Fisetin is a bioactive flavonol molecule and has been shown to have antioxidant potential, but its efficacy has not been fully validated. The aim of the present study was to investigate the protective efficacy of fisetin on C2C12 murine myoblastjdusts under hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative damage. The results revealed that fisetin significantly weakened H2O2-induced cell viability inhibition and DNA damage while blocking reactive oxygen species (ROS) generation. Fisetin also significantly alleviated cell cycle arrest by H2O2 treatment through by reversing the upregulation of p21WAF1/CIP1 expression and the downregulation of cyclin A and B levels. In addition, fisetin significantly blocked apoptosis induced by H2O2 through increasing the Bcl-2/Bax ratio and attenuating mitochondrial damage, which was accompanied by inactivation of caspase-3 and suppression of poly(ADP-ribose) polymerase cleavage. Furthermore, fisetin-induced nuclear translocation and phosphorylation of Nrf2 were related to the increased expression and activation of heme oxygenase-1 (HO-1) in H2O2-stimulated C2C12 myoblasts. However, the protective efficacy of fisetin on H2O2-mediated cytotoxicity, including cell cycle arrest, apoptosis and mitochondrial dysfunction, were greatly offset when HO-1 activity was artificially inhibited. Therefore, our results indicate that fisetin as an Nrf2 activator effectively abrogated oxidative stress-mediated damage in C2C12 myoblasts.
Inhibitory effects of 200 medicinal plants on elastase activity were screened. Among the 200 plants, six plant extracts exhibited more than 65% of inhibition on elastase activity by their total methanol extracts at 1, 000$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ as a final concentration. For six active plants including Areca catechu, Cinnamonum cassia, Myristica frograns, Curcumma longa, Alponia katsumadai, and Dryopteris crassirrhizoma, the inhibitory effects of their comsituents were examined on the activity of human leukocyte elastase, hyaluronidase and lipid peroxidation. In lipid peroxidation assay using TBA method, three of the 6 plants including Curcumma longa, Areca Catechu and Alponia katsumadai exhibited more than 70% of inhibition at the concentration of 1, 000$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, but only one plant, Areca Ctechu showed high inhibitory effect on hyaluronidase activity. The results suggest that medicinal plants showing several biological activities may be potent inhibitors of anti-aging process on skin and that might be useful for application in cosmetics.
항산화 및 미백효과가 있는 생약재을 탐색하기 위해 생약재 70% 에탄을 추출물의 전자공여효과, 지질 과산화 억제효과 및 tyrosinase 억제효과를 검색하였다. 70% 에탄을 추출물의 전자공여 효과는 10$\mu\textrm{g}$/m1의 농도에서는 연교>홍화씨 >오미자>운지, 감초 순으로 나타났고 100$\mu\textrm{g}$/m1의 농도에서는 연교>운지 >감초>오미자>상지 >홍화씨 순으로서 연교의 전자공여효과가 가장크게 나타났다. 또한 l$\mu\textrm{g}$/ml에서 연교는 37%, 홍화씨는 31% 정도로서 매우 낮은 농도에서도 상당한 전자공여효과를 나타냈다. 지질과산화 억제효과는 쑥>감초>생지황>상지 순으로서 쑥이 가장 높은 항산화 효과를 나타내었고 tyrosinase 활성의 저해효과는 상지> 쑥> 느타리버섯 순으로서 상지가 가장 좋은 효과가 있음을 악 수 있었다. 위의 결과는 연교, 쑥 그리고 상지 등이 피부노화 억제 기능성 화장품의 소재로 이용될 수 있음을 시사한다.
Objectives : This study was conducted to reveal the scientific mechanism of the anti-skin aging activity of Kyung-Ok-Ko(KOK), which is highly useful as a Korean traditional medicine and functional food. Methods : The skin wrinkle and aging inhibitory activity of KOK was confirmed through in vitro experiments of human dermal fibroblast neonatal cell(HDFn) and in vivo of C. elegans, and hairless mouse(SKH-1). Results : The amount of the C-terminus of the collagen precursor in the HDFn cell culture medium treated with KOK using an enzymes-linked immunoassay kit. The group treated with KOK 200㎍/㎖ was a 28.3% increase of collagen precursor compared to the control group. KOK showed inhibitory activity of MMP-1 compared to the control group at a concentration of 200㎍/㎖. In addition, KOK 200㎍/㎖ showed significant inhibitory activity of thermal stress and an oxidative stress compared to the control group in C. elegans. Furthermore, KOK showed a concentration-dependent(100mg/kg and 500mg/kg) anti-wrinkle formation effect in UV-irradiated hairless mouse(SKH-1). Additionally, when KOK was administered to UV-irradiated hairless mice, an increase in procollagen -1 and -3 genes expression was observed, and mmp-1 and mmp-9 genes, which increase collagen decomposition, decreased with the administration of KOK. Conclusions : The skin aging inhibition mechanism of Kyung-Ok-Ko(KOK) is presumed to be achieved through suppressing thermal stress and oxidative stress, suppressing mmp-1 and mmp-9 genes, and increasing procollagen-1 and procollagen-3.
