치아우식은 Streptococcus mutans와 S. sobrinus가 주요 원인균이며, 이를 예방하기 위해서 구강 청결제를 사용한다. 그러나 구강청결제의 부작용 및 해로움으로 인하여 소아에게 권장하기에 주위를 요한다. 전기 분해수는 물을 전극을 통해서 전류를 흘려주어 생성되는 용액으로 항균력을 갖는다. 본 연구에서는 전기 분해수를 구강 청결제 대용으로 사용하기 위해서 치아 우식원성 세균 및 바이오 필름에 대한 항균력을 조사하였다. 염화나트륨이 포함된 증류수를 백금전극을 이용하여 전기 분해수를 생성하였다. 전기분해 수소수의 물리화학적 성분을 분석하고 S. mutans 및 S. sobrinus 배양액을 원심분리하여 세균을 얻고 전기 분해수, 알코올 및 불소가 포함된 구강 청결제를 처리하고 살아있는 세균 수를 배양을 통해서 조사하였다. 또한 치아우식균의 바이오 필름을 형성시킨 후, 전기 분해수 및 구강 청결제를 처리하여 바이오 필름 제거능을 크리스탈 바이올렛 염색을 이용하여 분석하고, 바이오 필름 내 살아있는 세균수의 양은 배양을 통하여 분석하였다. 전기분해수는 높은 농도의 자유염소 (free chlorine)을 포함하고 중성 페하를 보였다. 전기 분해수는 유의하게 S. mutans 및 S. sobrinus에 대해서 항균력을 보였으며, 이 세균들의 바이오 필름 제거능 및 바이오 필름 내 세균에 대해서도 항균력을 보였다. 전기 분해수는 부유세균에 대해서 알코올이 포함된 구강청결제보다 약한 항균력을 보였지만, 바이오 필름 세균에 대해서는 더 강한 항균력을 나타냈다. 이러한 결과를 바탕으로 중성 전기 분해수는 치아우식 예방을 위한 기존 구강 청결제의 대체 용액으로 사용이 가능할 것으로 사료된다.
Mohamed H. El-Sayed;Fahdah A. Alshammari;Mohammed H. Sharaf
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권1호
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pp.61-74
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2023
The global increase in multidrug-resistant (MDR) bacteria has inspired researchers to develop new strategies to overcome this problem. In this study, 23 morphologically different, soil-isolated actinomycete cultures were screened for their antibacterial ability against MDR isolates of ESKAPE pathogens. Among them, isolate BOGE18 exhibited a broad antibacterial spectrum, so it was selected and identified based on cultural, morphological, physiological, and biochemical characteristics. Chemotaxonomic analysis was also performed together with nucleotide sequencing of the 16S rRNA gene, which showed this strain to have identity with Streptomyces lienomycini. The ethyl acetate extract of the cell-free filtrate (CFF) of strain BOGE18 was evaluated for its antibacterial spectrum, and the minimum inhibitory concentration (MIC) ranged from 62.5 to 250 ㎍/ml. The recorded results from the in vitro anti-biofilm microtiter assay and confocal laser scanning microscopy (CLSM) of sub-MIC concentrations revealed a significant reduction in biofilm formation in a concentration-dependent manner. The extract also displayed significant scavenging activity, reaching 91.61 ± 4.1% and 85.06 ± 3.14% of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), respectively. A promising cytotoxic ability against breast (MCF-7) and hepatocellular (HePG2) cancer cell lines was obtained from the extract with IC50 values of 47.15 ± 13.10 and 122.69 ± 9.12 ㎍/ml, respectively. Moreover, based on gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis, nine known compounds were detected in the BOGE18 extract, suggesting their contribution to the multitude of biological activities recorded in this study. Overall, Streptomyces lienomycini BOGE18-derived extract is a good candidate for use in a natural combating strategy to prevent bacterial infection, especially by MDR pathogens.
본 연구에서는 오레가노를 초임계유체추출법과 열수추출법으로 추출하여 항균, 항산화 in vitro 실험을 수행하였다. 항균실험인 Disc diffusion method 결과, 초임계추출물에 대해서만 clear zone이 나타났다. S. aureus에 대한MIC는 초임계추출물에서만 관찰되었으며, 1000 ㎍/mL로 확인되었다. 열수추출물은 C. acnes에 대한 MIC가 125 ㎍/mL로 여드름균에 대한 항균력이 뛰어났다. 나아가 우리는 Biofilm inhibition assay를 통해 오레가노 초임계추출물이 125 ㎍/mL의 저농도에서도 S. aureus의 바이오필름을 70%이상 억제한다는 것을 발견하였다. DPPH radical 소거능, ABTS+ radical 소거능, SOD 유사활성능과 총 폴리페놀 함량 측정에서 열수추출물의 항산화력이 초임계추출물보다 우수하게 측정되었다. 나아가, 앞서 확인된 오레가노 초임계추출물의 S. aureus 바이오필름 억제능을 활용하여 아토피 피부에 적합한 소재를 개발하고자 하였다. 오레가노 초임계추출물의 낮은 용해도를 극복하고 안정성을 증가시키기 위하여 리포좀을 이용하였다.
