항체가 발현되는 지의 여부를 ELISA test를 통하여 확인하였다. 또한 human serum albumin을 모델분석물질로 사용하여 $1{\sim}4$차까지의 bio-panning 을 실시하였고 각 단계에서 증폭된 phage를 가지고 ELISA test를 한 결과 신호가 점진적으로 증가하는 data를 얻을 수 있었다. 이것을 통해 phage library로부터 특정 항원에 대한 monoclonal antibody를 생산할 수 있다는 사실을 검증하였다.
Newcastle disease (ND) is a highly contagious disease of poultry that can cause severe economic losses throughout the world. Vaccination has been used for a long time and proved as one of the most effective method to reduce the economic loss due to ND virus infection, The measurement of antibody titer such as hamagglutination-inhibition (Hl) test with sera has been used as a useful method to evaluate the immunity leve of host. However, Hl test is gradually being replaced by the enzyme linked-immunosorbent assay (ELISA), To evaluate the efficacy of ELISA in the chickens vaccinated with different procedure, present study has been performed. After SPF chicks and commercial broilers were vaccinated with different kinds of live vaccines such as V4, VG/GA and/or Bl at various time, the antibody level has been measured using both HI test and ELISA. Challenge test with velogenic viscerotropic NDV was also performed to measure the protective level of antibody. In the SPF chickens, the mean ELISA titer after vaccination and survival rate after challenge was increased and correlated with days post inoculation. More than 80% of chickens with higher than 1,000 ELISA titer after vaccination were survived after challenge with velogenic ND virus and had good correlation between survival rate and antibody titier. In commercial broiler chickens, most of them at market age had low level of ELISA titer regardless of the number of vaccination, and had a low correlation between survival rate and ELISA titer. However, the ELISA titer of remaining birds after challenge was increased. This result indicated that ELISA titer had good response against velogenic NOV infection compared to Hl titer.
Park, Rackhyun;Hwang, Ji Young;Lee, Kang Il;Namkoong, Sim;Choi, Seuk-Keun;Park, Songyong;Park, Hosun;Park, Junsoo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권2호
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pp.268-273
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2015
The fluorescent-antibody-to-membrane-antigen (FAMA) test is regarded as the "gold standard" to detect protective antibodies to varicella-zoster virus (VZV) because of its high sensitivity and specificity. Because the classic FAMA test uses an infectious virus for detection of antibodies to VZV, it is labor-intensive, and also requires special equipment for handling the virus. For this reason, we attempted to develop a simple and safe FAMA assay. Because VZV glycoprotein E (gE) is one of the major VZV glycoproteins, we used the gE protein for the FAMA test (gE FAMA). Here, we demonstrate that overexpression of gE in HEK293T cells can be used to measure antibodies in human serum, and that gE FAMA titers are closely correlated with gpEIA ELISA data. These results indicate that our gE FAMA test has the potential to measure antibodies to VZV.
Results obtained from six secological tests for diagnosing bovine brucellosis-standard plate agglutination test (SPT), standard tube agglutination test(STT), complement fixation test(CFT), Rivanol test (RT), agar gel precipitation test (AGP) and counterimmunoelectrophoresis(CIEP) were compared using 38 sera from brucella reactors and 222 sera from dairy and beef cattle in field. The SPT gave 1.6% apparent false negative reactions and 15.4% apparent false positive reactions when compared with STT which is an official test for bovine brucellosis in this country. The distribution of antibody titers determined by STT showed that 37.5% of 38 reactors had antibody titers ranging from 100 to 200, and the remaining 62.5% had antibody titers of 400 or higher. when 38 reactor judged by STT were tested by CFT and RT, 32 cattle(82.4%) were positive by CFT and 33 cattle (86.8%) were positive by RT, respectively. This results suggest that RT is comparable to CFT in the diagnosis of bovine brucellosis. The results also indicated that both AGP and CIEP were insensitive to detect brucella infection in cattle.
In order to establish and enzyme-linked immunosorbent assay to ILTV, field virus strain of ILTV was propagated in chorioallantoic membrane of the embryonated eggs. purified and used as antigen. The antisera selected from the field samples and immunized chickens based on serum neutralization test were used as the standard positive and negative sera in all tests. It was found that optimal antigen concentration was $2{\mu}g$ of protein per well and a 1 : 100 dilution of standard serum showed low background optical density with negative serum and high P/N values of positive sera. A 1 : 500 dilution of the rabbit anti-chicken IgG peroxidase conjugate produced a high P/N values and thirty minutes was chosen as suitable time to read the optical density of the enzyme substrate reaction and optical density was consistent during the 16 hours after stopper was treated. When coated antigen was kept on microplate for varying time up to 16 hours at $4^{\circ}C$ or $37^{\circ}C,$ no significant difference was observed between the treatment. The coated antigen could be kept without change of antigenicity for at least one month at $-70^{\circ}C,\; -20^{\circ}C,\; 4^{\circ}C$ and room temperature. When blocking buffer contanining bovine serum albumin was mixed directly with conjugate and serum at 10% level induced higher P/N values compared to blocking antigen coated microplate with the same blocking buffer. The coefficience of correlation between ELISA and SN test was 0.577. When antibody response of chickens, vaccinated with ILTV, was examined by ELISA and SN test, antibody rising and decay pattern between the two test was similar until 11 weeks of age. However 12 weeks onward antibody titer checked on by SN test was slightly lower than that tested by ELISA.
Purpose: Screening serologic tests are important tools for the diagnosis of celiac disease (CD). Immunoglobulin (Ig)G anti-deamidated gliadin peptide (anti-DGP) is a relatively new autoantibody thought to have good diagnostic accuracy, comparable to that of anti-tissue transglutaminase (anti-tTG) antibody. Methods: Pediatric patients (n=86) with a clinical suspicion of CD were included. Duodenal biopsy, anti-tTG, and IgG anti-DGP antibody tests were performed. The patients were divided into CD and control groups based on the pathological evaluation of duodenal biopsies. The diagnostic accuracy of serological tests was determined. Results: IgA anti-tTG and IgG anti-DGP antibodies were positive in 86.3% and 95.4% of patients, respectively. The sensitivity, specificity, and diagnostic accuracy of the IgA anti-tTG test were 86.3%, 50.0%, and 68.6%, respectively, and those of the IgG anti-DGP test were 95.4%, 85.7%, and 90.7%, respectively. The area under the receiver operating characteristic (ROC) curve was 0.84 (95% confidence interval [CI], 0.74-0.91) for IgA anti-tTG test and 0.93 (95% CI, 0.86-0.97) for IgG anti-DGP test. The comparison of IgA anti-tTG and IgG anti-DGP ROC curves showed a higher sensitivity and specificity of the IgG anti-DGP test. Conclusion: IgG anti-DGP is a reliable serological test for CD diagnosis in children. High tTG and DGP titers in the serum are suggestive of severe duodenal atrophy. The combined use of IgA anti-tTG and IgG anti-DGP tests for the initial screening of CD can improve diagnostic sensitivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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