본 연구는 자색당근(black carrot, BC) 소재로 초임계추출물에 대해 DPPH radical 소거능, ABTS radical 소거능, 총 폴리페놀 함량 측정을 통해 항산화 활성, 인간의 정상 섬유아세포에서 콜라겐 생성과 MMP-1 발현을 조사하여 항주름 효능을 평가하고자 하였다. 그 결과 자색당근 초임계추출물 내 총 폴리페놀 함량 (9.037±1.123 mg GAE/g), DPPH, ABTS 분석 결과로 높은 항산화 효과를 확인하였다. NHDF 세포에서 초임계추출물 농도에 의한 세포독성은 거의 없었으며, 이때 추출물은 농도 의존적으로 MMP-1 단백질 및 MMP-1 mRNA 발현을 억제하고, 콜라겐 type I 유전자 mRNA 수준 증가에 의한 type I procollagen의 합성을 촉진하였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, 자색당근 초임계추출물은 우수한 항산화 효능과 친환경(solvent free)물질, 항노화 원료로서 화장품, 식품, 미용식품 등 다양한 산업분야에 있어 활용 가능성이 매우 높을 것으로 판단된다.
5-ALA-p는 천연 아미노산인 5-ALA를 암모니아수로 용출하고 인산과 아세톤을 첨가하여 광역학 요법에 적합한 특성을 갖도록 개발된 물질이다. 그러나 항산화 및 항염증에 대한 잠재적인 기전을 포함한 약리학적 효능은 아직 명확하지 않다. 본 연구에서는 LPS로 자극된 RAW 264.7 세포에서 산화적 및 염증성 반응에 대한 5-ALA-p의 효과를 평가하였다. 본 연구의 결과에 의하면, 5-ALA-p는 LPS에 의한 RAW 264.7 세포의 과도한 식균 활성을 유의하게 억제하였고 산화적 스트레스를 약화시켰다. 5-ALA-p는 또한 LPS에 의해 감소된 미토콘드리아 생물 발생을 개선하였으며, 이는 5-ALA-p가 LPS로 인한 미토콘드리아 손상을 복원시켰음을 시사한다. 아울러 5-ALA-p는 NO와 TNF-α, IL-1β 및 IL-6과 같은 염증성 사이토카인의 생성을 현저히 억제하였으며, 이는 iNOS 및 각 사이토카인의 발현 감소와 연관성이 있었다. 나아가 5-ALA-p는 NF-κB의 핵 전이를 감소시키고 MAPKs의 인산화를 억제하여 5-ALA-p의 항염증 효과가 이들 신호전달 경로의 활성 억제와 매개되었음을 보여주었다. 이러한 결과들은 5-ALA-p가 산화적 및 염증성 스트레스를 줄이는 잠재적인 후보 약물로 적용될 수 있음을 의미한다.
Objective : This study was designed to investigate effect of immature fruits from Citrus unshiu Markovich to mature them on antioxidative and antiaging-related enzyme activities in vitro. Methods : Fruits from Open field-cultivated C. unshiu Markovich (ripe and unripe fruits of Citri) made a purchase in Jeju island. We measured total polyphenol and flavonoid contents in mature C. unshiu Markovich (MC) and immature C. unshiu Markovich (IMC) 70% ethanol extract. DPPH free radical, ABTS radical, and hydroxyl radical scavenging activities in both extracts were determined. Also, reducing power, SOD-like activities, elastase inhibition, and collagenase inhibition activities of these extract were assayed at 5, 1, 0.5, and 0.1 mg/㎖. Results : The total polyphenol contents in the ethanol extract of IMC were higher than those of MC (26.99 ± 0.89 mg/TAEg). And total flavonoid contents in them were very similar to both extract (MC; 7.25 ± 0.4 mg/RUEg and IMC; 7.44 ± 0.18 mg/RUEg). DPPH free radical scavenging activities, ABTS radical scavenging capacity, reducing power, and SOD-like activities of IMC-treated group showed significant increase compared to those of MC group in all treated concentrations. Particularly, DPPH free radical scavenging and elastase inhibition activities in IMC-treated group at 5 mg/㎖ showed similar with positive control group. Besides, IMC extract at 5 mg/㎖ concentration surpassed positive control (BHA or Vit. C) in SOD-like activities and ABTS radical scavenging capacity. Conclusion : These results suggest that IMC ethanol extract may be used as a natural antioxidant and a antiaging material for development of functional foods and cosmeceuticals.
