고미도가 높은 영지버섯 균주를 선발하기 위하여 농업기술연구소 균이과에 보존 중인 11개 균주의 특성을 조사하여 본 결과는 다음과 같다. 고미도는 편각지 중에서 ASI 7071, 7091 균주, 분지형에서는 ASI 7074, 7094 균주가 높았다. 균사생장은 GCM 배지에서는 ASI 7091, 참나무톱밥 배지에서는 ASI 7010, 7048, 7075 균주가 양호하였다. 자실체의 개체중은 ASI 7004가 가장 무겁고 ASI 7075 균주가 가벼웠으며, 자실체 두께는 ASI 7071, 크기는 ASI 7094 균주가 양호하였다. 그리고 전기영동에 의한 동위효소 밴드의 양상은 esterase에서 분지형은 거의 비슷하였으나 편각지는 여러 형태로 나타났으며, leucine aminopeptidase에서는 편각지만 밴드를 나타내었다.
우리나라 여러 딸기 재배지에서 전형적인 시들음 증상을 나타내는 이병식물에서 분리한 32개의 Fusarium oxysporum 균주들을 vegetative compatibility와 전기영동에 의한 동위효소상의 차이에 의해 분류하고 이들과 병원성과의 관계를 알아보았다. Nitrate nonutilizing(nit) mutant를 이용하여 vegetative compatibility group으로 분류해 본 결과 크게 A, B, C, D의 4개 그룹으로 나눌 수 있었으며 A그룹에는 15개 균주, B그룹에는 7개 균주, C와 D그룹에는 각각 2개 균주, 그리고 single VCG인 6개 균주가 존재하였다. 전기영동에 의한 esterase, catalase, acid phosphatase, leucin-aminopeptidase(LAP)의 동위효소상을 비교하여 본 결과 I, II, III, IV의 4개 그룹으로 나눌 수 있었으 I 그룹에는 18개 균주, II그룹에는 2개 균주, III그룹에는 6개 균주, IV그룹에는 6개 균주로 분류할 수 있었다. 또한, VCG의 A와 D그룹에 속하는 모든 균주들의 동위효소상의 I 그룹에 속하였으며 VCG B그룹의 7개 균주들 중에서 5개 균주가 동위효소상의 IV그룹, 7개 균주들 중에서 5개 균주가 동위효소상의 IV그룹, 나머지 2개 균주는 I 그룹과 III 그룹에 속하였으며 C그룹의 균주는 III과 IV 그룹에 속하였고, single VCGs들은 III 그룹에 4개 균주, II 그룹에 2개 균주가 속하므로 VCG와 동위효소상 간에는 밀접한 관계가 있음을 알 수 있었다. 4개 딸기 품종에 대해 병원성을 비교하여 본 결과 VCG A에서 선발된 2개 균주들은 보교조생에 대해 가장 병원성이 강하였으며 정보나 여홍에 대해서도 강한 병원성을 가지고 있었다. 반면에 B 그룹에서 선발된 2개 균주들은 4개 품종에 대해 병원성이 약하거나 거의 없었으며 C 그룹에서 선발된 1개 균주는 여홍에 대해 상대적으로 가장 강한 병원성을 가지고 있었다.
To identify genes involved in rice Pi5-mediated disease resistance to Magnaporthe oryzae, we compared the proteomes of the RIL260 rice strain carrying the Pi5 resistance gene with its susceptible mutants M5465 and M7023. Proteins were extracted from the leaf tissues of both RIL260 and the mutant lines at 0, 24, and 48 h after M. oryzae inoculation and separated by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE). Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) analysis identified eight proteins that were differently expressed between the resistant and susceptible plants (three down- and five up-regulated proteins in the mutants). The down-regulated proteins included a triosephosphate isomerase (spot no. 2210), a 2,3-bisphosphoglycerate-independent phosphoglycerate mutase (no. 3611), and an unknown protein (no. 4505). In addition, the five up-regulated proteins in the mutants were predicted to be a fructokinase I (no. 313), a glutathione S-transferase (no. 2310), an atpB of chloroplast ATP synthase (no. 3616), an aminopeptidase N (no. 3724), and an unknown protein (no. 308). These results suggest that proteomic analysis of rice susceptible mutants is a useful method for identifying novel proteins involved in resistance to the M. oryzae pathogen.
