• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권3호
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• pp.188-192
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• 1989

토양에서 분리된 알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로부터 B. subtilis 207-25 에 cloning된 promoter 유전자들을 그 공여 균주로 재형질전환시킬 수 있었다. 그 결과 promoter 유전자들은 공여 균주내에서 대부분의 특성들이 B. subtilis 207-25 내에서와 유사하였다. 재조합 plasmid p-12, p-l2Bl 및 p-l2B2의 CAT 비활성은 B. subtilis 207-25의 형질전환체보다 약간 높게 나타났으며 반면 pPL708의 CAT 비활성은 Bacillus sp. YA-14에서 오히려 상대적으로. 낮게 나타났다. Chloramphenicol에 의한 induction 정도도 월등하게 높은 것으로 나타나 이를 이용한 expression vector의 유용성이 높은 것으로 생각되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.429-432
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• 1990

알카리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로 부터 유래된 promoter를 subcloning하여 그 생화학적 특성과 포자형성과의 관계를 조사하였다. 알카리내성 Bacillus sp.와 B.subtilis에서 promoter의 활성은 포자가 형성되기 시작하는 단계에서 증가하기 시작했다. 또한 배지내 glucose가 1.0(w/v) 첨가시 promoter 활성이 억제되었다. 5가지의 spoO 유전자 중에서 3가지 유전자 (spoOB, spoOH, spoOJ) 산물이 promoter 활성에 필요하다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권2호
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• pp.126-130
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• 1988

토양에서 분리한 알카리 내성 Bacillus sp. YA-14 의 promoter를 Bacillus promoter probe vector인 pPL703을 이용하여 Bacillus subtilis내에 cloning 하였다. 얻어진 형질전환체 중 promoter 활성이 가장 높은 균주의 CAT 비활성은 8.07로 expression vector인 pPL708의 CAT 비활성보다 2.5배 이상 높았으며 대수 증식기가 끝난 이후에 그 활성이 급격하게 증가하였다. 재조합 plasmid내의 삽입 DNA 단편은 그 크기가 2.8kb이고 제한효소 BamHI, Sal I 인식부위가 각각 한군데 존재하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권1호
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• pp.21-24
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• 1991

알칼리 내성 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA로부터 분리된 promoter를 subcloning하여 생화학적 특성을 조사하였다. B.subtilis와 promoter 공여균주, Bacillus sp. YA-14에서 promoter의 활성은 포자형성 초기단계에서 급격히 증가하였으며 1.0(w/v) glucose 첨가로 promoter 활성이 억제되었고 c-GMP에 의해 저해되었던 활성이 증가하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권4호
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• pp.316-319
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• 1988

토양으로부터 분리한 알카리내성 Bacillus sp. YA-14의 Pectate lyase(PL) 유전자를 E. coli에 cloning하여 제조한 재조합 plasmid pYPC29는 삽입 된 1.6kb 단편내에 PL 유전자를 함유하고 있었으며, 이 외래 DNA가 Bacillus sp. YA-14의 chromosomal DNA에서 유래된 것임을 Southern hybridization을 통하여 확인하였다. 재조합 plasmid pYPC29는 E. coli내에서 안정하게 존재하였으며 이를 함유한 재조합체의 전체 PL 활성 중 약 70%가 periplasmic space에 존재하였다.

• 산업기술연구
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• 제20권A호
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• pp.39-44
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• 2000

Highly viscous biopolymer from alkali-tolerant Bacillus sp. was purified and its solution properties were investigated. The intrinsic viscosities for crude biopolymer and biopolymers purified by dialysis or CPC(cetylpyridinium chloride) treatment were 58.24, 73.60 and 42.18 dL/g, respectively. The intrinsic viscosity of biopolymer showed the maximum value at the neutral pH but it was decreased remarkably at the alkaline or acidic pH. Biopolymer exhibited the property of polyelectrolyte, showing the sharp decrease of intrinsic viscosity by the addition of NaCl. Intrinsic viscosity of dilute solution at the low NaCl concentration was exponentially dependent on temperature and its temperature dependency was increased with NaCl concentrations. The chain stiffness, coil overlap parameter, and critical concentration were 0.09, 5.25 and 0.07g/dL, respectively. Temperature dependency on intrinsic viscosity of biopolymer solution was different each other at $45^{\circ}C$. Flow activation energies at temperatures above $45^{\circ}C$ were constant, while those at temperatures below $45^{\circ}C$ increased with increase of added NaCl concentration.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제3권3호
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• pp.139-145
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• 1993

The nucleotide sequence of the xylanase gene (xynS) from alkali-tolerant Bacillus sp. YA.14 was determined and analyzed. A 639 base pairs open reading frame for xynS gene was observed and encoded for a protein of 213 amino acids with a molecular weight of 23, 339. S1 nuclease mapping showed that the transcription initiation site of the xynS gene did not exist in the cloned DNA. Ribosome binding site sequence with the free energy of -18.8 Kcal/mol was observed 8 base pairs upstream from the initiation codon, ATG. The proposed signal sequence consisted of 28 amino acids, of which 3 were basic amino acid residues and 21 were hydrophobic amino acid residues. When the amino acid sequences of xylanases were compared, Bacillus sp. YA-14 xylanase showed 48% homology with Bacillus sp. YC-335 xylanase and 96% homology with xylanases from B. subtilis and B. circulans.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권2호
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• pp.154-159
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• 1989

Chromosomal DNA fragments of Bacillus sp. YA-14 isolated from soil as a potent xylan hydrolyzing bacterium, were ligated to a vector plasmid, pBR322, and used to transfer Escherichia coli HB101 cells. The recombinant plasmid pYDC21 was found to enable the transformants to produce xylanase. pYDC21 was found to contain the 3 kb HindIII fragment originated from the Bacillus sp. YA-14 chromosomal DNA by southern hybridization. The optimum temperature and pH for the reaction of xylanse produced by E. coli (pYDC21) were appeared at 50$_7$C and pH 7.0, respectiveiy. the xylanase enzyme was stable between pH 5.0 and 7.0 and maintained stably up to 4$0^{\circ}C$.

• 한국식품영양학회지
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• 제12권3호
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• pp.233-239
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• 1999

To develop the potential use as new host strain for gene cloning the optimal conditions for transform-ation of alkali-tolerant Bacillus sp. were examined. The Bacillus sp. YA-14 was cultured to late logarith-mic growth phase at 37$^{\circ}C$ in modified SPI medium (pH8.0) containing 0.4% MgSO4 0.5mM CaCl2 1 ml of competent cell was mixed with 0.5$\mu$g of plasmid DNA and incubated with shaking at 37$^{\circ}C$ for 40min. The transformation frequency under the optimal condition was 4.53$\times$10-6 CFU/ml/g plasmid DNA. The electrophresis and stably maintained in the new host.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.406-410
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• 1990

토양에서 분리한 알칼리내성 Bacillus sp.의 자체 chromosomal DNA에서 유래된 strong promoter를 지닌 plasmid p-12B1을 공여균주에 삽입시키고 이 promoter의 활성을 최적화할 수 있는 배양조건을 검토하였다. 글루코오스가 고갈된 시점부터 세포의 활성은 유지되나 포자는 형성되지 않을 정도로 낮은 글루코오스 소비속도를 유지해 제한된 글루코오스를 연속적으로 공급해줌으로써 promoter의 활성을 최대로 높일 수 있었다. 또한 배지조성의 변화로 균체를 생육시킨 후 유전자 발현을 유도하는 것이 가능하였으며, 이 점에 대해서는 보다 구체적인 연구가 진행되어야 할 것이다.