대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book II
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pp.508-518
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2003
SZ95 cell is an immortalized human sebaceous gland cell line that shows the morphologic, phenotypic and functional characteristics of normal human sebocytes. Sebocytes may play crucial parts in the pathophysiologic processes and disorders of the pilosebaceous unit. The secretory activity of the sebaceous gland is remarkably species-specific and acne is an exclusively human disease. Thus, this SZ95 cells offer possibilities for investigations on the physiology of the sebaceous gland and its role in sebum-associated skin disease such as acne. In this study, we investigated the effects of 13-cis-retinoic acid (13-cis-RA) and spironolactone, frequently used as therapeutic agents of acne, on the lipid synthesis and proliferation of human sebocytes. Cell proliferation was determined by MTT assay and cytoplasmic lipid droplets was shown by Oil-red a staining. Total lipid levels were biochemically estimated by the sulfo-phospho-vanilline reagent. 13-cis-RA and spironolactone significantly inhibited proliferation and lipid levels in a dose-dependent manner. Combined treatment with testosterone and 13-cis-RA or spironolactone resulted in a lower total lipid levels than that with androgen alone. These observations indicate that 13-cis-RA and spironolactone are potent inhibitors of both cell proliferation and lipid synthesis in human sebocytes. We will provide experimental evidence that this human sebocyte cell line serves as an adequate tool for evaluating the anti-lipogenic activity of various compounds potentially useful for the bioactive cosmeceutical ingredients on acne skin, and studying the intracellular biochemical markers depending on the types of compounds from various sources.
본 연구는 비자나무(Torreya nucifera (L.) Siebold & Zucc, TN)와 생물전환 된 비자나무 추출물(TNB)의 항염증 효과를 평가하기 위해 수행되었으며 이를 위해 C. acnes에 의해 유도된 RAW264.7 염증 모델에서 염증인자의 발현을 조사하였다. 실험 결과, TNB는 50, 100, 200 ㎍/mL 농도에서 TN의 높은 세포독성을 개선하였으며 nitric oxide (NO)와 NO 합성 효소인 inducible NO synthase (iNOS) 및 prostaglandin의 합성 효소인 cyclooxygenase-2 (COX-2)의 발현을 유의하게 억제하였다. 또한 TNB는 염증성 사이토카인인 tumor necrosis factor-α (TNF-α) 및 interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8의 발현을 유의하게 억제하였으며 특히 IL-6, IL-8의 경우 가장 고 농도인 200 ㎍/mL에서 정상세포 수준으로 감소하였다. 이후 진행된 western blot에서 인산화 된 IκB-α 및 NF-κB의 발현이 농도의존적으로 억제됨을 확인하였으며 인산화가 억제되면서 degradation이 감소하여 TNB처리 농도가 높아짐에 따라 IκB-α의 농도가 증가하는 경향을 보였다. 결론적으로, TNB는 NF-κB신호 전달 경로를 차단함으로써 다양한 염증 매개 인자의 발현을 효과적으로 하향 조절할 수 있으며 이를 통해 항 염증 활성을 유도하는 것으로 확인된다. 이러한 결과를 근거로 TNB가 C. acnes에 의해 유발된 염증성질환의 치료에 효과적인 천연물 소재로 적용될 수 있음을 제안한다.
본 연구에서는 인간 단핵구 세포인 THP-1 세포를 이용하여 berberine의 항염증 활성을 조사 하였다. Propionibacterium acnes의 감염은 THP-1 세포에서 산화질소(NO)와 $TNF-{\alpha}$, IL-8 및 $IL-1{\beta}$와 같은 전 염증성 사이토카인의 생산을 유도했다. 그러나, P. acnes에 의해 유도된 THP-1 세포에 berberine을 처리했을 때, 전 염증성 사이토카인 및 NO의 생성이 유의하게 감소하였다. 또한 우리는 berberine의 항 염증 기능의 신호 전달 경로를 분석하여 berberine이 P. acnes 유도 세포에서 ERK1/2, JNK 및 p38의 인산화를 억제하고 $NF-{\kappa}B$ p65의 발현 및 핵이동을 억제한다는 것을 발견했다. 이러한 결과로부터 berberine은 인간 단핵구 세포에서 $NF-{\kappa}B$ 및 MAPK 신호 전달 경로를 억제함으로써 항 염증 활성을 효과적으로 발휘할 수 있다고 결론지었다. 또한, 이러한 결과는 P. acnes에 의해 유발된 염증성 질환의 치료를 위해 천연물 소재에서 유래한 알칼로이드 화합물인 berberine을 사용하여 천연 치료제를 개발할 수 있는 가능성을 제시하였다.