Crease of Streptococcus salivarius is believed to play a critical role in bacterial ecology and pH homeostasis in the mouth, and consequently affect the pathogenesis of dental caries and periodontal diseases. Expression of the urease gene is greatly enhanced by low p. f. excess of Carbohydrate, and faster growth. It was observed that urease activity of the strains of S. salivarius that exhibited no of low urease activity was not increased even in low pH condition. In this study, it was hypothesized that the urease gene of the strains is absent, defected, or greatly changed by genetic combination. In order to prove this hypothesis, chromosomes were obtained from 28 S. salivarius strains which had been isolated from normal teeth and carious lesions, subjected to polymerase chain reaction (PCR) using primers encoding highly conserved sequence from ureC, and then the obtained PCR products were compared. The results were as follows: 1. After PCR the strains generated either one of 0.54- and 1.3-kbp PCR products, or none. 2. All 16 strains having a higher urease activity(<50${\mu}mol/min/mg$) produced 0.54-kbp PCR products. 3. Twelve strains without urease activity and with a lower urease activity(<50${\mu}mol/min/mg$) yield either one of 0.54 and 1.3-kbp PCR products, or none. 4. The DNA sequence of the 0.54-kbp PCR product (pCAP-0.54) exhibited 95% identity to the ureC of S. salivarus 57.I; 30bp were found to be different, which led to difference of only 2 amino acids in the sequence. 5. The DNA sequence of the 1.3-kbp PCR product(pCAP-1.3) was found to be highly homologous to the aminopeptidase C gene of Streptococcus thermophilus. Overall results indicate that there are considerable variations of the urease genes from S. salivarus strains and the variations may affect the uncolytic activity of the bacteria directly of indirectly.
Phenylalnine은 enkephalin, endorphine의 분해를 촉진하는 carboxypeptidase, aminopeptidase의 작용을 억제하는 필수아미노산으로 식욕억제, 정서 안정, 통증, 기분조절 관련 아미노산이다. 자연계의 L-phenylalanine과 비교하여 물리화학적 당량반응으로 구조가 보다 안정한 DL-phenylalnine(DLPA)을 소재로 가공적성을 조사하였다. DLPA는 $60^{\circ}C$ 이상의 온도와 농도변화에서 용해 시 98%T 이상의 값을 나타내어 가공 적합성을 보였고, 다양한 pH 범위에서도 99%T 이상의 값을 보여 용해 안정성을 확인하였다.
B. subtilis cx1이 생산하는 박테리오신(BSCX1)을 부분 정제하고 특성을 규명하였다. BSCX1은 pH 안정성 실험에서 pH 2.5~9.5 구간에서도 안정되게 항균활성을 유지하였다. 각종 효소에 대한 안정성 실험에서는 protease, trypsin, proteinase K, 그리고 carboxypeptidase로 처리하였을 때는 완전히 항균활성이 사라졌고, $\alpha$-amylase, lipase, aminopeptidase는 항균활성에 영향을 미치지 못하였다. 이상의 결과로 본 항균물질이 단백질계열의 물질이며 당이나 지질 결합은 항균활성에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 추정되었다. 그러나 열에는 불안정하여 $60^{\circ}C$이상에서는 15분 안에 완전히 그 항균활성을 상실하였으며 $50^{\circ}C$ 에서는 15분만에 역가의 50%가 실활 되었다. 이에 반하여 저온에서는 무척 안정하여 $-20^{\circ}C$와 $-70^{\circ}C$에서 수개월간 보관하여도 여전히 항균활성을 그대로 유지하였다. Tricin-SDS-PAGE를 통하여 BSCX1의 분자량은 약 9,500 dalton으로 확인되었ekl. BSCX1은 pH2.5에서 9.5에 이르는 넓은 pH 영역에서 그 활성을 유지하므로, 기존에 개발된 nisin이나 유산균 유래의 항균물질이 pH 안정성이 떨어진다는 단점을 보완할 수 있는 생물학적 식품보존제로서의 개발 가능성을 높이 시사하였다.
