The studies were performed for the PRRS antigen and antibody detection from breeding farms, artificial insemination(AI) center and growing farms in Jeonbuk province. 1. Specific PRRS primers were successfully amplified ORF6 617bp and ORF7 448 bp on agarose gel. 2. RT-PCR method has been establish by commercial kit and the thermal cycler program consisted of 30 cycles: $95^{\circ}C$ for 30 sec, $45^{\circ}C$ for 30 sec, and $72^{\circ}C$ for 45 sec. 3. The results of PRRS antibody test by ELISA method in AI centers were $6.6\%,\;53.3\%$ and breeding farms $65\%,\;65\%\;and\;38.7\%$, respectively. The serological positive of the antibody in gilt higher than sow. 4. The sero-positive of the PRRS antibody showed average $21\%$ in domestic farms, $56.2\%$ in breeding farms, and $29.9\%$ in AI center.
Emelianov, Vladimir U;Skvortsova, Tatiana;Mikhailova, Lilia V;Shamitova, Elena N
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.17
no.1
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pp.281-283
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2016
The Cholangiocarcinoma is a. The risk of development of cholangiocarcinoma, generally a rare type of a liver tumor, increases during infection of Opisthorchiasis. For this reason the timely detection of Opisthorchiasis is important for Cholangiocarcinoma prevention. There are many studies which concern the detection of pathogenesis of Opisthorchis viverrini infection but a little known about Opisthorchis felineus. In this study we investigate a correlation of the eggs which are found in a faeces and are comparable with a serum Ig G and Ig M antibody level that were detected with ELISA test in a large group of patients. The result is showing positive correlation between evidence of the Opisthorchis felineus eggs that were found in a faeces and antibody Ig G and Ig M level in a serum. Moreover the combination of two methods can improve the Opisthorchiasis diagnostic: the serum antibody and faeces investigation of eggs.
The genomic and subgenomic RNAs of fish nodavirus encode the four proteins, protein A, capsid protein, non-structural protein B1 and B2. In this study, we describe the immune response of olive flounder Paralichthys olivaceus immunized with live fish nodavirus or recombinant capsid protein, non-structural protein B1 and B2 expressed in E. coli. Nodavirus-infected flounder produced antibodies to capsid protein, B1 and B2 and nodavirus-neutralizing activities were detected in the serum of the nodavirus-infected flounder. The flounder were immunized against the three recombinant proteins of fish nodavirus and the sera from these immunized fishes were assayed for nodavirus-specific antibody by ELISA and a neutralization test. In the immunized flounder, all three recombinant proteins induced the production of similar levels of antibody, but only the antibody to capsid protein significantly neutralized nodavirus. These results indicate that all three nodaviral proteins are immunogenic in flounder, but only the capsid protein can induce neutralizing antibody against nodavirus.
We examined the immunological properties of the recombinant hepatitis B surface antigen (r-HBsAg) which was expressed in mammalian cell (C127). The cross-immunity of r-HBsAg and plasma-derived hepatitis B surface antigen (p-HBsAg) were tested using Western blotting and ELISA with guinea pig polyclonal antibody and naturally infected human-derived antibody and the both antigens show the same results in their response pattern and intensity, which indicate they have a good cross-immunity. from the measurement of $ED_{50}$ after formalin- or heat-inactivation, both r-HBsAg and p-HBsAg and p-HBsAg showed $ED_{50}$ of 0.2-0.3 in formalin-inactivaton, while r-HBsAg was 0.05-0.09 and p-HBsAg was 0.03-0.07 in heat-inactivation, which means heat-inactivation method is 3-4 times superior in immunogenicity. In the immunopersistency test performed in guinea pig for the period of 3 months with two different adjuvants, antibody titer was 34.2 with muramyl dipeptide adjuvant, which was 1.8 times greater than the antibody titer of 18.9 with $AIPO_{4}$ adjuvant. the mutagenicity of r-HBsAg has the same cross-immunity with p-HBsAg, and heat-inactivation method and muramyl dipeptide adjuvant allow development of r-HBsAg vaccine with excellent immunogenicity.
This study was performed to investigate the activity of antibodies in the tissues of Paragonimus westermani at the different developmental stages. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Immunelectron microscopy (IEM) were applied, using the dog sera infected with metacercariae isolated from Cambaroides similis. These dog sera were obtained from 3rd to 96th week after infection by bleeding. The supernatants of homogenated worms for worm antigen were used. The worm tissues were embedded in Lowicryl HM 20 medium, treated with infected serum and protein A gold complex (particle size; 12 nm) and observed by electron microscope. In the pattern of antibody levels by ELISA test in all developemental worm antigens, the activity of antibody was very weak in the 3rd week, but strong in the worm antibody from 4th to 20th week after infection. Its activity was maintained even till 96th week. The antibody level of the L2th week worm antigen was higher than those of the 20th and 48th week worm antigens. Generally, many gold particles were observed on the secretory granules and the epithelial lamellae. Thus, it was concluded that the antigenic materials in the developmental worm tissues were especially concentrated on the secretory granules in the parenchymal tissues and the epithelial lamellae in the lumen of the caecum.