Victoria Kichler ;Lucas Soares Teixeira ;Maick Meneguzzo Prado ;Guilherme Colla ;Daniela Peressoni Vieira Schuldt ;Beatriz Serrato Coelho ;Luismar Marques Porto ;Josiane de Almeida
Restorative Dentistry and Endodontics
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제46권2호
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pp.20.1-20.11
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2021
Objectives: The aim of this study was to evaluate bacterial nanocellulose (BNC) membranes incorporated with antimicrobial agents regarding cytotoxicity in fibroblasts of the periodontal ligament (PDLF), antimicrobial activity, and inhibition of multispecies biofilm formation. Materials and Methods: The tested BNC membranes were BNC + 1% clindamycin (BNC/CLI); BNC + 0.12% chlorhexidine (BNC/CHX); BNC + nitric oxide (BNC/NO); and conventional BNC (BNC; control). After PDLF culture, the BNC membranes were positioned in the wells and maintained for 24 hours. Cell viability was then evaluated using the MTS calorimetric test. Antimicrobial activity against Enterococcus faecalis, Actinomyces naeslundii, and Streptococcus sanguinis (S. sanguinis) was evaluated using the agar diffusion test. To assess the antibiofilm activity, BNC membranes were exposed for 24 hours to the mixed culture. After sonicating the BNC membranes to remove the remaining biofilm and plating the suspension on agar, the number of colony-forming units (CFU)/mL was determined. Data were analyzed by 1-way analysis of variance and the Tukey, Kruskal-Wallis, and Dunn tests (α = 5%). Results: PDLF metabolic activity after contact with BNC/CHX, BNC/CLI, and BNC/NO was 35%, 61% and 97%, respectively, compared to BNC. BNC/NO showed biocompatibility similar to that of BNC (p = 0.78). BNC/CLI showed the largest inhibition halos, and was superior to the other BNC membranes against S. sanguinis (p < 0.05). The experimental BNC membranes inhibited biofilm formation, with about a 3-fold log CFU reduction compared to BNC (p < 0.05). Conclusions: BNC/NO showed excellent biocompatibility and inhibited multispecies biofilm formation, similarly to BNC/CLI and BNC/CHX.
Rajasekharan, Satish Kumar;Ramesh, Samiraj;Satish, Ann Susan;Lee, Jintae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권3호
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pp.542-551
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2017
Small phytochemicals have been successfully adopted as antibacterial chemotherapies and are being increasingly viewed as potential antibiofilm agents. Some of these molecules are known to repress biofilm and toxin production by certain bacterial and yeast pathogens, but information is lacking with regard to the genes allied with biofilm formation. The present study was performed to investigate the inhibitory effect of burdock root extract (BRE) and of chlorogenic acid (CGA; a component of BRE) on clinical isolates of Klebsiella pneumoniae. BRE and CGA exhibited significant antibiofilm activity against K. pneumoniae without inflicting any harm to its planktonic counterparts. In vitro assays supported the ${\beta}$-lactamase inhibitory effect of CGA and BRE while in silico docking showed that CGA bound strongly with the active sites of sulfhydryl-variable-1 ${\beta}$-lactamase. Furthermore, the mRNA transcript levels of two biofilm-associated genes (type 3 fimbriae mrkD and trehalose-6-phosphate hydrolase treC) were significantly downregulated in CGA- and BRE-treated samples. In addition, CGA inhibited biofilm formation by Escherichia coli and Candida albicans without affecting their planktonic cell growth. These findings show that BRE and its component CGA have potential use in antibiofilm strategies against persistent K. pneumoniae infections.