3,9-Dihydro-6-oxopterocarpen과 ferulic acid의 에스테르 반응을 통해 페룰산 유도체인 3,9-diferuloyl-6-oxopterocarpen (Tensolin-$F_{(R)}$ )를 합성하여 이를 함유한 주름개선 화장품을 개발하였다. Tensolin-$F_{(R)}$ 는 농도 의존적으로 DPPH와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타냈으며, 각각 0.8 mM에서 78%, 0.053 mM에서 92.9%로 DPPH와 superoxide radical을 소거하여 우수한 항산화 효과를 나타내었다. MMP-1 효소 활성 저해 효과도 0.16 mM에서 74%를 저해하였다. HDF에서 UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1의 발현 저해 효과는 Tensolin-$F_{(R)}$ 0.8 uM에서 85.5%로 단백질 수준에서 모두 농도 의존적으로 발현 저해효과가 나타났다. Tensolin-$F_{(R)}$ 를 함유한 제품의 피부 주름개선 효과 평가 결과, Tensolin-$F_{(R)}$ 를 함유한 화장품을 약 8주 간 도포한 경우 유의한 주름개선 효과가 있음을 확인 할 수 있었다. 본 연구를 통하여 Tensolin-$F_{(R)}$ 는 항산화 효과와 MMP-1활성 저해 효과 및 UVA에 의한 MMP-1의 발현을 저해하는 효과가 나타났으며 새로운 주름개선 기능성 화장품으로 이용될 수 있을 것이다.
Resveratrol (trans-3,4'-trihydroxystillbene), a naturally occurring polyphenolic antioxidant found in grapes and red wine, elicits diverse biochemical responses and demonstrates anti-aging, anti-inflammatory, and anti-proliferative effects in several cell types. Previously, resveratrol was shown to regulate differentiation and inflammation in rabbit articular chondrocytes, while the direct production of nitric oxide (NO) in these cells by treatment with the NO donor sodium nitroprusside (SNP) led to apoptosis. In this study, the effect of resveratrol on NO-induced apoptosis in rabbit articular chondrocytes was investigated. Resveratrol dramatically reduced NO-induced apoptosis in chondrocytes, as determined by phase-contrast microscopy, the MTT assay, FACS analysis, and DAPI staining. Treatment with resveratrol inhibited the SNP-induced expression of p53 and p21 and reduced the expression of procaspase-3 in chondrocytes, as detected by western blot analysis. SNP-induced degradation of I-kappa B alpha ($I{\kappa}B-{\alpha}$) was rescued by resveratrol treatment, and the SN50 peptide-mediated inhibition of NF-kappa B (NF-${\kappa}B$) activity potently blocked SNP-induced caspase-3 activation and apoptosis. Our results suggest that resveratrol inhibits NO-induced apoptosis through the NF-${\kappa}B$ pathway in articular chondrocytes.
홍화는 예로부터 '사람의 건강에 도움이 된다'고 해서 '잇꽃'으로 불려져 왔으며 동의보감에서는 꽃잎이 홍색을 나타내기 때문에 홍화(紅花)로 소개되어 있다. 예로부터 홍화는 꽃잎을 압착후 정제된 색소를 이용하여 옷감에 천연색소를 입히는 염료와 연지의 재료로 사용되기도 하였다. 현대에 와서는 홍화의 주성분인 폴리페놀 화합물(Polyphenol cocktail) 성분이 건강식품업계에서 항노화 및 항산화물질로 알려지면서 관심의 대상이 되고 있다. 금번연구에서는 홍화의 주성분인 폴리페놀 화합물이 청소년기 혹은 장년기에서도 고민거리가 되고 있는 여드름균의 생성을 억제시킬 수 있는 항균, 항염효능이 있음을 DDT(Disk Diffusion Test) assay, MTT assay, NF-${\kappa}$B Luciferase activity inhibition assay의 in vitro법으로 확인하고 더불어 인체안면에 대한 임상시험에 사용할 세안화장품 제형의 화장비누 시제품을 제조하여 여드름피부의 개선 효과가 있음을 시험하고자 한다. 또한 이번 연구는 여드름용 화장비누 개발에 진일보하여 약용화장품 산업의 발전에 기여할 것임을 확신한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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