Objectives: This study was performed to analyze the trend of acne-related experimental studies in Korean medicine. Methods: We searched 17 articles related with experimental study of acne, published Korean medical journals from 2005 to 2014. We classified all articles according to the journal and checked on the kind of herbs. All articles were categorized into two types: cell experimental study and animal experimental study. Results: 1. Total 17 papers were searched; 7 articles (41.2%) were published in the Journal of Korean Medical Ophthalmology, Otolaryngology, Dermatology, 4 articles (23.5%) were published in the Journal of Korean Institute of Pharmacopuncture, 3 articles (17.6%) were published in Korean Journal of Oriental Physiology and Pathology, 2 articles (11.8%) were published in Korean Journal of Herbology, and 1 article (5.9%) was published in the Journal of Korean Medicine. 2. Total 17 kind of herbs were used in the studies; 10 articles (58.8%) used single herb, 7 articles (41.2%) used complex herbs. 3. Total 17 articles were categorized 2 types; 16 cell experimental studies (94.1%), 1 animal experimental study (5.9%). 4. Experimental researches were mainly investigated using Raw 264.7 cell line and P. acnes. The levels of NO, iNOS, $TNF-{\alpha}$, PGE, COX-2, $IL-1{\beta}$, IL-6, NF-kB were analyzed to confirm of herbs' antibacterial, anti-inflammatory, antioxidant activity. Conclusions: Searching for natural antibiotics, it is needed to do experimental studies continuously, and also needed to diversify the kind herbs and experimental bacteria.
This study was carried out to investigate the antibacterial activity against pathogens of acne and the anti-inflammatory effect of 75% ethanol extract and its fractions from the leaves of Prunus sargentii. In the antibacterial activity by the disc diffusion assay, the extract showed the highest effect against Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis in 5 mg/disc. However, the ethyl acetate fraction showed the highest antibacterial activity in 1 mg/disc. On the other hand, the hexane and chloroform fraction showed strong nitric oxide (NO) production inhibitory effect in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cell. In the cell viability of Raw 264.7 by MTT assay, the extract and all fractions were exhibited normal viabilities as nontoxic result. Consequently, the extract from the leaves of P. sargentii and its ethyl acetate fraction could be applicable to functional materials for antibacterial activity related fields. Moreover, the hexane and chloroform fraction could be applicable to candidate materials as anti-inflammatory agent.
The environmentally benign inorganic bacterioide was developed by using waste shell as a matrix and its efficacies against various bacteria were examined in this investigation. The inorganic bacteriocide inhibited strongly the growths of various bacteria such as S. aureus and E.coli. The inorganic bacteriocide also showed strong killing effect on the growth of P.acnes which causes the acne on human face. Moreover, this bacteriocide inhibited the activity of lipoxygenase prominently, indicating notable anti-inflammatory activity of the bacteriocide.
The antibacterial activity-guided fractionation of the MeOH extract of seeds of traditional medicinal plant Prunus japonica resulted in the isolation of linoleic acid and cis-11-eicosenoic acids, and their methyl esters. Linoleic acid inhibited the growth of Propionibacterium acnes, the acne-causing anaerobic bacterium, but cis-11-eicosenoic acid, methyl linoleate, and cis-11-eicosenoate were found to be inactive. Together with isolated linoleic acid, authentic saturated and unsaturated fatty acids were also tested against P. acnes with other bacteria and fungi. Most of the unsaturated fatty acids possessed anti-acne (MIC $16-128{\mu}g/mL$) and antimicrobial properties.