To study the feasibility of transmucosal delivery of leucine enkephalin (Leu-Enk) and $[D-ala^2]$-leucine enkephalinamide (YAGFL), their degradation extents and pathways in various rabbit mucosa extracts were investigated by high performance liquid chromatography. The degradation of Leu-Enk and YAGFL was observed to follow the first-order kinetics. The degradation half-lives of Leu-Enk in the nasal, rectal and vaginal mucosal extracts were 1.62, 0.37 and 1.12 hrs and those of YAGFL were 30.55, 9.70 and 6.82 hrs, respectively, indicating Leu-Enk was degraded in a more extensive and rapid manner than YAGFL. But the mucosal and serosal extracts of the same mucosa showed the similar degradation rates for both pentapeptides. The degradation was most rapid in the neutral pH and increasing concentrations of substrates retarded the degradation rates. The maior hydrolytic fragments of Leu-Enk were Des-Tyr-Leu-Enk and tyrosine, indicating the enzymatic hydrolysis by aminopeptidases. However, the data also suggested endopeptidases such as dipeptidyl carboxypeptidase and dipeptidyl aminopeptidase could play some role in the degradation of Leu-Enk. On the other hand, the hydrolytic fragments of YAGFL in all the mucosa extracts were mainly Tyr-D-Ala-Gly and Phe-Leu-Amide, demonstrating the hydrolytic breakdown by endopeptidases. The degradation pathways were further explored by concomitantly determining the formation of smaller metabolites of primary hydrolytic fragments of Leu-Enk and YAGFL in the mucosa extracts.
Min Jae Kim;Tae Jin Kim;Yun Ji Kang;Ji Yeon Yoo;Jeong Hwan Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권2호
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pp.211-218
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2023
A cryptic plasmid (pTH32) was characterized from Tetragenococcus halophilus 32, an isolate from jeotgal, Korean traditional fermented seafood. pTH32 is 3,198 bp in size with G+C content of 35.84%, and contains 4 open reading frames (ORFs). orf1 and orf2 are 456 bp and 273 bp in size, respectively, and their translation products showed 65.16% and 69.35% similarities with RepB family plasmid replication initiators, respectively, suggesting the rolling-circle replication (RCR) mode of pTH32. orf3 and orf4 encodes putative hypothetical protein of 186 and 76 amino acids, respectively. A novel Tetragenococcus-Escherichia coli shuttle vector, pMJ32E (7.3 kb, Emr), was constructed by ligation of pTH32 with pBluescript II KS(+) and an erythromycin resistance gene (ErmC). pMJ32E successfully replicated in Enterococcus faecalis 29212 and T. halophilus 31 but not in other LAB species. A pepA gene, encoding aminopeptidase A (PepA) from T. halophilus CY54, was successfully expressed in T. halophilus 31 using pMJ32E. The transformant (TF) showed higher PepA activity (49.8 U/mg protein) than T. halophilus 31 cell (control). When T. halophilus 31 TF was subculturd in MRS broth without antibiotic at 48 h intervals, 53.8% of cells retained pMJ32E after 96 h, and only 2.4% of cells retained pMJ32E after 14 days, supporting the RCR mode of pTH32. pMJ32E could be useful for the genetic engineering of Tetragenococcus and Enterococcus species.