Chung Ok Choi;Chung Gil Lee;Sung Man Cho;Soo Hwan An;Joon Hun Kwon
Korean Journal of Poultry Science
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v.15
no.3
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pp.199-206
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1988
A total of 3 hybridoma clones producing monoclonal antibody (MCA) against infectious laryngotracheitis virus (ILTV) was established by somatic cell hybridization between mouse myeloma cells and spleen, cells from mice immunized with ILTV. The MCAs were screened by the indirect flourescent antibody (IFA) staining and the specific hybridomas were cloned by limiting dilution method. The MCAs produced by the 3 hybriomas were all classified as immunogloblin G and found to be reacting against common antigen(s) of high and low pathogenic ILTV examined. The titer of these antibodies in mouse ascitic fluid was from $10^5$ to $10^6$. Indirect fluorescent antibody test using these antibodies was found to be quite effective for the detection of ILTV from infected chickens being the most sensitive among the test methods adopted.
The objective of this experiment was to investigate the effect of Newcastle disease virus (NDV) and infectious bursal disease virus (IBDV) vaccination on performance of broiler chicks for five weeks. Two types of poultry houses and three patterns of vaccination ($NDV^-/IBDV^-$, $NDV^+/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^+$) were factorially assigned to six treatments. NDV, B1 strain and IBDV, Bursin-2 vaccine were orally administered at 5, 14 and 7, 18 days, respectively. Forty eight hundred chicks were grouped into four replications with two hundnyd hybro $\times$ hybro chicks per each treatment. Weight gain, feed conversion ratio (FCR), mortality and product index were surveyed at the end of experiment. Bursa index and IBDV antibody titer of chicks were weekly measured. Weight gain of chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ was significantly increased compared to that of other treatments at both window and windowless poultry houses (p<0.05). Chicks vaccinated with $NDV^+/IBDV^+$ also showed significantly improving the FCR and mortality compared to those of other treatments at both poultry houses (p<0.05). The bursa indecies of both poultry houses were high from one-day- to three-weeks-old, but were low for the rest of two weeks. IBDV antibody of all chicks was detected 100% by agar gel precipitation (AGP) test at one day old, but was not detected in $NDV^-/IBDV^-$ and $NDV^+/IBDV^-$ treatments at four weeks old. However, it showed 100% in $NDV^+/IBDV^+$ treatment. Antibody titer using ELISA showed similar trend to that of AGP test. The results of this experiment confirmed that IBDV and NDV combined vaccine significantly improved the performance of broiler chicks.
An indirect immunofluorescent antibody test was applied to survey the antibody prevalence on five canine viruses including canine distempervirus(CDV), canine parvovirus(CPV), canine coronavirus(CCV), canine adenovirus type-2(CAV-2), canine parainfluenzavirus(CPIV) in dogs. The period studied was from October 1992 to June 1993. A total of 80 dog sera was collected from veterinary clinics in Kwangju and Seoul, and examined for the presence of virus antibodies. Immunofluorescent antibodies(IFA) to all viruses were present in a high percentage of 80 sera tested. Seventyfive(93.8%) showed detectable IFA against CPV, 67(83.8%) against CDV, 51(63.8%) against CCV, 42(52.5%) against CPIV and 34(42.5%) against CAV-2. These suggested that all viruses were endemic in the communities. IFA levels against each virus were also distributed fairly irregularly. IFAs for CDV and CPV were detected more frequently with a relatively high incidence in vaccinated group less than 1 years of age. IFAs for CAV-2 were detected more frequently with growing age. In the correlation of clinical signs and antibody prevalence, dogs that showed hematochezia and vomiting had high titers in the positive sera is noteworthy, particularly for CDV and CPV. The significance between dogs those who had diarrhea, dyspnea and salivation and those viruses were obscure.
Background: Fluorescent antibody virus neutralization (FAVN) test is a standard assay for quantifying rabies virus-neutralizing antibody (VNA) in serum. However, a safer rabies virus (RABV) should be used in the FAVN assay. There is a need for a new method that is economical and time-saving by eliminating the immunostaining step. Objectives: We aimed to improve the traditional FAVN method by rescuing and characterizing a new recombinant RABV expressing green fluorescent protein (GFP). Methods: A new recombinant RABV expressing GFP designated as ERAGS-GFP was rescued using a reverse genetic system. Immuno-fluorescence assay, peroxidase-linked assay, electron microscopy and reverse transcription polymerase chain reaction were performed to confirm the recombinant ERAGS-GFP virus as a RABV expressing the GFP gene. The safety of ERAGS-GFP was evaluated in 4-week-old mice. The rabies VNA titers were measured and compared with conventional FAVN and FAVN-GFP tests using VERO cells. Results: The virus propagated in VERO cells was confirmed as RABV expressing GFP. The ERAGS-GFP showed the highest titer (108.0 TCID50/mL) in VERO cells at 5 days post-inoculation, and GFP expression persisted until passage 30. The body weight of 4-week-old mice inoculated intracranially with ERAGS-GFP continued to increase and the survival rate was 100%. In 62 dog sera, the FAVN-GFP result was significantly correlated with that of conventional FAVN (r = 0.95). Conclusions: We constructed ERAGS-GFP, which could replace the challenge virus standard-11 strain used in FAVN test.
Kim, Hyoung Jun;Kim, Ki Hong;Park, Jeong Su;Lee, Haeng Lim;Kwon, Hyuk Chu;Kwon, Se Ryun
Journal of fish pathology
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v.28
no.2
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pp.93-98
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2015
Full-length recombinant VP2 and VP3 proteins of aquabirnavirus isolated from olive flounder were expressed successfully in E. coli expression system. After rats were immunized with these proteins, antisera were used for in vitro and in vivo neutralization test. In in vitro test, VP2 antibody titers were higher than that of VP3. In in vivo assays, fish challenged with aquabirnavirus neutralized with VP2 antibody survived longer than other fish.
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