본 실험은 유산균 유래의 박테리오신이 여드름균에 의한 염증성 사이토카인의 발현을 억제하는 효능을 가지는지를 확인하기 위해 수행되었다. 본 실험을 위해 인간의 각질형성세포인 HaCaT 세포에 열처리한 여드름균인 P. acnes을 농도별로 처리하여 염증성 사이토카인인 TNF-α, IFN-γ, IL-8의 발현을 유도하였고, 여드름균과 박테리오신을 HaCaT 세포에 함께 처리하여 여드름균에 의해 증가된 사이토카인의 양이 박테리오신에 의해 어떻게 변화하는지를 확인하였다. P. acnes 균을 1×105, 1×106 그리고 1×107 CFU/ml와 같이 농도별로 처리한 결과, 사이토카인의 발현량이 농도 의존적으로 증가하였는데 TNF-α와 IFN-γ의 발현량은 여드름균을 1×107 CFU/ml로 처리했을 때 두 배 이상 증가하였고 IL-8의 발현량은 네 배 이상 증가하였다. 그러나 여드름균에 의해 증가되었던 TNF-α, IFN-γ 그리고 IL-8의 발현량은 박테리오신을 처리하였을 때 농도 의존적으로 유의하게 감소하였다. 이상의 결과로 보아 김치유산균인 L. plantarum K-1 BR 균주에서 분리한 박테리오신은 여드름균에 의한 염증유발을 완화시키는 효과가 있다고 할 수 있다.
도화 추출물의 항산화능 및 항염증 효과를 검증하여 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 검증하였다. 도화의 항산화능 측정으로 전자공여능을 측정한 결과 도화 에탄올 및 아세톤 추출물 500ppm에서 90.0% 이상의 효과를 나타내어, 합성 항산화제로 알려진 BHT와 유사한 효과를 나타내었으며, SOD 유사활성능 측정 결과 도화 에탄올 및 아세톤 추출물 1,000ppm에서 40.0% 이상의 활성을 나타내었다. Xanthine oxidase 저해활성능 측정 결과 도화 에탄올 및 아세톤 추출물 1,000 ppm에서 vitamin C와 유사한 30.0%의 효과를 나타내어, 도화 열수 추출물에 비해 도화 에탄올 및 아세톤 추출물의 효과가 높게 나타났다. 항염증 효과 측정으로 hyaluronidase 저해활성을 측정한 결과 도화 열수, 에탄올 및 아세톤 추출물에서 35.0%의 저해활성을 나타내었으며, macrophage 세포를 이용한 nitric oxide (NO) 저해활성을 측정한 결과 도화 추출물 모든 농도에서 12시간 이후부터 NO 생성량이 억제됨을 확인할 수 있었다. 또한 피부염증 유발균인 Staphylococcus epidermidis와 Propionibacterium acnes의 항균효과를 측정한 결과 도화 에탄올 추출물에서 항균 효과를 나타내었다.
In the course of screening natural extracts for hair growth, we found that the extract of dried root of Sophora flavescens has the prominent hair growth promoting effect. After topical application of Sophora flavescens extract to the back of C57BL/6 mice, the earlier conversion of telogen-to-anagen phase was induced. In addition, the Sophora flavescens extract revealed to possess potent inhibitory effect on $5{\alpha}$-reductase Ⅰ and Ⅱ activity. The growth of dermal papilla cells and mouse vibrissae hair follicle cultured in vitro, however, was not affected by Sophora flavescens extract treatment. RT-PCR analysis showed that Sophora flavescens extract induced mRNA levels of growth factors such as insulin-like growth factor-Ⅰ and keratinocyte growth factor in dermal papilla cells, suggesting hair growth promoting effect of Sophora flavescens extract is mediated through inhibition of $5{\alpha}$-reductase type Ⅱ activity and the regulation of growth factors in dermal papilla cells. Furthermore, Sophora flavescens extract also showed anti-bacterial effect on Propionibacterium acnes. These results suggest that Sophora flavescens can be used as a potent treatment agent for helping hair growth stimulation and acne inhibition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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