본 시험은 커피박 첨가 사료가 육계의 사양 성적, 소장 점막 세포와 혈액의 생화학 성분, 소장 점막 세포의 효소 활성도 및 맹장 미생물의 균총에 미치는 영향에 대하여 조사하기 위하여 실시되었다. 실험 설계로서 3일령 육계 162수를 각 처리구당 54수씩(n=6, 9수/케이지), 대조군(CON), 커피박 0.5%(CM I) 및 1.0%(CM II) 등 3 처리군에 완전임의 배치하였으며, 커피박 분말은 육계 후기 사양 기간(22~35일령)에 2주 동안 급여하였다. 사양 시험 결과, 커피박 0.5 및 1.0% 첨가는 사양 성적에는 유의적 영향을 미치지 않았다. 소장 점막 세포의 glucose 농도는 커피박 0.5% 및 1.0% 첨가군에서 대조군에 비해 유의하게 감소되는 것으로 나타났으나(P< 0.05), 혈액에서는 처리군 간에는 차이가 없었다. 혈액 중 aspartate aminotransferase(AST)는 커피박 1.0% 군에서 대조군에 비해 유의적으로 높았으나(P<0.05), ${\gamma}$-glutamyl trans- peptidase(${\gamma}$-GTP)는 처리군간 차이가 없었다. 소장 점막 세포에 존재하는 maltase, leucine aminopeptidase(LAP) 및 alkaline phosphatase(ALP) 활성도는 차이가 없었으나, sucrase 활성도는 커피박 첨가 수준에 비례하여 활성도가 현저히 감소되었다(P<0.05). 맹장의 미생물 균총을 분석한 결과, 대조군에 비해 커피박 첨가군(0.5 및 1.0%)에서 유산균에는 차이가 없었지만, 대장균 균총은 현저히 감소되었다(P<0.05). 결론적으로 커피박 1.0% 첨가 사료는 소장 점막세포의 glucose와 sucrase 활성도 감소와 혈액 AST의 농도를 증가시켜 부정적인 영향이 크므로 0.5% 커피박 첨가군이 생리적 지표에 미치는 영향이 적고, 맹장에서 대장균의 성장을 억제하는 항균 효과가 있으므로 육계 사료의 기능성 소재로서 바람직한 적정한 수준이 될 것으로 판단된다.
본 연구는 복합생균제(L. plantarum, B. subtilis, Saccharomyces cerevisiae)를 0%(CON, 대조군), 0.25%(PC1) 및 0.5%(PC2) 수준으로 급여하여 육계의 생산성, 장기 무게, 혈액 생화학적 성상 및 면역지표, 소화효소 활성도, 분의 미생물 군락 및 유해가스 발생에 미치는 영향을 조사하기 위해 실시되었다. 복합생균제 급여는 체중 등과 같은 생산성에는 유의적 영향을 미치지 않았다. 간과 흉선 무게는 복합생균제 급여에 따른 영향이 없었으나, 소장 점막세포 무게는 PC1군에서 유의하게(P<0.05) 증가하였다. Glucose, cholesterol, AST, ALT 등과 같은 혈액 생화학성분은 복합생균제 급여에 따른 변화가 없었다. 분비형 면역글로불린 A(sIgA) 수준은 PC2군에서 대조군과 비교해 소장 점막세포에서 유의하게(P<0.05) 증가하였으며, 혈액에서도 PC2군에서 대조군보다 약 20% 증가하는 경향을 보였다. 혈액과 소장 점막세포의 IL-1β 수준은 복합생균제 급여에 따른 차이가 없었다. 또한, 복합생균제 급여가 소장 점막세포의 maltase, sucrase 및 leucine aminopeptidase 활성도에는 영향을 미치지 않았다. 한편 Lactobacillus 및 Saccharomyces cerevisiae cfu 수준은 복합생균제 0.5% 급여군에서 대조군보다 유의하게(P<0.05) 증가하였고, E. coli cfu 값은 감소하였다(P<0.05). 복합생균제 0.5% 급여 시 분에서 황화수소(H2S) 발생량은 유의하게(P<0.05) 감소하였으며, 메틸메르캅탄(CH3SH) 발생량 역시 50% 수준으로 낮았다. 결론적으로 복합생균제 급여(0.25% 및 0.5%)는 육계의 생산성에는 영향을 미치지 않았지만 0.5% 수준으로 급여할 경우 소장 점막세포의 sIgA 증가와 유익 미생물 균총의 증식을 유도하여 분의 유해가스 발생을 감소시키는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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