Mycobacterium tuberculosis, a causative pathogen of tuberculosis (TB), still threatens human health worldwide. To find a novel drug to eradicate this pathogen, we tested taurine-5-bromosalicylaldehyde Schiff base (TBSSB) as an innovative anti-mycobacterial drug using Mycobacterium smegmatis as a surrogate model for M. tuberculosis. We investigated the antimicrobial activity of TBSSB against M. smegmatis by plotting growth curves, examined the effect of TBSSB on biofilm formation, observed morphological changes by scanning electron microscopy and transmission electron microscopy, and detected differentially expressed proteins using two-dimensional gel electrophoresis coupled with mass spectrometry. TBSSB inhibited mycobacterial growth and biofilm formation, altered cell ultrastructure and intracellular content, and inhibited cell division. Furthermore, M. smegmatis adapted itself to TBSSB inhibition by regulating the metabolic pathways and enzymatic activities of the identified proteins. NDMA-dependent methanol dehydrogenase, NAD(P)H nitroreductase, and amidohydrolase AmiB1 appear to be pivotal factors to regulate the M. smegmatis survival under TBSSB. Our dataset reinforced the idea that Schiff base-taurine compounds have the potential to be developed as novel anti-mycobacterial drugs.
P. gingivalis를 단독면역하거나 또는 Fusobacterium nucleatum 선면역 후 P. gingivalis 항혈청을 각각 얻어냈다. 두 종류의 항혈청이 P. gingivalis biofilm을 침투해 들어가는 능력을 confocal laser scanning microscope를 이용하여 비교 감증하였다. 항혈청의 P. gingivalis에 대한 avidity index도 측정하였다. 결과적으로 F. nucleatum의 선면역은 P. gingivalis 특이 항혈청에 대해 세균성 biofilm의 침투능력을 저하시키고, 동일한 세균에 대한 avidity도 감소시켰다.
Pseudomonas aeruginosa is one of the most common pathogenic species associated with canine otitis externa (OE). Their resilience is achieved by forming a biofilm, which allows these bacteria to evade even the harshest of treatments. This study evaluated the in vitro synergistic efficacy of N-acetylcysteine (NAC) with different antimicrobial agents against P. aeruginosa isolated from dogs with OE to develop an effective treatment against P. aeruginosa. The antimicrobial activity was evaluated by the minimum inhibitory concentration test using the microdilution method. The efficacy of antibiofilm formation was evaluated using a crystal violet stain method. The treatment solutions included NAC alone, and in synergy with enrofloxacin, polymyxin B, and gentamicin. NAC alone exhibited antimicrobial and antibiofilm abilities. On the other hand, the combination of NAC and the antibiotics did not show any significant synergistic effects against P. aeruginosa.
Velmurugan Palanivel;Sung-Chul Hong;Veera Ravi Arumugam;Sivakumar Subpiramaniyam;Pyong-In Yi;Seong-Ho Jang;Jeong-Min Suh;Eun-Sang Jung;Je-Sung Park
Advances in nano research
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제14권4호
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pp.391-397
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2023
This manuscript describes the one-step eco-friendly green fabrication of silver nanoparticles (AgNPs) through the in-situ bio-reduction of an aqueous solution of silver nitrate using Syzygium aromaticum leaf extract. UV-vis spectroscopy shows a characteristic SPR peak around 442 nm. FTIR spectroscopy showed that the AgNPs were capped with bioactive phyto-molecules. TEM images revealed oval and spherical particles with a mean diameter of ~12.6 nm. XRD analysis revealed crystalline and face-cantered cubic AgNPs. The phytosynthesized AgNPs showed broad-spectrum anti-microbial activity against two foodborne pathogenic bacteria, Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus. The AgNPs showed a prominent ability to inhibit biofilms formed by L. monocytogenes and S. aureus in laboratory conditions through a crystal violet assay. The results suggest that the AgNPs could be a novel nanotool to develop effective antimicrobial and anti-biofilm agents in food preservation.
This research was conducted to investigate the antibacterial and anti-inflammatory effects of MeOH Ex. of Salvia miltiorrhiza (MESM) against oral pathogenic bacteria. Minimum inhibitory concentration (MIC), removal effect of biofilm produced by Streptococcus mutans, effect of gene expression of proinflammatory cytokines and effect of production of proinflammatory cytokine of MESM were tested. MESM showed moderated antibacterial activity against oral pathogenic bacteria. About 89±8% of biofilms produced by S. mutans were removed by MESM at a concentration of 1 mg/mL. Gene expression of IL-1β and TNF-α induced by Porphyromonas gingivalis were 8~9 folds reduced by MESM. Gene expression of IL-8 induced by Fusobacterium nucelatum were 12 folds reduced by MESM. Production of IL-1β, TNF-α and IL-8 were significantly suppressed by MESM. Conclusively, MESM showed potent antibacterial and anti-inflammatory effect against oral pathogenic bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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